定安鵝大腸桿菌病和漿膜炎免疫程序優(yōu)化試驗

陳益勇 顧麗紅 徐鐵山 林 鵬

（1.海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，海南海口 571100；2.海南傳味文昌雞產(chǎn)業(yè)股份有限公司，海南文昌 571133；3.海南省熱帶動物繁育與疫病研究重點實驗室，海南海口 571100；4.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所，海南海口 571101）

1 前言

鵝大腸桿菌病在鵝病中占有較大比例，對養(yǎng)鵝業(yè)造成較大危害[1]。鵝傳染性傳染性漿膜炎又稱鵝鴨里默氏桿菌病，是由鴨疫里默氏桿菌引起的，是一種接觸性、急性或慢性、敗血性傳染病，是近兩年在鵝群流行比較嚴(yán)重的細(xì)菌性疫病[2]。飼養(yǎng)環(huán)境惡劣、飼料營養(yǎng)搭配不合理和鵝苗質(zhì)量較差是誘發(fā)大腸桿菌病和鵝傳染性傳染性漿膜炎的主要原因[1，2]。多項案例通過臨床癥狀、病理剖檢和實驗室檢查結(jié)果，發(fā)現(xiàn)鵝大腸桿菌病與傳染性傳染性漿膜炎往往混合感染[3]。患病鵝臨床癥狀為精神差、離群呆立，食欲下降，伏臥，不愿走動，呈犬坐姿勢，共濟(jì)失調(diào)，頭頸左右搖擺，前翻后仰，倒地后仰臥不易翻轉(zhuǎn)，跗關(guān)節(jié)腫脹、跛行，眼、鼻流出漿液或黏液性分泌物，糞便稀薄、呈黃綠色或黃白色，整個肛門周圍的羽色被糞便沾污[4]。對鵝群進(jìn)行藥物預(yù)防和免疫接種，現(xiàn)在普遍認(rèn)同的做法是鵝傳染性漿膜炎與小鵝大腸桿菌進(jìn)行二聯(lián)接種。針對鵝傳染性漿膜炎和大腸桿菌病混合感染，我們擬比較定安鵝傳染性漿膜炎和大腸桿菌病疫苗分開接種和聯(lián)合使用的效果，并將之優(yōu)化。通過免疫效果評價和凝集試驗水平檢測，進(jìn)一步驗證免疫方案的可行性。

2 試驗材料和地點

1日齡浙東白鵝，地點：定安縣新竹鎮(zhèn)白堆村委會，試驗周期12周，85天出欄。

3 試驗方法

（1）試驗共分7組，每組30只，詳見表1。

（2）疫苗接種

鴨傳染性漿膜炎三價滅活疫苗（1型YBRA01株+2型YBRA02株+4型YBRA04株）購買于青島易邦生物工程有限公司；雞大腸桿菌病蜂膠滅活疫苗（EC24株+EC30株+EC45株+EC50株）購買于山東華宏生物工程有限公司。嚴(yán)格消毒注射部位和注射器，且逐頭更換針頭。嚴(yán)格按照疫苗說明書要求進(jìn)行稀釋和接種。

（3）免疫副反應(yīng)觀察

免疫后24h，逐只觀察和記錄各組試驗鵝的精神狀況、采食、發(fā)病、死亡等情況。

表1 免疫試驗方案

（4）樣品檢測及結(jié)果判定

采用凝集反應(yīng)法檢測血清抗體水平。

微量凝集試驗（Microagglutination test，MAT）方法檢測鵝血清中鴨疫里默氏桿菌（Riemerella anatipestifer，RA）1型YBRA01株+2型YBRA02株+4型YBRA04株和大腸桿菌EC24株+EC30株+EC45株+EC50株抗體情況。V型微孔板中，反應(yīng)體積為100uL，5 uL血清用95 uL PS稀釋后進(jìn)行倍比稀釋，加入50 uL抗原，37℃反應(yīng)2 h過夜。陰性孔中央有白色沉淀點，當(dāng)板垂直豎立時，沉淀點向下滑成線狀；陽性孔中無沉淀點，板垂直豎立時無下滑線現(xiàn)象。

4 結(jié)果與分析

接種疫苗29日齡采集血清，進(jìn)行抗體檢測，結(jié)果見下表。

表2 抗體檢測結(jié)果

表2的結(jié)果顯示疫苗被成功接種，產(chǎn)生了相應(yīng)的抗體。

表3 85日齡料重比、成活率和死淘率

結(jié)果顯示，第7組成活率最高，死淘率最低，且出欄肉鵝體重最高，為最佳免疫組合。

5 討論

鵝的傳染性漿膜炎病是由鴨疫里默氏桿菌引起的一種高度接觸性傳染病，主要感染1～8周齡的雛鵝，2～3周齡的鵝發(fā)病率和死亡率較高，并以纖維素性心包炎、肝周炎、氣囊炎、腦膜炎和干酪性輸卵管炎為病理特征[5]。鵝大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌引起的急性或慢性疾病的總稱，可引起各種年齡鴨感染發(fā)病，而雛鴨感染發(fā)病后的病變特征常與鴨傳染性漿膜炎相似，并常與鵝傳染性漿膜炎混合感染，臨床上很難將兩者區(qū)分[6，7]，其臨床癥狀和剖檢變化與傳染性漿膜炎相似，僅靠肉眼很難區(qū)分，鑒別診斷需要實驗室檢查鵝鴨傳染性漿膜炎和大腸桿菌病是困擾養(yǎng)鵝業(yè)的重要細(xì)菌性傳染病，藥物防治和疫苗免疫是控制上述疾病的重要措施。由于鵝和鴨子的大腸桿菌和漿膜炎致病菌一樣，故養(yǎng)殖戶可用鴨子的這兩種疫苗接種免疫鵝苗[8]。

研究發(fā)現(xiàn)大腸桿菌和漿膜炎二聯(lián)疫苗兩者互不影響作用，且接種次數(shù)少，費(fèi)用低，效果好。本試驗中7日齡接種大腸桿菌病和傳染性漿膜炎疫苗，22日齡加強(qiáng)免疫1次可明顯提高成活率、死淘率，且取得較好的經(jīng)濟(jì)效益。