頸項透明層增厚胎兒的遺傳學檢測結果分析

王德剛 董興盛 滿婷婷 江 陵 陸林苑 熊 怡 歐德明 唐海深 李海軍

（中山市博愛醫院產前診斷中心，廣東中山528403）

NT值是指在孕11～13+6周胎兒頸后皮下組織內積液的厚度，胎兒NT值已經成為妊娠早期篩查的常用指標，且在孕早期篩查胎兒染色體非整倍體的價值已經得到廣泛認可[1]。研究顯示NT增厚胎兒除了染色體非整倍體風險增高，還有可能出現全基因組拷貝數變異（Copy number variantsc，CNVs）、單基因遺傳病、結構異常（主要為心臟畸形）以及流產和胎死宮內等。CMA技術是一種用于全基因組拷貝數變異的檢測方法，對于染色體的微缺失、微重復及不平衡的重排具有突出優勢[2]。因此，本文對核型正常的NT值增厚胎兒的CMA結果進行分析和總結，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集 2017年2月至2018年12月在本院產前診中心就診的218名孕婦的臨床資料，納入標準為孕11～13+6周胎兒NT值≥3.0mm的孕婦，經遺傳咨詢并簽署知情同意書后接受絨毛活檢術、羊膜腔穿刺術或臍靜脈穿刺術等介入性產前診斷手術獲取胎兒樣本。對染色體核型分析未見異常的170例胎兒樣本，采用CMA檢測胎兒CNVs。

1.2 方法

1.2.1 胎兒頸項透明層厚度測量：采用GE Vouson E8彩色多普勒超聲診斷儀，由經驗豐富的醫生對孕11～13+6周的孕婦進行胎兒NT測量，嚴格按照英國胎兒醫學基金會的質控標準進行操作。NT測量平面為胎兒正中矢狀面，胎兒自然屈曲，并盡可能將測量圖像放大，使圖像只顯示胎兒頭部及上胸，測量光標的輕微移動只會改變測量結果0.1mm。NT測量時應在無回聲區域最寬處測量并垂直于皮膚光帶，測量游標的內緣應置于無回聲區域內緣。至少測量3次以上，并記錄所得的最大數值。當NT值≥3.0mm診斷為胎兒NT增厚。

1.2.2 染色體微陣列分析：胎兒樣本采用QIAamp DNA Mini Kit試劑盒按照試劑盒的說明書提取胎兒基因組DNA。采用Affymetrix CytoScan 750K平臺對胎兒基因組DNA進行全基因組拷貝數變異分析，實驗室操作嚴格按照Affymetrix公司提供的操作流程。使用Affymetrix 7G掃描儀掃描芯片，信號圖經過Chas軟件分析和計算。結合實驗室本地數據庫，參照 DGV、Clinvar、ClinGen、Decipher等公共數據庫進行數據分析，將CNVs分為致病性、疑似致病性、臨床意義不明確（Variants of unknown significance，VOUS）、可能良性及良性5種類型，其中可能良性和良性的CNVs在CMA檢測報告中不提示。

1.3 妊娠結局隨訪：電話隨訪所有研究對象的妊娠結局及胎兒出生后3個月的健康情況。

1.4 統計學方法：運用SPSS 22.0軟件進行統計學分析，計數資料采用χ2檢驗，計量資料采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 研究對象：218例胎兒NT增厚，有雙胎之一NT增厚10例，其余均為單胎；NT值3.0～3.5mm組共119例，NT值≥3.5mm組共99例。初產婦81名，經產婦137名。所有孕婦均進行介入性產前診斷穿刺，其中絨毛活檢術14例，羊膜腔穿刺術199例，臍靜脈穿刺術5例，穿刺孕周為12+4周至30+6周，平均穿刺孕周為（18.31±0.14）周；孕婦年齡為20～44 歲，平均年齡（31.34±0.35）歲。

