妊娠期子宮體檢感染病毒種類、HR-HPV載量及預(yù)后評估

庫瑛，饒亦良，胡蝶，萬桃香

武穴市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北 武穴 435400

宮頸癌是僅次于乳腺癌的常見惡性腫瘤，其發(fā)病率長期位居女性惡性腫瘤前列，致死率高，發(fā)病人群日益呈現(xiàn)年輕化趨勢，給社會及患者造成了極其沉重的負(fù)擔(dān)[1-2]。宮頸癌的發(fā)生是由多因素指導(dǎo)的階段漸進(jìn)性生物學(xué)過程，宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)與癌癥前期病變密切相關(guān)，能夠充分反映宮頸癌病變過程。大量研究表明，高危型人乳頭病毒(HR-HPV)持續(xù)感染是宮頸癌持續(xù)發(fā)展病變的關(guān)鍵，HR-HPV通過病毒基因蛋白干擾細(xì)胞正常工作周期而導(dǎo)致宿主細(xì)胞異常增殖[3-4]。且由于妊娠期婦女性激素水平出現(xiàn)變化，導(dǎo)致生殖道內(nèi)環(huán)境與機(jī)體免疫功能出現(xiàn)變化，感染多呈現(xiàn)潛伏性與隱匿性，臨床癥狀不明顯，不會引起患者足夠重視[5]。針對這一情況，早期檢測妊娠期婦女HR-HPV感染情況極為必要，能夠有效診斷其宮頸病變嚴(yán)重程度，及時采取治療措施，最大程度保證妊娠期婦女生命健康。本研究主要探討妊娠期婦女子宮體檢感染病毒種類、HR-HPV載量及預(yù)后情況，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年6月至2019年6月在武穴市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科進(jìn)行子宮體檢的218例妊娠期婦女為研究對象。根據(jù)第二代雜交捕獲法(HC-2)檢測結(jié)果，將所有婦女分為正常組(31例)、低度鱗狀上皮內(nèi)瘤變(LSIL)組(58例)、高度鱗狀上皮內(nèi)瘤變(HSIL)組(84例)和宮頸癌組(45例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①無免疫系統(tǒng)疾病者；②資料完整且依從性高者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤者；②接受過治療、化療或?qū)m頸手術(shù)者。正常組婦女年齡21～42歲，平均(30.32±6.28)歲；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)平均(25.51±3.28)kg/m2；有孕史12例，無孕史19例。LSIL組婦女年齡21～43歲，平均(31.05±6.34)歲；BMI平均(25.59±3.26)kg/m2；有孕史27例，無孕史31例；宮頸炎33例，CIN I 25例。HSIL組婦女年齡22～43歲，平均(31.47±6.51)歲；BMI平均(25.54±3.30)kg/m2；有孕史41例，無孕史43例；CINⅡ45例，CINⅢ39例。宮頸癌組婦女年齡23～44歲，平均(32.13±6.68)歲；BMI平均(25.49±3.22)kg/m2；有孕史25例，無孕史20例。四組妊娠期婦女的年齡、BMI、孕史資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。本研究均經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，妊娠期婦女及其家屬均知情并簽署同意書。

