不同基因型HCV感染患者重疊HBV或HIV感染的病毒學特征

彭亞柏 朱秀云 劉賽云 王敏 龍壽斌 程文兵 蔡侃儒 劉甲野

丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）和乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）感染慢性化程度高，可導致肝硬化和肝癌，是嚴重威脅人類健康的主要傳染病［1-4］。HBV與HCV存在相似的傳播途徑，所以HBV/HCV重疊感染較常見。同樣的，HCV與HIV（Human immunodeficiency virus，HIV）兩者共有的傳播方式也容易造成這兩種病毒共感染。有研究顯示HCV和HBV均為嗜肝病毒，兩者重疊感染后HCV RNA水平與單純丙型感染者無明顯差異，但加速了肝臟疾病的進行性惡化，更易形成肝硬化和肝癌［5-8］。但也有研究認為HCV和HBV重疊感染后也會存在相互抑制的現象［9］。慢性HCV感染重疊HIV時，與 單獨HCV感染者相比，其血液中存在更高的HCV RNA滴度，HIV可促進HCV對肝臟的攻擊，從而加速了肝細胞的損傷［10］，同時HCV/HIV重疊感染患者，其發生機會性感染及死亡率也高于未重疊感染HIV患者［11］。HCV存在眾多基因型，但不同基因型HCV發生HBV或HIV重疊感染時的病毒學特征研究較少。故本文擬研究不同基因型HCV重疊HBV或HIV感染時，HCV的病毒學特征。

1 對象和方法

1.1 一般資料

選取2017至2020年于本院就診篩查HCV基因型的1 292名患者，以其中既完成HCV RNA，又進行HBV和HIV檢測的丙肝患者為研究對象，共入組397名符合條件的丙肝患者。所有患者及家屬均已簽署知情同意書。排除標準：混合基因型感染；合并其他病毒性急性肝炎；排除同時合并HBV和HIV。本研究已通過本院倫理委員會批準通過。

1.2 方法

采用PCR熒光探針法（泰普生物科學有限公司）檢測HCV基因分型，按照HCV基因分型檢測試劑盒說明書中的標準判定分型結果。使用羅氏Cobas TaqMan試劑檢測HCV RNA載量，同時依據檢測試劑盒說明書中的標準判定結果。對于乙肝五項及HIV的檢測，均使用酶聯免疫法，根據要求判定陰性或陽性結果。

1.3 統計學方法

采用SPSS 18軟件進行數據分析，計數資料用n（%）表示，不符合正態分布的計數資料，用中位數、四分位距描述，采用中位數和（25%、75%分位數）表示，統計分析采用χ2檢驗或非參數檢驗，以中位數（25%、75%分位數）表示。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 對所有進行基因分型檢測的丙肝患者的基因型構成特點進行分析

2017至2020年期間篩選的1 292名丙肝患者中，共檢測出5種基因型，分別為1b型、6a型、2a型、3b型、3a型，其所占比例如圖1。結果顯示1b型比例最高，3a型比例最低，除2a型外，其余基因型中男性患者高于女性患者。

圖1 檢測的丙肝患者的基因型構成特點Figure 1 Proportion of genotype in patients with Hepatitis C infection

2.2 對丙肝患者不同基因型中重疊HBV或HIV特征進行分析

符合入組的397例丙肝患者。丙肝重疊HBV或HIV感染率分別為9.1%（36/397）與6.3%（25/397）。見表1。

表1 丙肝患者不同基因型中HBV或HIV共感染率Table 1 Prevalence of co-infection with HBV or HIV in Hepatitis Cpatients stratified by HCV genotype

