子宮內膜癌患者中血小板參數和T 淋巴瘤侵襲轉移誘導因子1的表達情況及臨床意義

于哲，張洛英，潘大歡，王靜

鄭州頤和醫院婦產科，鄭州 450018

子宮內膜癌（endometrial carcinoma，EC）是女性常見的三大惡性腫瘤之一，是發生于子宮內膜的一組上皮性惡性腫瘤[1]。部分極早期EC患者癥狀隱匿，一旦出現癥狀多表現為陰道膿性分泌物、不規則陰道出血、陣發性下腹疼痛及腹部包塊，晚期患者因腫瘤組織擴散和浸潤，可出現下肢水腫疼痛、多器官衰竭、繼發性貧血、惡病質、發熱等，最終導致患者死亡[2]。目前關于EC發生和發展的機制尚不清楚，但相關研究顯示，血小板增多癥是腫瘤的不良預后因素[3]。血小板計數（platelet count，PLT）、血小板分布寬度（platelet distribution width，PDW）、平均血小板體積（mean platelet volume，MPV）及 血小 板 壓積（platelet hematocrit，PCT）是公認的血小板參數，對評價機體內血小板性能、炎癥反應及腫瘤疾病具有重要意義，隨著血小板檢測儀器的不斷改進，其對于EC患者病情發展及預后的指導意義也引起了廣泛關注[4]。此外，T淋巴瘤侵襲轉移誘導因子1（T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1，TIAM1）是新發現的腫瘤轉移促進基因之一，具有活化Rho樣蛋白酶的功能，被國內外許多學者證實可在多種腫瘤細胞系中表達，與腫瘤細胞的浸潤和轉移有著密切關系[5]。本研究通過分析EC患者中血小板參數及TIAM1的表達情況，旨在為預測EC患者的病情發展及預后提供依據，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2015年12月至2018年12月鄭州頤和醫院收治的EC患者。納入標準：①經病理學檢查確診為EC[6]；②近1個月內未服用過影響血小板或凝血功能的藥物。排除標準：①合并其他臟器惡性腫瘤；②合并免疫系統、血液系統及代謝系統疾??；③合并精神疾病或癡呆等無法配合研究的疾病；④合并感染性疾病或慢性炎癥；⑤未進行化療或放療。依據納入和排除標準，本研究共納入100例EC患者，作為EC組。選取同期接受子宮內膜活檢且結果正常者106例，作為對照組。EC組患者的年齡為26～70歲，平均年齡為（57.98±3.61）歲；已絕經68例，未絕經32例；平均分娩次數為（1.97±0.13）次。對照組的年齡為25～72歲，平均年齡為（58.51±3.55）歲；已絕經69例，未絕經37例；平均分娩次數為（1.99±0.11）次。兩組研究對象的年齡、絕經情況、分娩次數比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，所有研究對象及家屬均對本研究知情并簽署知情同意書。

1.2 觀察指標及評價方法

抽取兩組研究對象的外周靜脈血5 ml，采用全自動五分類血液分析儀XS-500i檢測血小板參數，包括PLT、PDW、MPV及PCT。鉗取兩組研究對象的宮頸組織，經10%甲醛溶液固定后常規石蠟包埋，制成4 μm厚切片用于免疫組織化學染色。TIAM1鼠抗人單克隆抗體購自美國Santa Cruz公司，免疫組織化學檢測試劑盒購自北京中杉金橋生物技術有限公司，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。TIAM1陽性表達主要定位于細胞核和細胞質中，呈棕黃色或棕褐色顆粒。根據染色強度評分：無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。根據陽性細胞百分比評分：≤5%為0分，6%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，＞75%為4分。染色強度評分與陽性細胞百分比評分相乘，0分為（-），1～4分為（+），5～8分為（++），9～12分為（+++），其中“-”為陰性，“+”為弱陽性，“++”為中等陽性，“+++”為強陽性。比較兩組研究對象中TIAM1蛋白的表達情況及不同臨床分期的EC患者中TIAM1蛋白的表達情況。

1.3 統計學分析

采用SPSS 18.0軟件對數據進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象血小板參數的比較

EC組患者的PLT、PDW、MPV、PCT水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.01）。（表1）

表1 兩組研究對象血小板參數的比較（±s）

表1 兩組研究對象血小板參數的比較（±s）

組別E C組（n=1 0 0）對照組（n=1 0 6）t值P值2 7 9.2 3±3 6.1 1 2 1 5.4 5±3 2.3 7 1 3.3 6 4 0.0 0 1 1 7.9 6±1.4 5 1 0.7 1±1.3 2 3 7.5 6 0 0.0 0 1 1 2.3 6±1.1 3 8.1 1±1.0 5 2 7.9 8 1 0.0 0 1 0.3 5±0.1 7 0.2 2±0.0 9 6.9 1 4 0.0 0 1 P L T（×1 0 9/L）P D W（%）M P V（f l）P C T（%）

2.2 兩組研究對象中TIAM1表達情況的比較

EC組患者中TIAM1的陽性表達率為94.0%（94/100），明顯高于對照組的6.6%（7/106），差異有統計學意義（χ2=157.271，P＜0.01）。（表2）

2.3 不同臨床分期EC患者血小板參數的比較

100例EC患者中，Ⅰ～Ⅱ期58例，Ⅲ～Ⅳ期42例。Ⅰ～Ⅱ期EC患者的PLT、PDW、MPV、PCT水平均低于Ⅲ～Ⅳ期患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表3）