1.2 檢測方法 四組妊娠期婦女統(tǒng)一取截石位，充分暴露宮頸外口，采用無菌消毒棉簽擦拭患者宮頸分泌物，隨后將宮頸刷緩慢置入患者子宮頸內(nèi)，順時針旋轉(zhuǎn)5～10圈，以確保宮頸細(xì)胞充分掉落，停留5 s收集完成后取出，置入事前準(zhǔn)備好的包含ThinPrep保存液液基瓶中，密封標(biāo)記，置于4℃冰箱中待檢。注意事項(xiàng)：標(biāo)本采集應(yīng)避開患者月經(jīng)期；采樣前1 d禁止同房、盆浴、陰道檢查；采樣前3 d禁止陰道用藥，不得用碘液涂抹陰道口。分別于妊娠期及產(chǎn)后3個月，采用HC-2方法對收集的宮頸細(xì)胞或病變組織進(jìn)行檢測，包括HR-HPV感染種類及載量，標(biāo)本數(shù)據(jù)由專業(yè)婦產(chǎn)科醫(yī)師進(jìn)行細(xì)胞收集，定量定標(biāo)進(jìn)行13種HR-HPV載量(包括 HPV-16、HPV-18、HPV-31、HPV-33、HPV-35、HPV-39、HPV-45、HPV-51、HPV-52、HPV-56、HPV-58、HPV-59、HPV-68)檢測。檢測試劑主要包括：裂解液、HPV Probe b、DR1、DR2及主要實(shí)驗(yàn)儀器基因雜交信號擴(kuò)大儀DML2000，上述材料及儀器均采購于美國Digene公司。檢測由專業(yè)醫(yī)師嚴(yán)格按照規(guī)章制度及操作說明進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo) 比較四組妊娠期婦女HR-HPV感染種類、載量及其預(yù)后情況。HR-HPV載量以該樣本的相對發(fā)光單位(RLU)/陽性對照臨界值(CO)表示，陽性≥1。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，組間兩兩比較采用t檢驗(yàn)，三組及以上比較采用單因素方差分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組妊娠期婦女HR-HPV感染情況比較 正常組婦女的感染類型主要為HPV-31、HPV-33、HPV-35，LSIL組、HSIL組和宮頸癌組的感染類型主要為HPV-16、HPV-18；LSIL組、HSIL組和宮頸癌組的單一感染率和多重感染率均明顯高于正常組，且宮頸癌組的單一感染率明顯高于LSIL組、HSIL組，HSIL組的單一感染率明顯高于LSIL組，宮頸癌組的多重感染率明顯高于LSIL組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 四組妊娠期婦女的HR-HPV感染情況比較[例(%)]

2.2 四組妊娠期婦女的HR-HPV載量情況比較 LSIL組、HSIL組和宮頸癌組的HR-HPV載量均明顯高于正常組，且宮頸癌組的HR-HPV載量明顯高于LSIL組、HSIL組，HSIL組的HR-HPV載量明顯高于LSIL組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 四組妊娠期婦女的HR-HPV載量情況比較(±s)

表2 四組妊娠期婦女的HR-HPV載量情況比較(±s)

注：與正常組比較，a P＜0.05；與LSIL組比較，b P＜0.05；與HSIL組比較，c P＜0.05。

組別正常組LSIL組HSIL組宮頸癌組F值P值例數(shù)31 58 84 45 HR-HPV載量(pg/mL)32.51±6.84 296.43±74.18a 393.27±103.45ab 738.64±167.16abc 9.925 0.001

2.3 四組妊娠期婦女預(yù)后比較 產(chǎn)后3個月，LSIL組、HSIL組和宮頸癌組的單一感染率和多重感染率均明顯高于正常組，且宮頸癌組的單一感染率明顯高于LSIL組、HSIL組，HSIL組的單一感染率明顯高于LSIL組，宮頸癌組的多重感染率明顯高于LSIL組；LSIL組、HSIL組和宮頸癌組的自然轉(zhuǎn)陰率均明顯低于正常組，且宮頸癌組的自然轉(zhuǎn)陰率明顯低于LSIL組、HSIL組，HSIL組的自然轉(zhuǎn)陰率明顯低于LSIL組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表3 四組妊娠期婦女預(yù)后比較[例(%)]

