血管平滑肌細(xì)胞在頸動脈粥樣硬化斑塊形成患者中的變化

王海威 孫溫偉 郭 凱

（1、濰坊市中醫(yī)院，山東 濰坊261041；2、濰坊市人民醫(yī)院，山東 濰坊261041）

近年來，心腦血管疾病已成為全世界內(nèi)嚴(yán)重危害人類身心健康的重大疾病，動脈粥樣硬化（AS）病變?yōu)槠渲饕?。AS 發(fā)生機(jī)制較復(fù)雜，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞（VSMC）等多種細(xì)胞參與了AS 病變的形成[1]。既往對AS 的研究多集中在血管內(nèi)膜和外膜上，近年來越來越多學(xué)者強(qiáng)調(diào)VSMC 在AS 發(fā)生發(fā)展中的重要作用。有研究表明，VSMC 的起源、表型轉(zhuǎn)化、凋亡、鈣化等均與AS 發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[2]。本研究探討了VSMC 在頸動脈粥樣硬化斑塊形成患者中的變化，為臨床如何穩(wěn)定AS 斑塊提供科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)報道如下，

1 資料和方法

1.1 一般資料

將2018 年1 月至2019 年12 月收治的70 例頸動脈狹窄患者作為研究對象，均擇期行頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)（CEA）。根據(jù)患者術(shù)前有無短暫性腦缺血發(fā)作（TIA）或同側(cè)黑朦等一過性缺血癥狀分為有癥狀組，31 例，男20 例，女11 例，年齡50-76 歲，平均（64.13±7.49）歲；無癥狀組，39 例，男28 例，女11例，年齡50-80 歲，平均（64.43±7.54）歲。兩組一般資料比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有均衡性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理會委員批準(zhǔn)，獲患者本人及家屬知情同意。

1.2 頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)

術(shù)前均行數(shù)字減影血管造影（DSA）檢查，明確血管狹窄等情況，均由同一組外科醫(yī)師完成。均接受氣管插管靜脈復(fù)合麻醉，仰臥位，頸肩部墊高，頭伸展并轉(zhuǎn)向?qū)?cè)，以胸鎖乳突肌前緣作切口，1%利多卡因局部封閉頸動脈竇，預(yù)防頸動脈竇反射，暴露頸總、頸外和頸內(nèi)動脈，放置血管阻斷帶，注意保護(hù)顱神經(jīng)。在全身肝素化后，分別阻斷頸內(nèi)動脈、頸外動脈和頸總動脈。將頸總動脈和頸內(nèi)動脈縱向切開，放置頸動脈輪流管，剝脫、切除內(nèi)膜斑塊，應(yīng)用7-0prolene 血管縫線固定漂浮的內(nèi)膜片。沖洗內(nèi)腔后，以人工血管補(bǔ)片修復(fù)頸動脈切口，在打結(jié)前將頸動脈排氣后阻斷，打結(jié)后依次開放頸外動脈、頸總動脈、頸內(nèi)動脈。充分止血后，留置直徑4mm 引流管，逐層縫合切口。

1.3 標(biāo)本處理及檢測

4%甲醛固定48h，10%乙二胺四乙酸脫鈣處理72h，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片，Movat 染色[3]。以平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫組化染色，鑒定血管平滑肌細(xì)胞（VSMC）。在100×鏡下，隨機(jī)選取3 個視野，應(yīng)用Image J 軟件檢測每個視野中SMC 積分吸光度值（IA），取平均即為平均積分吸光度值（MA）；同時檢測上述3 個視野中切片面積（mm2），取平均面積，再計算SMC 在單位面積中MA（MA/mm2）。

1.4 統(tǒng)計方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)一整理，采用SPSS17.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計量資料以±s表示，采用t檢驗，計數(shù)資料以n（%）表示，采用卡方檢驗，檢驗標(biāo)準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 癥狀與斑塊穩(wěn)定性分析

表1 可見，有癥狀組斑塊不穩(wěn)定率為77.42%，無癥狀組斑塊不穩(wěn)定率為7.69%，比較有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=27.140，P＜0.01）。