表3 不同臨床分期EC患者血小板參數的比較（±s）

表3 不同臨床分期EC患者血小板參數的比較（±s）

臨床分期Ⅰ～Ⅱ期（n=5 8）Ⅲ～Ⅳ期（n=4 2）t值P值2 3 3.1 1±3 2.2 5 2 8 2.3 1±3 5.6 5 7.2 0 3 0.0 0 1 1 6.8 7±1.3 3 1 8.9 1±1.4 5 7.2 8 8 0.0 0 1 1 1.5 3±1.2 1 1 3.8 7±1.3 9 8.9 6 4 0.0 0 1 0.3 1±0.1 3 0.3 9±0.1 8 2.5 8 2 0.0 1 1 P L T（×1 0 9/L）P D W（%）M P V（f l）P C T（%）

2.4 不同臨床分期EC患者中TIAM1表達情況的比較

Ⅰ～Ⅱ期EC患者中TIAM1的中等-強陽性表達率為68.97%（40/58），明顯低于Ⅲ～Ⅳ期患者的92.86%（39/42），差異有統計學意義（χ2=8.382，P＜0.01）。（表 4）

表4 不同臨床分期EC患者中TIAM1的表達情況

3 討論

EC是僅次于卵巢癌及宮頸癌的一類具有極高發病率和病死率的惡性腫瘤，其發病率在世界范圍內呈逐漸上升趨勢。EC可分為彌漫性和局限性兩類，主要的危害是晚期病變對膀胱、腎臟等器官造成的影響，可導致患者不孕，重癥者甚至出現全身衰竭，危及生命[7]。目前的研究認為腫瘤分期及肌層浸潤深度是EC患者預后的主要影響因素，早期診斷作為延緩病情發展的關鍵，可幫助臨床治療期間判斷具體的臨床分期及浸潤程度[8]。部分EC患者缺乏特異性臨床表現，常用的B超無法發現早期小病灶，而磁共振成像（MRI）價格高昂，在人群中的接受度普遍較低，因此尋求一種無創、經濟、準確的指標用以預測EC患者病情的發展程度顯得尤為重要[9-10]。

血小板與腫瘤轉移的關系是目前廣大學者普遍關注的問題。在對腫瘤的研究中，趙國鋒等[11]研究發現，與健康人群相比，喉癌患者的PLT、MPV及PDW水平發生顯著變化，說明血小板參數對喉癌的診斷具有一定的價值。本研究結果顯示，EC組患者的PLT、PDW、MPV、PCT水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.01），表明血小板參數在EC患者中也具有一定的診斷價值。研究顯示，晚期惡性腫瘤患者血小板參數異常與功能活化最為明顯，因此可采用相關藥物降低血小板的數量和活性，從而延緩腫瘤細胞的浸潤和轉移[12]。本研究結果顯示Ⅰ～Ⅱ期EC患者的PLT、PDW、MPV、PCT水平均低于Ⅲ～Ⅳ期患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。EC患者中血小板參數異常的原因可能如下：①血小板與腫瘤細胞結合形成微血栓，削弱了血流與血管內皮間的摩擦力對腫瘤組織的損傷，并分泌轉化生長因子-β以減輕自然殺傷細胞的活性，逃避免疫監視；②血小板能夠促進腫瘤組織的血管生成并保護血管免受炎癥損傷，以穩定腫瘤細胞的繁殖環境[13-14]。

TIAM1是近年來發現的一種重要的腫瘤轉移促進基因，最初在小鼠T淋巴瘤細胞高侵襲變異株中分離鑒定。相關研究顯示，正常情況下在女性體內，TIAM1基因僅在腦部組織中呈現高表達，而在各種惡性腫瘤，如肝癌、大腸癌、膀胱癌、肺癌和淋巴瘤中，其表達水平顯著上升，且與腫瘤細胞的浸潤和轉移程度具有密切關系[15]。研究表明，該現象出現的原因主要有3個方面：①TIAM1蛋白中的Dbl同源功能區可促進鳥苷二磷酸（guanosine diphosphate，GDP）的釋放和鳥苷三磷酸（guanosine triphosphate，GTP）的結合，進而誘導腫瘤細胞浸潤、轉移，并且TIAM1蛋白還能促進腫瘤細胞運動形成細胞膜褶皺；②TIAM1能夠調節細胞骨架結構，促進片足和絲狀偽足的產生，進而誘導腫瘤細胞發生轉移；③TIAM1與多種在腫瘤細胞轉移中發揮重要作用的信號分子之間有密切關系[16]。本研究結果顯示，EC組患者中TIAM1的陽性表達率為94.0%，明顯高于對照組的6.6%，差異有統計學意義（P＜0.01）。表明TIAM1的表達情況與EC密切相關，其在EC的診斷中具有一定價值。而在不同臨床分期的EC患者中，Ⅰ～Ⅱ期患者的TIAM1中等-強陽性表達率為68.97%，明顯低于Ⅲ～Ⅳ期患者的92.86%，差異有統計學意義（P＜0.01）。進一步提示，EC的臨床分期越晚，TIAM1的表達越趨向于強陽性。

綜上所述，EC患者中血小板參數PLT、PDW、MPV、PCT水平較高，TIAM1在EC組織中的陽性表達率較高，血小板參數與TIAM1可作為預測EC發生與發展的新指標，對協助病情評估及預后判斷具有一定價值。