新冠肺炎疫情下發熱患者檢測甲乙型流感病毒抗原的意義

楊皓云，趙清，謝慈嘉

(廣州中醫藥大學第三附屬醫院檢驗科，廣東 廣州)

0 引言

流行性感冒(流感)是由流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病,嚴重危害人民群眾健康。流感病毒屬于正粘病毒科,是單股,負鏈,分節段的RNA 病毒，根據病毒核蛋白和基質蛋白,分為甲,乙,丙,丁(或 A,B,C,D)四型，目前感染人的主要是甲型流感病毒中的 H1N1,H3N2 亞型及乙型流感病毒中的Victoria和 Yamagata系。臨床癥狀主要為發熱,頭痛,肌痛和全身不適，體溫可達 39℃～40℃,可有畏寒,寒戰,多伴全身肌肉關節酸痛,乏力,食欲減退等全身癥狀,常有咽喉痛,干咳,可有鼻塞, 流涕,胸骨后不適等[1]。

在體溫調節中樞的調控下，機體的產熱和散熱過程經常保持動態平衡，當機體在致熱源作用下或體溫中樞的功能障礙時，使產熱過程增加，而散熱不能相應地隨之增加或散熱減少，體溫升高超過正常范圍，稱為發熱。可引起典型發熱的疾病超過200種，總結為四大類：感染性疾病、腫瘤性疾病、非感染性炎癥性疾病、其他疾病。其發熱病因會受患者所屬的地區、時期、年齡以及醫療資源的不同而造成構成比例差異[2]。此外還有不明原因的發熱，診斷難度高，病情復雜[3]。

預防流感，查找發熱原因，就必須盡快鑒別診斷，然后進一步處理，從而防止流感或其它疾病的大范圍暴發。本文通過收集廣州中醫藥大學第三附屬醫院2019年1月～2020年1月發熱就診并進行甲/乙型流感病毒抗原檢測的病例，分析本地流感感染狀況，探討其流行特性，為加強流感預防控制提供幫助。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集廣州中醫藥大學第三附屬醫院2019年1月至2020年1月發熱就診并進行甲/乙型流感病毒抗原檢測的患者共1251例。其中男690例，女561例，年齡1-71歲。

1.2 檢測原理

診斷試劑為廣州萬孚生物技術有限公司生產的甲型/乙型流感病毒抗原檢測試劑（膠體金法）試劑盒，檢測標本為患者咽喉分泌物拭子。該試劑盒利用免疫層析技術，采用雙抗體夾心法檢測甲型和乙型流感病毒抗原。檢測時，將處理后的待測樣品滴加于測試卡的加樣孔，當待測樣本中含有甲型和（或）乙型流感病毒抗原且抗原濃度高于最低檢出限時，甲型和（或）乙型流感病毒先和標記抗體形成反應復合物，在層析作用下，反應復合物沿著硝酸纖維膜向前移動，分別被硝酸纖維膜上檢測區（2）和（或）（1）區預先包被的甲型流感病毒核蛋白單克隆抗體和（或）乙型流感病毒核蛋白單克隆抗體捕獲，在檢測區（2）和（或）（1）區上最終形成一條紅色/粉色反應線，此時結果為陽性；相反，當樣本不含甲型和乙型流感病毒抗原或者抗原濃度低于最低檢出限時，則檢測區無紅色/粉色反應線出現，此時結果為陰性。無論樣本是否含有甲型或乙型流感病毒抗原，質控區（C）都會形成一條紅色/粉色反應線。

1.3 結果判斷

甲流陽性：兩條紅色/粉色反應線出現，一條在2區，一條在C區。乙流陽性：兩條紅色/粉色反應線出現，一條在1區，一條在C區。甲乙流陽性：三條紅色/粉色反應線出現，一條在2區，一條在1區，一條在C區。

無效測試：質控區（C）無紅色/粉色反應線出現，檢測無效，需用新測試卡重測。

1.4 統計學處理

采用SPSS 22 、WPS Excel軟件進行數據統計處理，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.005為差異有顯著性。

2 結果

2.1 在1251份鼻咽拭子標本中，共檢測甲流抗原陽性375例，陽性率29.98%，其中男性標本690份，陽性標本209例，陽性率30.29%；女性標本561份，陽性標本166例，陽性率29.59%,兩組差異無顯著性（P=0.788）。將收集的標本按0～10歲、11～20歲、21～30歲、31～40、41～50歲 和＞51歲分成6個年齡組，其份數及陽性率見表1，組間存顯著性差異（P=0.000)，1～20歲陽性率最高。詳見表1。