2.2 各組VSMC 的MA 分析

表2 可見，有癥狀組VSMC 的MA 顯著高于無癥狀組，比較有統(tǒng)計學(xué)意義（t=8.126，P＜0.01）；斑塊不穩(wěn)定組VSMC 的MA 顯著高于斑塊穩(wěn)定組，比較有統(tǒng)計學(xué)意義（t=6.209，P＜0.01）。

2.3 各組VSMC 單位面積MA

表3 可見，有癥狀組基底部、肩部、纖維帽的VSMC 單位面積MA 均顯著高于無癥狀組，比較有統(tǒng)計學(xué)意義（t=11.988、5.241、6.053，P＜0.01）。

表1 兩組斑塊穩(wěn)定性比較[n(%)]

表2 各組SMC 的MA 比較（±s）

表2 各組SMC 的MA 比較（±s）

組別有癥狀組無癥狀組斑塊穩(wěn)定組斑塊不穩(wěn)定組例數(shù)（n）31 39 40 30 MA 1312±142 1637±183 1572±169 1304±191 t 值 P 值8.126＜0.01 6.209＜0.01

表3 各組SMC 單位面積MA 比較（±s）

表3 各組SMC 單位面積MA 比較（±s）

組別例數(shù)（n）VSMC 單位面積MA（MA/mm2）有癥狀組無癥狀組t 值P 值31 39基底部1149±126 1632±194 11.988＜0.01肩部1455±157 1688±204 5.241＜0.01纖維帽1355±166 1608±183 6.053＜0.01

3 討 論

VSMC 是構(gòu)成血管壁組織和維持血管張力的重要細(xì)胞之一，其增值與遷移在AS 形成發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，它是“纖維帽”的重要組成成分，是決定斑塊“纖維帽”穩(wěn)定性的主要因素[4]。在生理或病理條件下，VSMC 均會表型轉(zhuǎn)化，表型轉(zhuǎn)化后的VSMC 具有巨噬細(xì)胞標(biāo)志物和特性。Shankman 等[5]人發(fā)現(xiàn)，VSMC 表型轉(zhuǎn)化在AS 形成中具有重要作用，且抑制VSMC 表型轉(zhuǎn)化對動脈具有保護(hù)作用。最新研究表明[6]，VSMC 通過表型轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)自身的增值、遷移和凋亡，從而參與AS 發(fā)生發(fā)展。

AS 是一種慢性炎癥疾病，隨著病情發(fā)展，各種炎癥因子激活血管壁內(nèi)的VSMC，致使迅速增值[7]，增值后VSMC 表型轉(zhuǎn)化，且在各種細(xì)胞因子刺激下，使VSMC 從血管中膜遷移至內(nèi)膜，從而使血管壁增厚和斑塊形成。本研究結(jié)果顯示，有癥狀組VSMC 顯著低于無癥狀組（P＜0.01），斑塊不穩(wěn)定組VSMC 顯著低于斑塊穩(wěn)定組（P＜0.01），由此推測，VSMC 在穩(wěn)定斑塊高表達(dá)與斑塊穩(wěn)定性密切相關(guān)，其數(shù)量多少與一過性缺血性癥狀發(fā)生也有密切聯(lián)系，與崔藝耀等[8]人報道一致。另外，有癥狀者斑塊的基底部、肩部及纖維帽處VSMC 均顯著低于無癥狀者，提示VSMC 分布不均與臨床事件發(fā)生亦有關(guān)。然而，VSMC 增值似乎并不是斑塊形成的主要驅(qū)動因素，且其遷移意義也不是十分明確，但VSMC凋亡和老化確實有助于動脈粥樣硬化斑塊形成，且易引起斑塊破裂[9]。

綜上，VSMC 在頸動脈粥樣硬化斑塊形成中扮演十分重要的角色，深入研究VSMC 在AS 發(fā)生發(fā)展中具體機(jī)制，為未來尋找AS 新治療新靶點。