3 討論

宮頸癌的發(fā)病部位常見于宮頸管柱狀上皮和宮頸陰道部上皮交界處，該部位極易受損，外界刺激和感染情況較為嚴(yán)重，使得該處細(xì)胞發(fā)生不典型上皮增殖，并隨時間發(fā)展由病變最終演化為宮頸癌[6-7]。人類乳頭瘤病毒(HPV)是球型外科病毒，能夠寄生于婦女受損宮頸上皮，使宮頸上皮長期處于感染狀態(tài)無法康復(fù)，導(dǎo)致上皮細(xì)胞發(fā)生不典型增殖，引起不同程度的上皮瘤變，最終演化成為宮頸癌[8-9]。根據(jù)HPV亞型可將宮頸癌CIN關(guān)系分為：高危型和低危型，高危型包含HPV-16、HPV-18、HPV-31、HPV-33、HPV-35、HPV-39、HPV-45、HPV-51、HPV-52、HPV-56、HPV-58、HPV-59、HPV-68，低 危 型 包 含 HPV-6、HPV-11、HPV-40、HPV-42、HPV-43、HPV-44、HPV-54、HPV-61、HPV-70、HPV-72、HPV-81[10]。妊娠期婦女性激素水平發(fā)生極大變化，生殖道內(nèi)環(huán)境以及免疫功能受到影響，且感染癥狀不明確，多呈現(xiàn)隱匿性與潛伏性，不易引起女性重視，導(dǎo)致患者錯過最佳診斷時機(jī)[11]。因此，對妊娠期婦女開展HR-HPV感染種類及載量檢測是診斷宮頸癌并做到積極防治的重中之重。

本研究采用HC-2方法檢測所有研究對象妊娠期及產(chǎn)后3個月HR-HPV感染種類、載量，結(jié)果顯示31例正常婦女和187例宮頸病變婦女妊娠期及產(chǎn)后3個月，檢測 HR-HPV 種類包含 HPV-16、HPV-18、HPV-31、HPV-33、HPV-35、HPV-39、HPV-45、HPV-51、HPV-52、HPV-58、HPV-68等11個類型，其中正常婦女的感染類型主要為HPV-31、HPV-33、HPV-35，宮頸病變婦女的感染類型主要為HPV-16、HPV-18。除此之外，宮頸病變婦女的單一感染率和多重感染率均明顯高于正常妊娠期婦女，且宮頸病變婦女的感染率隨其病變嚴(yán)重程度而不斷升高，說明妊娠期婦女宮頸病變與HR-HPV感染具有相關(guān)性，病變程度越嚴(yán)重，其感染率越高。

在臨床治療當(dāng)中，單純通過HR-HPV感染陽性或陰性進(jìn)行宮頸癌患者及高危人群篩查仍存在不確定性與局限性，通常大部分婦女出現(xiàn)HPV感染時都會在短時間內(nèi)消失，僅有少數(shù)婦女處于持續(xù)感染階段，并且存在患有宮頸癌的可能[12]。近些年來，隨著研究的進(jìn)一步深入，在HR-HPV感染率和種類檢測的基礎(chǔ)上聯(lián)合HR-HPV載量檢測，開始逐漸應(yīng)用于妊娠期婦女宮頸癌檢測診斷當(dāng)中。本研究發(fā)現(xiàn)，宮頸病變婦女的HR-HPV載量明顯高于正常妊娠期婦女，且宮頸病變婦女的HR-HPV載量隨其病變嚴(yán)重程度而不斷增加，這一結(jié)果表明HR-HPV載量能夠影響到妊娠期婦女是否出現(xiàn)宮頸癌病變，HR-HPV載量與宮頸病變存在劑量-效應(yīng)關(guān)系。產(chǎn)后3個月，宮頸病變婦女的單一感染率和多重感染率均明顯高于正常妊娠期婦女，且宮頸病變婦女的感染率隨其病變嚴(yán)重程度而不斷升高；宮頸病變婦女的自然轉(zhuǎn)陰率均明顯低于正常妊娠期婦女，且宮頸病變婦女的自然轉(zhuǎn)陰率隨其病變嚴(yán)重程度而不斷降低，說明妊娠期婦女宮頸病變程度越嚴(yán)重，其預(yù)后情況越差，而妊娠期婦女HR-HPV感染種類及載量的檢測有利于其病情的早期診斷，有及時采取治療措施防治宮頸癌、促進(jìn)預(yù)后等積極作用。

綜上所述，HPV-16和HPV-18是妊娠期宮頸病變患者HR-HPV感染的主要類型，患者宮頸病變程度越嚴(yán)重，其HR-HPV感染種類及載量越多；且妊娠期婦女HR-HPV感染率及載量越高，其預(yù)后情況越差，檢測妊娠期婦女HR-HPV感染種類及載量對其早期診斷、治療及預(yù)后具有重要意義。