2.2 CMA檢測結果：170例核型正常的NT值增厚胎兒CMA檢出各類CNVs14例，其中致病性/疑似致病性CNVs5例，發生率2.94%，臨床意義未明CNVs7例，純合狀態CNVs2例。NT值3.0～3.5mm胎兒致病性/疑似致病性CNVs發生率為0，NT值≥3.5mm胎兒致病性/疑似致病性CNVs發生率為6.85%，差異有統計學意義（P＜0.05）。CMA未見異常孕婦不良妊娠結局發生率5.13%，其中胎兒心臟異常4例，占50%。NT值3.0～3.5mm且CMA未見異常孕婦，不良妊娠結局發生率1.10%；NT值≥3.5mm且CMA未見異常孕婦，不良妊娠結局發生率10.77%，兩者差異具有統計學意義（P＜0.05），詳見表1。

表1 170例NT值增厚胎兒CMA檢測結果 [n（%）]

2.3 8例NT值增厚且CMA正常胎兒的不良妊娠結局：8例不良妊娠結局胎兒NT值為3.3～5.1mm，平均NT值（3.96±0.55）mm。2例發生自然流產，6例因胎兒異常在25+周至29+周引產，其中4例胎兒心臟異常，占所有NT增厚且CMA正常胎兒的2.56%，詳見表2。

表2 8例NT增厚且CMA正常胎兒不良妊娠結局

3 討論

胎兒發育至11～13周，胎兒頸部會出現少量淋巴液積累及暫時性回流障礙的可能，胎兒頸部出現透明帶，若胎兒有其他發育異常時，回流障礙增加后使胎兒頸部出現明顯淋巴液聚集，出現典型的NT增厚[3]。胎兒NT增厚與核型正常的遺傳綜合征或神經發育遲緩的發生關聯尚未完全確定，據報道超過50種遺傳病已被描述與NT增厚有關[4]。本文對我院170例NT增厚胎兒進行CMA檢測，結果顯示NT值≥3.5mm胎兒致病性/疑似致病性CNVs發生率高于NT值3.0～3.5mm的胎兒，與徐玲玲[5]的研究結果相似。2.56%的NT值增厚且CMA正常胎兒發生心臟異常，包括完全性心內膜墊缺損、胎兒三尖瓣閉鎖、右室發育不良、房室間隔缺損、主動脈瓣關閉不全、右室雙出口、完全型肺靜脈異位引流及大動脈轉位等。孕婦選擇引產，導致不良妊娠結局的發生，與王敏[6]研究結果相似。NT增厚與核型正常的胎兒發生不良妊娠結局的原因可能為胎兒淋巴管排泄異常、頭部及頸靜脈充血、心臟功能異常、胎兒貧血、水腫、宮內感染、某些遺傳綜合征等，有文獻顯示，NT值越高，胎兒致病性染色體的檢出率越高。NT異常升高與染色體異常、心臟畸形等也有相關性[7]。有研究顯示NT增厚的胎兒，會出現心鈉肽、腦鈉肽及內質網ATP酶表達異常，使妊娠末期的胎兒心臟舒張壓力過高，心室灌注不成熟導致NT持續增厚，導致NT升高胎兒會出現發育遲緩甚至不良妊娠結局；先天性心臟病的發生率隨NT增厚而增加，胎兒心臟異常的發生率從NT為3.5～4.4mm時的8.7% 增加到NT＞6.5mm時的33.33%[5]。CMA是一種較為先進的檢測技術，可以快速分析基因組的DNA拷貝數變異，耗時短、成功率高，可以增加染色體異常的檢出，在產前超聲發現異常的胎兒中有廣泛的應用，有利于出生缺陷防控的建議。

綜上所述，對核型正常的NT增厚胎兒進行CMA檢查，可以阻斷有缺陷的胎兒出生，對核型正常、CMA正常的孕婦應密切監測胎兒心臟發育，提高心臟異常胎兒的檢出率，減少嚴重缺陷兒的出生。