2018—2019年貴陽市部分規模化豬場主要病毒性腹瀉的流行病學調查

袁翠霞，景小金，陳 紅，楊 峰，張 海，楊 源，劉 艷，景書灝，徐春志

（1.貴陽市動物疫病預防控制中心，貴州 貴陽 550081；2.貴州省動物疫病預防控制中心，貴陽 550081）

近年來，隨著貴陽市生豬產業的不斷發展，生豬頻繁調運，疫病變得越來越復雜和多樣化，其中腹瀉類疫病成為困擾貴陽市生豬養殖業發展的重要因素之一。在引起豬腹瀉的各種病因中，病毒性腹瀉的危害是最為嚴重的，主要是由豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）、豬輪狀病毒（Porcine rotarvirus,PoRV）、豬傳染性胃腸炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV）三大病原所引起。豬群中存在單獨感染或混合感染以上腸病毒，感染后的病豬出現水樣腹瀉、體溫降低、脫水、嘔吐和水鹽代謝紊亂死亡，感染豬沒有特效治療藥物，且臨床治療價值不大，所以對養殖業的危害嚴重，影響人民的正常生活，引起大家的高度關注[1-3]。

為了解2018—2019年貴陽市規模化豬場主要病毒性腹瀉疫病的發生和流行趨勢，本研究采集7個區（市、縣）38個養豬場292份疑似腹瀉糞便樣品進行病原學的檢測，為貴陽市規模化豬場主要病毒性腹瀉疫病的預防和控制提供參考。

1 材料

1.1 病料

292份豬腹瀉糞便樣本，采用5 mL的EP管密封保存備用，來自貴陽市7個區（市、縣）38個養豬場。

1.2 試劑

豬流行性腹瀉病毒實時熒光RT-PCR試劑盒、豬輪狀病毒實時熒光RT-PCR試劑盒、豬傳染性胃腸炎病毒實時熒光RT-PCR試劑盒，均購自北京世紀元亨動物防疫技術有限公司。

2 方法

將采集的292份豬腹瀉糞便樣本，分別加入1 mL生理鹽水，反復凍融3次后高速離心，取上清液作為備檢樣本。按照上述3種病毒核酸提取試劑盒操作說明，分別進行PEDV、PoRV、TGEV的病毒核酸提取，并按實時熒光RT-PCR擴增試劑盒操作說明，分別進行體系構建和目的基因擴增，擴增結束后觀察擴增曲線和CT值對結果進行判定。

3 結果

對采集的292份豬腹瀉糞便樣本分別進行PEDV、PoRV、TGEV的病毒核酸提取，實時熒光RT-PCR擴增，結果：PEDV核酸陽性病料129份，陽性率44.2%（129/292），PoRV核酸陽性病料25份，陽性率8.6%（25/292），TGEV核酸陽性病料10份，陽性率3.4%（10/292）。其中PEDV/PoRV混合感染核酸陽性病料9份，陽性率3.1%（9/292）；PEDV/TGEV混合感染核酸陽性病料5份，陽性率1.7%（5/292）；PoRV/TGEV混合感染陽性率為0，3種病原混合感染陽性率為0。總體趨勢為感染陽性率：TGEV＜PoRV＜PEDV。結果見表1。

表1 不同地區豬群中病毒性腹瀉病毒檢測結果

4 分析與討論

本研究對貴陽市7個地區38個規模化養豬場292份疑似腹瀉糞便樣品，分別進行流行性腹瀉病毒、輪狀病毒、傳染性胃腸炎病毒的病原學流行病學調查，結果：PEDV核酸檢出率為44.2%（129/292），PoRV核酸檢出率8.6%（25/292），TGEV核酸檢出率3.4%（10/292）。其中PEDV/PoRV混合感染核酸檢出率3.1%（9/292）；PEDV/TGEV混合感染核酸檢出率1.7%（5/292）；未檢出PoRV/TGEV混合感染和3種病原混合感染。說明引起我市規模化豬場腹瀉病毒總體趨勢：TGEV＜PoRV＜PEDV，且存在 PEDV/PoRV和PEDV/TGEV混合感染情況。

朱子鍵等[4]對2015—2016年間東北地區的88個疑似豬場的264份病料樣品進行病原學檢測，結果 PEDV、PoRV、TGEV的陽性率分別是 74.62%、25.76%、6.06%，且存在兩兩混合感染和三重感染，以PEDV/PoRV雙重感染為主。劉霞等[5]對2016—2017年間浙江省32個健康規模養殖場的611份豬糞便樣品、16個臨床發病豬場50份豬小腸樣品進行PEDV、TGEV、PoRV檢測，結果健康規模養殖場豬糞便樣品中PEDV陽性率為4.09%，PoRV陽性率為6.55%。臨床發病豬場豬小腸樣品的PEDV、PoRV檢出率分別為74.00%、6.00%。薛瑞雪等[6]對2013—2014年山東省226份豬腹瀉樣本進行PEDV、TGEV、PoRV檢測，結果陽性率分別是34.96%、2.21%、28.76%。竇海燕等[7]對2015年黑龍江省67份豬糞便樣品進行PEDV、TGEV檢測，結果PEDV陽性率為73.2%，TGEV陽性率為28.4%。段群棚等[8]對2016—2019年廣西366個規模豬場送檢的914份仔豬腹瀉病料樣品進行PEDV、PoRV、TGEV檢測，調查PEDV、PoRV樣品平均陽性率分別為59.74%、4.92%，未檢測出TGEV。陽酉萍等[9]對四川省9個地區送檢的75份仔豬腹瀉病料（小腸及糞便）進行PEDV檢測，結果陽性率為88.00%。胡興義等[10]對2013—2015年貴州省5個地州（市）27個規模養豬場203份發病仔豬腹瀉糞便樣品進行PEDV、TGEV和PoRV檢測，結果PEDV陽性率為63.54%，TGEV陽性率為 0.98%，PoRV陽性率為7.88%，PEDV/TGEV混合感染率為 0.99%，PEDV/PoRV混合感染率為10.84%。

由于引起豬腹瀉的因素很多，其中既有傳染性因素，如病毒、細菌、寄生蟲等，又有非傳染性因素，如飼養管理、營養因素、應激等。在引起豬腹瀉的各種病因中，病毒性腹瀉的危害是最為嚴重的，本研究表明，PEDV、PoRV單純或混合感染依然是我市豬腹瀉的最主要的兩大病原，TGEV雖然在本次研究中感染率相對較低，但豬群中依然存在。為此，豬場在防控過程中，既要加強PEDV、PoRV兩大病原的防控，同時也要加強TGEV的防控，只有做好綜合防控，才能確保豬群健康，養豬業持續發展。