復(fù)方樟腦膏處方改進與質(zhì)量標準研究

任潔 劉光斌 趙麗萍 張媛

摘要：目的：通過考察影響復(fù)方樟腦膏穩(wěn)定性因素，改進了復(fù)方樟腦軟膏處方、配制工藝，同時建立其質(zhì)量標準。方法：采用高溫試驗、高濕試驗、耐寒試驗、離心試驗觀察制劑的穩(wěn)定性，同時選用薄層色譜法對乳膏中的樟腦、薄荷腦進行定性鑒別，HPLC法對乳膏中曲安縮松進行了定量測定。結(jié)果：經(jīng)穩(wěn)定性實驗觀察制成的復(fù)方樟腦膏制劑無油水分離、分層。乳膏中的樟腦、薄荷腦TLC斑點清晰，Rf值適中，陰性無干擾。曲安奈德在0.23～1.15μg之間呈良好的線性關(guān)系（r=0.9999），平均回收率為100.43%，RSD=0.16%（n=9）。結(jié)論：本處方改進后，質(zhì)量穩(wěn)定，療效確切，取得了顯著效果。用薄層色譜法、HPLC對該乳膏進行質(zhì)量控制，方法準確、可行、專屬性強。

關(guān)鍵詞：復(fù)方樟腦膏;處方改進;穩(wěn)定性;定性鑒別;含量測定

中圖分類號：R286.0

文獻標志碼：A

復(fù)方樟腦軟膏收載于《中國人民解放軍藥品制劑規(guī)范》，具有消毒收斂，促進局部血液循環(huán)，用于凍瘡，手足皸裂等。本軟膏為皮膚科常用的一個老處方，但臨床療效局限，油膩不易涂布。為此，我們在老處方基礎(chǔ)上進行改進，添加了醋酸曲安奈德、達克羅寧和薄荷腦制成外觀潔白、均勻、細膩、質(zhì)量穩(wěn)定的O/W型乳膏劑。具有止癢、止痛、防潰爛和改善局部血液循環(huán)的作用。用于凍瘡、神經(jīng)性皮炎、蟲咬性皮炎、瘙癢性皮膚病、痔瘡，還可預(yù)防和治療蚊蟲叮咬、帶狀皰疹引起的疼痛等。

1儀器與試藥

1.1儀器

LC-2010AHT高效液相色譜儀（日本島津）;YP30002電子分析天平（上海上天）;硅膠G薄層板（青島海洋）;SLD-1薄層顯色噴霧泵（天津思利達）。

1.2試藥

醋酸曲安奈德（批號：100055-200302）;復(fù)方樟腦膏（酒鋼醫(yī)院制，批號：20191106、20191218、20200113）;甲醇為色譜純;水為超純水;乙醚、磷酸為分析純。

2處方與制備

2.1處方

鹽酸達克羅寧10g;薄荷腦6g;樟腦10g;醋酸曲安奈德0.5g;維生素E;硅油;液體石蠟;蜂蠟;十六醇;硬脂酸;單硬脂酸甘油酯;甘油;十二烷基硫酸鈉;尼泊金乙酯;水適量，制成1000g。

2.2制備工藝

稱取處方量的油相、水相，分別加熱，使得油相、水相溫度保持在約70℃，在同一方向攪拌下將油相緩緩加入水相中，再加入曲安奈德、達克羅寧、薄荷腦、樟腦，攪拌至凝，既得。

2.3穩(wěn)定性試驗

2.3.1高溫試驗

取本品于60℃下放置Sd后觀察，有油水分層現(xiàn)象;另取本品于40℃下放置10d后觀察，無油水分離、分層現(xiàn)象。

2.3.2高濕試驗

取本品10g置稱量瓶開口于25℃恒濕密閉容器中，相對濕度為90%±5%放置5、10d后觀察，均無油水分離現(xiàn)象，稱重吸濕增重<5%。

2.3.3耐寒試驗

取本品-15℃放置24h后觀察，無油水分離、分層現(xiàn)象。

2.3.4離心法試驗

取本品10g于離心管內(nèi)經(jīng)轉(zhuǎn)速2500r/min，離心半小時后觀察，無油水分層現(xiàn)象。

3質(zhì)量標準

3.1定性鑒別

對照品溶液的制備取薄荷腦對照品10mg，加乙酸乙酯5mL制成薄荷腦對照品;另取樟腦原料藥10mg，加無水乙醇2mL制成樟腦對照品。

供試品溶液的制備取樣品5g于80℃的無水乙醇30mL中，攪拌使其溶解并放至室溫，冰浴45min，雙層濾紙過濾，取續(xù)濾液為供試品。

陰性對照品溶液的制備同供試品制備方法，制成不含樟腦的陰性對照品和不含薄荷腦的陰性對照品。

3.1.1樟腦的鑒別

取樟腦對照品15μl、供試品10μl、不含樟腦的陰性對照品10μl，分別于硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯：甲苯（1：9，V：V）預(yù)飽和20min后展開，噴10%磷鉬酸乙醇溶液，在105℃干燥至出現(xiàn)清晰斑點。結(jié)果供試品與樟腦標準品在相同位置顯同樣淡黃色斑點，陰性對照上無此斑點。薄層圖如圖1所示。

