核酸檢測法應用于血液標本內乙肝病毒檢測結果分析

馬巧琴

【摘 ?要】目的：研究分析核酸檢測法對血液標本內乙肝病毒的檢測效果。方法：對210777份無償獻血的樣本給予核酸檢測、酶聯免疫吸附試驗，分析兩種方法篩查乙肝的效果。結果：比較窗口期，結果核酸檢測法短于酶聯免疫吸附法（p<0.05）;核酸檢測法靈敏性、特異性更優，且不合格率更低，與酶聯免疫吸附法檢測結果具有顯著差異（p<0.05）。結論：相比于酶聯免疫吸附法而言，核酸檢測法具有更好的靈敏性、特異性，且窗口期比較短，不合格率低，值得臨床將其作為篩查血液標本內乙肝病毒的首選。

【關鍵詞】核酸檢測法;血液標本;乙肝病毒

【中圖分類號】R446.11 ? ? ?【文獻標識碼】A ? ? ?【文章編號】672-3783（2020）08-0269-01

酶聯免疫吸附法是臨床檢測乙肝病毒的常用方法，主要通過檢測血清對乙肝感染情況進行篩查[1]。而核酸檢測法操作更加簡單，檢測結果更加可靠，近些年來，在臨床血液篩查過程中得到了廣泛的應用[2]。鑒于此，本文特此以210777份血液標本為例，著重對比探討了核酸檢測法與酶聯免疫吸附法的檢測效果，以供臨床參考。

1.一般資料與方法

1.1一般資料

本次研究之中的觀察主體為無償獻血血液標本，總共210777份，均為本市中心血站于2017年01月--2019年12月接收。通過HBs-Ag快速試紙法以及ALT化學法檢測，均為初篩合格的樣本。每份血液樣本留取2管，利用核酸檢測法、酶聯免疫吸附法進行乙肝感染篩查。各試管貼上條形碼，要求與血袋標簽一致，便于讀取每份血液樣本的具體信息。通過離心機對血液樣本進行離心操作，然后放置于4℃環境下，并在48h完成血液檢查。

1.2方法

儀器與試劑：酶聯免疫吸附法需要抗凝真空管、全自動酶聯免疫分析儀器、全自動加樣儀器，試劑盒由上海科華提供，為HBV血清學標志物試劑盒;核酸檢測法需要分離膠抗凝真空管理、全自動混樣提取儀器、核酸檢測系統、核酸擴增檢測儀器、離心機;試劑盒由上海科華提供，包括丙型肝炎病毒表面抗原試劑盒、乙肝病毒試劑盒、I型免疫缺陷病毒核酸檢驗試劑盒（實時熒光定量PCR系統）。所有試劑盒均在有效期內。利用酶免試劑檢測乙肝兩對半。

根據衛計委提出的要求，結合《獻血者健康要求》，對所有的血液樣本進行初檢以及復檢。酶聯免疫吸附法：不同檢驗人員應用不同試劑、儀器分別檢測HBs-Ag項目。本市中心血站關于HBs-Ag項目設置，以0.7作為灰區值，既是指S/CO值低于0.7，則視為無反應，若是S/CO值超過0.7，則視為有反應。雙試劑都無反應，則視為合格，雙試劑均有反應，則視為不合格，單試劑若是有反應，則待定備查。待定備查的血液標本，利用反應性試劑實施雙孔復試操作，如果復試發現兩孔都沒有反應，則視為合格，若是復試發現有一孔存在反應，則視為不合格。核酸檢測法：針對酶免測定合格的血液樣本，利用核酸檢測系統進行混樣檢測。單檢不合格的血樣。結果判定取決于Ct值（各管內熒光信號到達預定閾值之時的循環數），無反應為Ct值>45，反之則為有反應。混樣檢測結果無反應，視為合格，若是混樣檢測結果有反應，需予以單檢，單檢無反應視為合格。

1.3統計學分析

匯總并分析觀察主體的研究數據，并利用SPSS22.0軟件對研究數據進行統計。百分比資料以[例（%）]描述，行卡方檢驗;計量資料以（均數±標準差）描述，行t檢驗。當P值低于0.05時，說明存在較高的檢驗價值。

2.結果

2.1窗口期對比

核酸檢測法窗口期（20.5±4.5）d短于酶聯免疫吸附法窗口期（35.3±6.9）d（t=17.028，p<0.05）。

2.2兩種不同檢測方法的靈敏性、特異性、不合格率對比

核酸檢測法法靈敏性98.89%（208435/210777）、特異性99.57%（20986/210777）高于酶聯免疫吸附試驗94.89%（20001/210777）、95.56%（201409/210777），而不合格率0.08%（163/210777）低于酶聯免疫吸附試驗1.30%（2744/210777）（X2=77.524/68.530/12.047，p<0.05）。

3.討論

乙肝傳播主要以血液為載體[3]。在我國，乙肝發病率極高，對無償獻血者進行乙肝篩查，確保臨床輸液治療安全，具有十分重大的意義，而且檢測無償獻血血液樣本內乙肝病毒，還有利于臨床降低乙肝感染風險，抑制乙肝傳播。酶聯免疫吸附法是臨床中一種比較常用的檢測方法，在乙肝病毒檢測過程中比較多見，是臨床進行血液樣本篩查的重要手段[4]。隨著現代醫學技術快速發展，核酸檢測法近些年來在臨床血液篩查過程中不斷得到了廣泛的應用，此種檢測方法操作簡單，檢測結果可靠，同時還可以對酶聯免疫吸附檢測法進行有效補充[5]。

本文對照發現，核酸檢測法靈敏性、特異性更高，而窗口期以及不合格例數更少，與酶聯免疫吸附檢測法差異顯著（p<0.05）。核酸檢驗法所獲得的窗口期，只有酶聯免疫吸附檢驗法的1/2。經過酶聯免疫吸附檢驗法進行測定之后，表現為陽性結果的血液樣本，核酸檢測結果卻成為陰性，這有可能是因為乙型肝炎患者血液中殘留HBs-Ag所致;而經過酶聯免疫吸附檢驗法進行測定之后，表現為陰性結果的血液樣本，核酸檢測結果卻成為陽性，有可能是與患者處于乙肝病毒感染初期有關。

總而言之，核酸檢測結果靈敏性、特異性更高，漏診少、檢測結果可靠，值得引起臨床重視。

參考文獻

[1] 謝月娜，潘彤，劉軍.天津市HBV-DNA單獨反應性獻血者標本檢測結果分析[J].中國輸血雜志，2019，32（11）：1159-1162.

[2] 黃永梅.核酸檢測法檢測血液標本內乙肝病毒的價值分析[J].中國現代藥物應用，2019，13（13）：33-35.

[3] 朱麗敏.核酸檢測法和酶聯免疫吸附法在檢測血液標本內乙肝病毒的價值對比[J].齊齊哈爾醫學院學報，2019，40（04）：454-455.

[4] 裴寶芹，夏兵.核酸檢測HBV-DNA在乙肝檢測中的作用分析[J].中國冶金工業醫學雜志，2019，36（01）：109-110.

[5] 蘇俊，駱冬云.核酸檢測與酶聯免疫吸附檢測在無償獻血血液標本乙肝病毒篩查中的應用價值比較[J].中國鄉村醫藥，2015，22（16）：58-59.