基于外周血免疫分子參數建立的Fisher判別模型對進展性腦梗死的診斷價值

黃杰,萬金麗,謝偉賢

1南方醫科大學附屬佛山醫院，廣東佛山 528000;2海南醫學院

急性腦梗死又稱缺血性腦卒中，是由于顱內供血缺乏，頸動脈和椎動脈狹小或阻塞導致腦組織缺血缺氧，從而引發腦實質病變梗死，繼而造成神經功能缺失等系列的臨床癥狀[1]。進展性腦梗死(SIP)是急性腦梗死的常見臨床亞型，占急性腦梗死的26%～43%，且殘障率和病死率高[2]。SIP發病機制復雜，臨床癥狀表現不夠典型，這導致無法及時對SIP進行診斷評估以及病程干預。病程進展會在一定程度上破壞免疫內環境而使得免疫系統功能發生改變，這也是致殘的原因之一[3]。本研究回顧性分析SIP患者外周血免疫分子參數指標水平變化，從而建立Fisher判別模型來對SIP的病程干預提供客觀的診療判斷依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取南方醫科大學附屬佛山醫院2018年1月～2019年10月神經內科收治的120例急性腦梗死患者作為研究對象。所有研究入組對象符合中國急性缺血性腦卒中診治指南2010版的相關診斷標準[4]：①臨床癥狀表現為頭暈、偏癱、失語、意識障礙等。②神經專科檢查包含陽性體征。③顱腦CTA、MRI影像結果提示相關腦梗死責任病灶信息。CTA明確有關血管閉塞或狹窄信息；DWI發現缺血灶，確定病灶大小、部位，PWI顯示腦血流動力學改變。排除標準：①不愿意配合醫學觀察研究；②心、肝、腎功能異常；③血液感染、中樞神經系統感染、腦出血、腦腫瘤疾病等。根據入院期間病程是否進行性加重[以美國國立衛生院神經功能缺損評分(NIHSS評分)增加>2分作為量化指標][5]，將患者分為非進展組(42例)、進展組(78例)。非進展組男18例、女24例，年齡(65.17±16.63)歲；進展組男38例、女40例，年齡(69.03±11.65)歲。兩組年齡、性別資料比較，差異無統計學意義。本研究經醫院倫理委員會批準，所有患者知情同意。

1.2 外周血淋巴細胞亞群及免疫球蛋白水平檢測 外周血細胞亞群檢測樣本為2 mL全血(空腹采集，并置于EDTA-K2紫色管中)，采用BD FACSCanto流式儀進行檢測。BD流式淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+CD56+)檢測試劑由美國BD公司提供。免疫球蛋白檢測樣本為3 mL血清(空腹采集，置于分離膠管中，3 000 r/min離心5 min,分離血清)，采用貝克曼Au5400生化儀進行檢測。IgG、IgA、IgM免疫球蛋白檢測試劑由波音特生物提供。檢驗過程嚴格遵守SOP文件進行，對儀器試劑進行定標，并做好室內質控。

2 結果

2.1 兩組外周血淋巴細胞亞群及免疫球蛋白水平比較 進展組外周血CD3+%、CD4+%、CD4+%/CD8+%及IgA水平均低于非進展組(P均<0.05)。見表1、2。

表1 兩組外周血淋巴細胞亞群水平比較

表2 兩組外周血免疫球蛋白水平比較

2.2 外周血免疫分子參數對SIP的診斷價值 見表3。

表3 外周血免疫分子參數對SIP的診斷價值

2.3 基于外周血免疫分子參數建立的Fisher判別模型對SIP的診斷價值 運用Fisher判別分析法，擬合CD3+%、CD4+%、CD4+%/CD8+%及IgA四個參數水平構建Fisher評估函數模型。F非進展組=0.75X1+0.37X2+6.03X3+7.46X4-50.17，F進展組=0.71X1+0.22X2+5.75X3+6.07X4-37.03。公式中X1代表CD3+%、X2代表CD4+%、X3代表CD4+%/CD8+%、X4代表IgA。相較于單一指標(CD3+%、CD4+%、CD4+%/CD8+%及IgA)，Fisher判別模型提高了診斷SIP的靈敏度、特異度及準確率，并且降低了診斷SIP漏診率及誤診率。見表4。

3 討論

SIP病程進展會在一定程度上破壞免疫內環境，改變免疫系統功能，這也是SIP致殘的原因之一[3]。CD3+%、CD4+%水平代表機體細胞免疫功能水平，外周血CD3+%、CD4+%水平持續降低，說明機體可能存在一定程度的免疫功能抑制。羅煥等[6]認為腦梗死發生后機體的應激性反應導致CD3+%、CD4+%水平降低。T淋巴細胞發生功能性紊亂時，T細胞亞群各細胞總數會發生改變，同時免疫功能也會發生異常，最終T淋巴細胞調節功能發生失衡，導致機體發病[7]。Barclay等[7]研究表明，SIP的患者機體免疫平衡受損嚴重且淋巴細胞急劇凋亡，不僅導致機體免疫抑制，也使淋巴細胞增殖顯著減少。本研究發現，進展組患者外周血CD3+%、CD4+%水平低于非進展組，也進一步證實SIP患者機體的細胞免疫功能受到抑制。

CD4+%/CD8+%是評估免疫狀態的指標之一，比值越低表明免疫抑制越嚴重。本研究發現進展組CD4+%/CD8+%低于非進展組，表明SIP患者免疫功能受到抑制，這與聶靜等[8]研究結果一致。本研究非進展組與進展組CD8+%比較差異無統計學意義，這與陳慰峰等[9]研究結果不同。其研究表明腦梗死導致機體CD8+%水平降低，CD8+%在機體中起到負向調控作用，能夠抑制抗體與其他細胞發揮作用。這可能與實驗對照組的研究對象選取有關。因為本研究的非進展組也是腦梗死患者而不是正常人群，也可能與本研究對象數量不足有關。

表4 Fisher判別模型對SIP的診斷價值

此外，本研究進展組外周血IgA水平較非進展組降低，提示SIP形成過程可能存在體液免疫功能下降。這與錢小燕等[10]報道一致。但兩組外周血IgG與IgM水平比較差異無統計學意義，這與劉衛紅等[11]認為的進展組外周血IgG水平低于非進展組的結論存在差異。這可能是因為本研究對照也屬于腦梗死患者而不是正常人群，導致統計學上的差異。在評估疾病、干預病程時，對照組選取診斷為非進展性的急性腦梗死患者要比健康人群更具有臨床參考價值。

單一的免疫分子指標對SIP的鑒別診斷較局限，也有許多有關多指標聯合的研究報道。多指標聯合診斷效能雖有所提高，但實用性不強。本研究以臨床實用性為出發點，通過建立Fisher判別模型，擬合免疫分子參數指標，對SIP患者進行患病風險評估。將免疫分子水平代入Fisher判別模型進行比較，如果F進展組>F非進展組，則患者歸屬于SIP患者，反之則屬于非進展組，即非SIP患者。將疾病診斷指標轉變為量化及客觀化的公式，具有可操作性以及臨床實用性，而且具備較高的準確率以及特異性。隨著研究數據的不斷增加完善，判別公式可進一步修正，以便切合臨床實際應用。

綜上可見，基于外周血免疫分子參數建立的Fisher判別模型對評估SIP具有較高的診斷特異性及臨床實用性。通過監測急性腦梗死患者免疫參數指標并代入Fisher判別模型進行評估，可為SIP的病程干預提供客觀的診療判斷依據。