3.1.2薄荷腦的鑒別

取薄荷腦對照品、供試品、不含薄荷腦的陰性對照品各10μL，分別于硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯：正己烷（3：17，V：V）預(yù)飽和20min后展開，噴10%磷鉬酸乙醇溶液，在105℃干燥至出現(xiàn)清晰斑點。結(jié)果供試品與薄荷腦標準品在相同位置顯同樣藍色斑點，陰性對照上無此斑點。薄層圖如圖2所示。

3.2含量測定

色譜條件色譜柱：Inertsil ODS-SP色譜柱（150mm×4.6mm，5μm）;流動相：甲醇：0.2%磷酸水溶液：乙醚（60：38：2）;流速：1.0mL·min-1;柱溫：35℃;檢測波長：239nm。

對照品溶液的制備：精取曲安奈德對照品至50mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，制成0.115mg·mL^-1備用。

供試品溶液的制備：精取5g供試品至50mL容量瓶中，加流動相甲醇：0.2%磷酸水溶液：乙醚（60：38：2）稀釋到刻度，50℃水浴10min后取出冰浴2h，過濾取續(xù)濾液備用。

陰性對照品溶液的制備：同供試品溶液制備法制備不含曲安奈德的陰性對照。

3.2.1系統(tǒng)適應(yīng)性試驗

分別精取對照品、供試品以及陰性對照各10μL入液相色譜儀，以上述的色譜條件進行測定。結(jié)果可見供試品在相應(yīng)位置有與對照品相同的吸收峰，而陰性對照品在相對應(yīng)的保留時間沒有吸收峰（見圖3）。

3.2.2線性關(guān)系考察

精稱醋酸曲安奈德對照品適量，加甲醇：0.2%磷酸水溶液：乙醚（60：38：2）制成0.115mg·mL^-1的溶液，分別吸取0.230、0.460、0.690、0825、1.15μg入液相色譜儀，以上述色譜條件進行測定。以濃度為橫坐標（x）、峰面積為縱坐標（y）繪制標準曲線，得曲安奈德回歸方程為y=1970154.348x-4314.3，相關(guān)系數(shù)R=0.999987，表明曲安奈德在0.230～1.15μg之間呈良好的線性關(guān)系。

3.2.3精密度試驗

精取對照品10μL重復(fù)進樣5次，測曲安奈德峰面積，求得RSD=0.19%，表明儀器精密度良好。

3.2.4穩(wěn)定性試驗

精取同一批號（20191106）供試品10μL分別于0、1、2、4、6、8h進樣，以上述色譜條件測定醋酸曲安奈德，求得RSD =0.12%，顯示復(fù)方樟腦膏中的曲安奈德在8h內(nèi)穩(wěn)定。

3.2.5重復(fù)性試驗

取同一批號（20191106）樣品6份，精密稱定，按3.2項下制備供試品方法制備供試液，進行含量測定，得到醋酸曲安奈德平均含量為0.1042mg·g^-1，RSD=0.09%，結(jié)果表明該試驗重復(fù)性良好。

3.2.6加樣回收率試驗

精密稱取已知含量為0.1036mg·g^-1的同一批號（20191106）樣品9份，精密加入一定量醋酸曲安奈德對照品，以上述色譜條件進行測定，計算回收率。結(jié)果見表1所列。

3.2.7樣品測定

分別取3個批號的樣品，以供試品制備方法制備樣品溶液，進行測定。結(jié)果見表2所列。

4討論

（1）復(fù)方樟腦軟膏改進后制成O/W型乳膏劑，經(jīng)穩(wěn)定性試驗可以看出，制得的乳膏性質(zhì)穩(wěn)定，符合《藥典》（2015版）項下乳膏劑穩(wěn)定性考察，可供臨床使用。（2）薄荷腦和樟腦均為揮發(fā)性物質(zhì)，在展開劑中常不能呈現(xiàn)完整點型，對含量測定具有較大影響，定性鑒別影響較小，展開劑乙酸乙酯：正己烷（3：17，V：V）和乙酸乙酯：甲苯（1：9，V：V），均對薄荷腦以及樟腦有良好的展開作用，其中乙酸乙酯：正己烷（3：17，V：V）適宜展開薄荷腦，而樟腦在乙酸乙酯：甲苯（1：9，V：V）展開劑中點型更為完整。（3）由于該處方為乳膏劑，基質(zhì)成分復(fù)雜，想很好的分離出吸收峰來很難，筆者換了很多流動相如甲醇：水（65：35），甲醇：0.2%磷酸水溶液（60：40），因曲安奈德、達克羅寧、樟腦的最大吸收波長分別為240nm、279nm、289nm，也換了很多波長，都沒有得到很好的分離峰，最后選擇甲醇：0.2%磷酸水溶液：乙醚（60：38：2）為流動相，選定239nm為測定波長，從而分離出了曲安奈德較好的吸收峰。