黑果枸杞和寧夏枸杞多糖含量比較研究

2020-08-08 12:29:22李兆君丁潤梅

石油化工應用 2020年7期

李兆君，丁潤梅

（寧夏醫科大學，寧夏銀川 750004）

多糖是由單糖組成的天然高分子化合物，具有廣泛的生物活性，能調節人體免疫力、抗腫瘤、延緩衰老等作用。枸杞多糖是枸杞中重要的組成物質，是一種水溶性物質。黑果枸杞和寧夏枸杞在植物學分類上都屬于茄科，只是兩個不同的枸杞品種，本文對兩種物質枸杞多糖含量的測定與分析比較，了解和全面認識黑果枸杞這一珍貴的植物資源奠定堅實基礎。

多糖含量的測定最常見的方法是苯酚-硫酸法，以葡萄糖標準品為對照。苯酚-硫酸紫外分光光度法[1，2]測定多糖的方法是利用枸杞多糖在濃硫酸的作用下水解成單糖，脫水生成糠醛衍生物，該衍生物和苯酚能夠生成有色化合物，用紫外分光光度法測定其含量，實驗前用乙醇洗滌去除單糖，以丙酮-石油醚脫色，避免對實驗產生干擾，此方法簡單，易行。

1 材料與儀器

1.1 材料

寧夏枸杞（中寧東華鄉產）；黑果枸杞（寧夏中寧種植）；D-葡萄糖（AR，科密歐試劑）；濃硫酸；苯酚（AR，煙臺雙雙化工有限公司產）；無水乙醇（AR，北聯試劑）；甲醛（天津市盛奧化學試劑有限公司）、丙酮、石油醚。

1.2 實驗設備、儀器

紫外分光光度計（UV-1600，上海美譜達儀器有限公司）；KDM 型調溫電熱套（250 mL）；粉碎機；80 目篩子；電子分析天平；瑞爾回流提取裝置；國華超級恒溫水浴箱。

2 實驗方法

2.1 黑果枸杞多糖和寧夏枸杞多糖的提取

黑果枸杞和寧夏枸杞分別烘干，粉碎，過80 目篩，稱取粉末10 g 加水100 mL 在100 ℃水浴中提取3次，每次提取時間為2.0 h、1.5 h、1 h，3 次300 mL，過濾合并3 次濾液，靜止12 h 后提取其上清液，用80 %乙醇減壓濃縮浸泡，冰箱中靜置24 h（5 ℃），過濾得沉淀，索氏提取，以95 %乙醇、無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌沉淀，得粗多糖粉末[3，4]。

2.2 標準曲線繪制

葡萄糖標準溶液配制：準確稱取干燥恒重的葡萄糖0.100 3 g，定容在100 mL 容量瓶中，得1 mg/mL 葡萄糖標準溶液。用吸量管取10.00 mL，定容在100 mL容量瓶中，稀釋至100 μg/mL 葡萄糖測量液待用。

圖1 葡萄糖標準曲線圖

苯酚溶液配制：稱取90 g 苯酚，定容在100 mL 容量瓶中。取5.00 mL，定容在50 mL 容量瓶中，稀釋至9 %，現配現用。

取8 支試管，標示管號1～8，分別加100 μg/mL 葡萄糖測量液0.00 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.30 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL、1.00 mL，冰水浴分別加入9 %苯酚液0.50 mL，振蕩搖勻后緩慢加入濃硫酸3.00 mL，溫度不宜高，以微放熱為適宜，放置約30 min 后以0 號試管作空白參照，在490 nm 處測定吸光度值，繪制葡萄糖標準曲線圖（見圖1）。

2.3 多糖含量的測定

準確稱取干燥后所得的黑果枸杞和寧夏枸杞多糖粉末50.0 mg，放置在50.00 mL 容量瓶中，加蒸餾水溶解，定容。分別用吸量管吸取5.00 mL 于50.00 mL 容量瓶中，定容至刻度線，再用吸量管吸取1.00 mL 稀釋液于10.00 mL 容量瓶中，分別加入9 %苯酚液0.50 mL，振蕩搖勻后緩慢加入濃硫酸3.00 mL，放入水浴箱，沸水浴中反應15 min 后立刻放置在0 ℃中進行冷卻，冷卻后在490 nm 處測得吸光度值[5]。