2.3 分析重疊HBV或HIV感染后不同基因型的HCV病毒載量的變化

未重疊HBV感染與重疊HBV感染的1b型HCV RNA滴度的中位數（25%，75%IQR）分別為1.55×106（3.12×105，3.25×106）IU/mL和2.64×105（6050，9.41×105）IU/mL，兩組比較差異有統計學意義（P＜0.05）。相似的，對于6a型，其分別是1.52×106（1.44×105，7.11×106）IU/mL和1.48×106（1.45×105，4.81×106）IU/mL，兩組比較差異無統計學意義（P＞0.05）。而對于3a型、3b型、2a型，其重疊HBV感染的樣本量少，未進行統計。同樣地，未重疊HIV感染與重疊HIV感染的1b型HCV RNA滴度的中位數（25%，75%IQR）分別為1.27×106（2.80×105，3.04×106）IU/mL和1.99×106（1.28×105，4.26×106）IU/mL，相似的，對于6a型及3a型，其分別是1.46×106（1.44×105，6.86×106）IU/mL和3.44×106（1.29×105，8.08×106）IU/mL，1.84×106（3.48×105，7.31×106）IU/mL和3.60×106（6.61×105，6.03×106）IU/mL。在1b型、6a型及3a型，未重疊HIV感染與重疊HIV感染，其HCV RNA的滴度在兩組間的差異無統計學意義（P＞0.05），而對于3b型、2a型，由于其重疊HIV感染的樣本量少，未進行統計（圖2）。

圖2 重疊HBV或HIV感染后不同基因型的HCV病毒載量的差異Figure 2 The difference of HCV viral load in different genotypes after superimposed HBV or HIV infection

3 討論

HCV是一種單股線性正鏈黃病毒［12］，基因易變異，目前至少可分為6個基因型及多個亞型，其中1型、2型、3型、6型是我國常見的四種HCV基因型。對于這些基因型還有不同亞型的存在，我國以1b型、2a型常見，6a型是我國南方地區流行的HCV主要亞型［13］。不同基因型HCV病毒的致病力和對抗病毒治療的反應不同，而分析合并HIV或HBV的HCV感染者的基因型分布對于共感染者的HCV病毒學特征及抗病毒治療可提供重要的依據。

付［14］等人對廣東省丙型病毒性肝炎的流行概況和流行特征中發現，深圳市報告丙型肝炎病例數位于全省第三位。本研究顯示深圳地區慢性HCV感染以1b及6a型為常見基因型，慢性HCV感染者重疊HBV或HIV感染率對于不同基因型其重疊感染率不同。有研究顯示雖然HCV 1b型最為常見，但對于HBV易感性來說，與其他基因型相比，無明顯易感性增強的表現。鄧［15］的一項研究顯示，HCV重疊HIV感染者與HCV感染者其感染的HCV基因型構成比存在差異，HCV/HIV重疊感染中HCV基因型以6a型為主，2a型未見重疊感染。故HCV重疊感染HBV或HIV的基因型分布特點不同于HCV基因型分布特點。

HCV與HBV在體內共存較常見，均為嗜肝病毒，有研究顯示兩者重疊感染后更易發生免疫系統紊亂，這種改變可能表現為相互干擾或抑制現象［6，9］。但合并感染時是否存在HBV對不同基因型HCV感染者病毒載量的影響鮮有報道［9，16］。本研究發現重疊HBV或HIV感染后不同基因型的HCV病毒載量與單純HCV感染組不同。丁［17］的一項研究顯示，HCV重疊HBV感染者HCV RNA滴度與單純HCV感染者的病毒載量無明顯差異，但是丁未對HCV感染者的不同基因型重疊感染HBV后進行分析。同時Jamma［18］應用新的細胞生物模型也顯示出兩種病毒在同一肝細胞內復制而互不影響，進一步驗證了丁的實驗結果。但也有研究發現HCV對HBV存在抑制作用，其強弱與HCV基因型有關，表現出1b型強于基因3a和1a型［19］，本研究未探討HCV對HBV的作用。總之，本研究發現對于不同HCV基因型，HBV對HCV作用的表現形式也不一樣。

HCV和HIV共有的血液傳播方式，使兩者發生重疊感染機會增加，對于HCV重疊HIV感染后，HIV對不同基因型HCV感者病毒載量變化的研究甚少。但是此兩項研究均未探討對于不同HCV基因型重疊感染HIV后，HIV是否表現為一樣的作用。由于HCV基因型的分布存在地域差異，不同地區的研究其HCV基因型分布特點不一樣，焦的研究是地區是中國北方，本研究地是中國南方。本研究的主要不足為部分基因型樣本量少，無法進行統計計算，未來需要全國范圍各個區域的多中心研究來驗證和補充我們的結論。

總之，本研究發現深圳地區慢性HCV感染者重疊HBV或HIV感染率較高；重疊HBV感染的1b型患者HCV RNA復制減弱，重疊HIV感染的患者，各基因型HCV RNA滴度無明顯變化。