滕淵潔,韋其真,劉文涵,劉江美,聶永惠,李 盼
浙江工業大學化學工程學院,綠色化學合成技術國家重點實驗室培育基地,浙江 杭州 310032
農藥及殘留主要有有機磷、 有機氯、 菊酯和氨基甲酸酯四大類,同類分子在結構上具有一定的相似性,這給特定分析檢測帶來一定的困難。目前,國標[1]規定的農藥檢測方法主要有氣相色譜-質譜聯用(GC-MS)和液相色譜-質譜聯用(LC-MS)等。在色質聯用中,雖然QuEChERS法[2]可簡化前處理過程,30 min約可處理6個樣品,但色譜分離仍需較長時間,無法滿足現場大批量檢測需求。至于市場上農藥殘留的快速檢測,雖然有酶標儀、 顯色卡、 電化學速測儀等形式,但檢測原理均基于乙酰膽堿酯酶抑制法[3],即利用農藥對乙酰膽堿酯酶的活性抑制來間接判斷是否存在農藥,但幾乎每種農藥均對乙酰膽堿酯酶有抑制作用,因此存在專一性不高的問題。從而,有必要開發一種能夠實現特異性的快速檢測農藥殘留分子的方法。
適配體(Aptamer)[4]是指一類經過篩選,能夠特異性結合靶向物質的單鏈DNA或者RNA。目前,aptamer在分子檢測領域已經發展形成了多種分析手段[5],如比色法、 熒光法、 電化學法、 拉曼光譜法等,主要用于檢測蛋白、 微生物、 生物毒素、 有機污染物、 重金屬離子。近年來,陽性克隆篩選方法(SLECTIVE)及活性改造[6]越來越成熟,但利用aptamer方法進行農藥特效性檢測相對較少。目前,已報道具有aptamer特異性的農藥分子有啶蟲脒[7]、 莠去津、 馬拉硫磷, 丙溴磷[8]及同時檢測甲拌磷、 丙溴磷、 水胺硫磷和氧(化)樂果的aptamer[9]等;……