表1 各年齡階段甲流陽性率比較

2.2 檢測乙流抗原陽性52例，陽性率4.16%，其中男性標本690份，陽性標本34例，陽性率4.93%%；女性標本561份，陽性標本18例，陽性率3.21%,兩組差異無顯著性（P=0.13）。將 收 集 的 標 本 按0～10歲、11～20歲、21～30歲、31～40、41～50歲和＞51歲分成6個年齡組，其份數及陽性率見表2，組間存顯著性差異（P=0.001)，1～10歲陽性率最高。詳見表2。

2.3 甲流，乙流混合陽性2例,陽性率0.16%，陽性標本量過少，無統計學意義。

3 討論

在近100年間，世界發生過多次流感病毒全球性感染，甚至大暴發。其中最嚴重的大流行為1918年于西班牙暴發起的H1NI型流感，共造成約5000萬人死亡。據WHO統計，全球每年大約有300～500萬流感病毒感染病例以及25～50萬的死亡病例[4]。

越來越多研究表明，熱帶地區尤其在亞洲，流感的季節性呈高度多樣化，既有季節性周期流行，也有全年循環[1]。2019年第49周，我國內地南北方省份流感活動水平繼續呈升高趨勢，暴發疫情數明顯增多，我國部分省份已經進入今年的冬季流行季，西南地區省份水平較高，處于中等流行水平[5]。廣州地區的春季以多雨、霧霾為主，濕暖回潮，室內空氣流動差，況且城市人口密度大，在某些密閉的公共場所容易被人流感病毒經飛沫途徑感染[6]。

既往有調查發現，甲型流感的高峰會出現在1月份，乙型流感的高峰即出現在3月份，乙型流感的峰值會滯后于甲型流感大約2個月，流感流行的季節以甲型流感病毒為主，病例數明顯多于乙型流感，流感流行季節后期即乙型流感病例逐漸增多，反而超過甲型流感病例數[7]，但在本次統計發現中并未出現乙型流感病例多于甲的情況。

醫護人員憑借發病初始癥狀來對疾病做出初步診斷、分診，這對于在患者疾病本身的治療和控制疾病的傳播來說是尤為重要的。但發熱類疾病早期臨床癥狀不明顯或部分類同，所以快速診斷出流感引起的發熱即起到重要作用。目前，流感病毒實驗室檢測方法主要有流感病毒培養、流感病毒抗原檢測、流感病毒核酸檢測、病毒血清學檢測等，RT-PCR 是檢測流感病毒最有效的核酸檢測技術,目前已取代病毒分離培養成為流感診斷的金標準[4]。但由于RT-PCR技術實驗設備成本高、實驗室條件要求高、技術人員培訓周期長，檢測時間長，故不適合于大規模和社區醫院流感病例的快速篩查工作。

膠體金免疫層析法發展到現在已經是一種常見的免疫學檢測技術，其核心是對流行性感冒病毒核心蛋白進行檢測，且有操作簡單、穩定性好、檢測時間短、對操作人員的要求低等特點，且能在現場或床旁完成檢測[8]。以膠體金法進行流感抗原快速檢測，可在15分鐘內獲得檢測結果，具有中度的敏感性（50%～70%）及高度特異性（90%），操作簡便，是常用的床旁快速檢測方法，可同時區分甲流和乙流感染[1]。

表2 各年齡階段乙流陽性率比較

既往對于發熱類疾病，通常依靠醫生的臨床經驗或某些特異性不高的檢查結果進行診斷，容易出現誤診、漏診和濫用抗生素的情況。而應用膠體金免疫層析法快速檢測甲/乙型流感抗原后，臨床醫生可依據檢測結果并結合臨床癥狀判斷患者感染流感病毒與否，從而及時進行科學合理對癥治療。

門診作為醫院的第一道屏障，對發熱患者的診斷及后續治療顯得格外重要，進行甲/乙型流感病毒抗原檢測，盡早診斷使感染者得到及時治療，對不明原因發熱的患者盡早進行進一步的檢查鑒別，比如病毒核酸檢測，以采取有效措施控制疾病的傳播蔓延。因此膠體金免疫層析法快速檢測甲/乙型流感病毒抗原在對流感的診斷、減少抗生素濫用、不明原因發熱的鑒別排查和流行病控制等方面具有十分重要的意義。