電針曲池和足三里穴對缺血性腦卒中大鼠運動功能的影響

高兆鶴，李世斌，顏 華，吳俊波，陳 斌

（福建中醫(yī)藥大學附屬人民醫(yī)院，福建 福州 350004）

針灸療法在缺血性腦卒中康復過程中的應用已經得到國內外醫(yī)學界的廣泛認可［1-5］。 團隊前期對《針灸甲乙經》等歷代36 部醫(yī)籍進行梳理以及多位學者研究均證實，曲池、足三里是治療缺血性腦卒中導致半身不遂或癱瘓中使用頻次最高的一對陽明經組穴［6-9］。 肢體運動功能障礙是缺血性腦卒中最顯著的后遺癥之一，因此，本研究將通過電針曲池和足三里對缺血性腦卒中大鼠運動功能的影響，來評價其對改善運動功能的療效，為進一步探討其分子作用機制奠定必要的基礎。

1 實驗材料與方法

1.1 實驗動物與分組 SPF 級雄性SD 大鼠24 只，體質量（270±20）g，由上海斯萊克實驗動物責任有限公司提供，生產許可證號：SCXK（滬）2017-0005，恒溫恒濕，飼養(yǎng)于福建中醫(yī)藥大學動物實驗中心。24只大鼠根據隨機數字表法分為腦缺血組及治療組，每組12 只。

1.2 主要器械 0.5 寸毫針 （0.3 mm×13 mm，中國蘇州醫(yī)療用品廠有限公司）；體視顯微鏡（型號：SMZ445，日本 Nikon 公司）；電針治療儀（型號：SDZV，中國蘇州醫(yī)療用品廠有限公司）；Rota-Rod 轉棒儀（型號：ENV-574R，美國 Med Associates 公司）；步態(tài)分析儀（型號：Catwalk XT，北京Noldus 公司）。

1.3 造模方法 缺血性腦卒中大鼠模型參考Zea Longa 法［10］制備：2%異氟烷麻醉大鼠，固定、消毒后，在顯微鏡下分離左側頸總動脈和頸內/外動脈；依次結扎頸總動脈近心端以及頸內/外動脈遠心端，并在頸外動脈上離分叉處約2.5 mm 處剪一“V”型小口，將已消毒好的線栓插入頸內動脈，直至有少許阻力感時再插入17～18 mm；傷口常規(guī)縫合與消毒，待缺血60 min 后拔出線栓再灌注。 注意動物保溫，維持肛溫 37 ℃左右。 當 Zea Longa 評分為1～3 分即為造模成功的缺血性腦卒中大鼠納入實驗，見表1。 造模前3 d 對大鼠進行訓練：在 Rota-Rod 轉棒儀（圓棒的旋轉速度設置為恒定速度8 rpm）上每天適應訓練1 次，使大鼠停留在圓棒的時間至少100 s；在步態(tài)分析儀上進行步態(tài)適應性訓練，每天2 次，每次完成3 個成功的試驗。

1.4 電針干預 于手術后24 h 開始，治療組取右側肢體曲池穴（橈骨近端的關節(jié)外側前方的凹陷中）和足三里穴（膝關節(jié)后外側，在腓骨小頭下約5 mm處）［11］，用 0.5 寸毫針，斜刺 0.3 cm；電針治療儀接通電源后，分別在兩個針柄上夾上電極夾，并設置波形為疏密波，強度 0.2 mA，頻率 4/20 Hz，30 min /次，1 次/d，連續(xù)治療7 d。 腦缺血組不做任何治療。

1.5 檢測指標

1.5.1 神經功能缺損癥狀評分 采用Zea Longa 評分法［5］評估大鼠神經功能缺損程度，評分標準見表1。

表1 Zea Longa 評分法

1.5.2 Catwalk 步態(tài)分析 運用Catwalk 步態(tài)分析儀自帶的高速攝像機捕捉大鼠行走時的熒光腳印信息，從最大接觸面及步幅兩方面評價大鼠的肢體功能情況，利用步態(tài)分析儀的Auto-analysis 技術，進行數據的自動讀取。

1.5.3 運動協調能力分析 采用Rota-Rod 轉棒實驗判定。 將轉棒儀在5 min 內的旋轉速度從4 rpm線性加速到40 rpm，記錄大鼠在轉棒儀上停留的時間。每只老鼠測試3 次，每2 次間隔15 min，取3 次的平均值。

1.6 統計學方法 采用SPSS 20.0 軟件進行數據分析，計量資料符合正態(tài)分布以表示，采用t 檢驗。

2 結 果

2.1 2 組Zea Longa 評分比較 見表2。

表2 2 組 Zea Longa 評分情況

表2 2 組 Zea Longa 評分情況

注：與腦缺血組比較，1） P＜0.05。

組別腦缺血組治 療 組Zea Lognga 評分0.50±0.26 1.33±0.221）n 12 12

2.2 2 組Catwalk 步態(tài)分析指標比較 見表3。

表3 2 組 Catwalk 步態(tài)分析指標比較

表3 2 組 Catwalk 步態(tài)分析指標比較

注：與腦缺血組比較，1） P＜0.05。

組別腦缺血組治 療 組最大接觸面積/cm2 0.12±0.01 0.17±0.071）n 12 12步幅/cm 1.32±0.22 1.88±0.121）

2.3 2 組大鼠在Rota-Rod 轉棒停留時間比較 見表4。

表4 2 組大鼠在Rot-Rod 轉棒停留時間比較

表4 2 組大鼠在Rot-Rod 轉棒停留時間比較

注：與腦缺血組比較，1） P＜0.05。

組別腦缺血組治 療 組轉棒停留時間/s 7.67±5.04 21.42±3.621）n 12 12

3 討 論

曲池、 足三里分別為手陽明大腸經和足陽明胃經之合穴，合穴是經氣聚集并且合并于臟腑的地方，針刺合穴有促使經氣通達進而鼓動臟腑原氣的作用，臟腑原氣充盛，疏通閉阻經脈之力亦強，繼之機體正氣得充，促進偏癱肢體的功能恢復。因此，針刺曲池、足三里可改善缺血性腦卒中后肢體運動功能障礙。

運動功能評價是判定缺血性腦卒中嚴重程度、神經功能缺損程度的重要指標，對于評價缺血性腦卒中的臨床療效有著重要的意義。 故本研究選用神經功能缺損癥狀評分、Catwalk 步態(tài)分析和Rota-Rod 轉棒實驗等多種神經相關運動功能檢測指標來評價電針曲池、足三里對于缺血性腦卒中后肢體運動功能障礙的影響。 本研究結果表明：電針干預可明顯減輕缺血性腦卒中大鼠的神經功能缺損癥狀，改善缺血性腦卒中大鼠偏癱側前肢的步態(tài)運動功能，并提高其運動協調能力，對缺血性腦卒中大鼠運動功能康復具有一定的促進作用，與臨床Cochrane 系統評價結果相一致［1］。 但具體的分子機制仍需在今后的研究中深入探討。