酶聯免疫吸附試驗檢測梅毒抗體假陽性的原因探討

王穎嫻 陳媛媛 趙帆

（西安交通大學第一附屬醫院檢驗科，陜西西安，710061）

梅毒是一種對人體健康有嚴重傷害的性傳播性疾病，該病癥從根本上來說是蒼白螺旋體（Treponemapallidum）感染所導致的，基于其傳播途徑，可分為先天性和后天性兩種。其中，前者就是傳播途徑就是胎盤傳播，所以胎兒分娩后就體內就具有此病毒；后者的傳播途徑則是因為不潔性行為、間接接觸等[1]。數據統計表明，梅毒近年來在我國的發病率有所上升，在萬分之三到萬分之四之間。梅毒是一種全年齡段均可感染發病的疾病，實際患者主要集中在20-40 歲群體中[2]。梅毒如果沒有得到有效控制，會造成患者多器官功能障礙，具有很高的致死率。所以要盡量做到早檢查、早治療。當前，檢測梅毒采用的主要方法是酶聯免疫吸附試驗。然而該方法使用以來，有一定概率會出現假陽性結果。為了進一步分析酶聯免疫吸附試驗檢測梅毒抗體假陽性的原因，我院展開此次臨床研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以我院2018 年1 月至2019 年12 月期間11238 例接受梅毒抗體檢測的血清標本為對象展開分析。全部血清標本來自于6055 例男性和5183 例女性，年齡最小者僅有1 歲，最大者95歲，平均年齡為（55.4±2.1）歲。全部參與測試的研究對象（家屬）均對本次研究知情同意，并且其中不包括惡性腫瘤疾病患者和嚴重臟器功能衰竭患者。

1.2 方法

所有參與研究的受試者，均為空腹狀態下接受采血。共采集靜脈血5ml 并均分為兩份，分別實施酶聯免疫吸附試驗檢測（ELISA）和梅毒特異性抗體檢測（TPPA）檢測。本次研究中，所使用的酶標儀由深圳雷度生命科技公司提供，相關檢測試劑來自于上海科華生物。

1.3 觀察指標

對比兩組方法得出的陽性率和陰性率，并就酶聯免疫吸附試驗檢測得出的假陽性樣本展開進一步分析，找出造成假陽性的主要原因。

1.4 統計學方法

使用SPSS20.0 對研究中兩組患者的相關指標展開統計分析，計量數據運用t 檢驗，計數數據運用χ2 檢驗，以P＜0.05作為差異具有統計學意義的判斷標準。

2 結果

2.1 兩種方法的檢測結果

如下表1 中數據所示，相比于梅毒特異性抗體檢測的結果，酶聯免疫吸附試驗檢測的陽性率0.58%略高，但兩種方式的陽性率無統計學差異，P＞0.05。

表1 兩種方法的檢測結果對比

2.2 酶聯免疫吸附試驗假陽性原因分析

經過分析，本次檢驗中采用酶聯免疫吸附試驗檢測11238例血液樣本，共出現了65 例陽性結果，其中21 例為假陽性結果。

通過對假陽性結果展開深入分析，總結其原因有如下幾點：11例（0.098%）假陽性是由于年齡因素影響,所占比例最高；5 例（0.046%）假陽性是由于樣本因素影響，3 例（0.027%）假陽性是由于疾病因素影響，2 例（0.018%）假陽性是由于螺旋體共生因素影響，占比最少。

3 討論

3.1 梅毒病毒及酶聯免疫吸附試驗

就當前對于梅毒的相關研究來看，梅毒螺旋體具有非常規律的生長發育周期，通常會經歷三個使其，分別為顆粒期、球形體期和螺旋體期；并且梅毒病毒有非常強的繁殖能力，30 個小時即可有一倍的增長量。梅毒病毒的不同發育周期，直接決定了其處于潛伏還是發作狀態，以及其癥狀表現、危害性等等。研究結果表明，梅毒螺旋體是一種典型的厭氧菌，所以在外界生活的能力非常弱，特別是對各種化學藥品有極高的敏感性，在體外環境幾乎無法存活；而且梅毒病毒在光照環境、干燥環境均會快速死亡，這也導致此病毒難以通過器形傳播[3]。但是，梅毒病毒是一種潛伏期非常長的病毒，這也是其危害性較高的重要原因，研究表明，沒梅毒病毒感染兩年后，其依然可以通過胎盤傳播。所以強化梅毒病毒檢測，對于一直其蔓延有非常重要的意義。當前，我國已經將梅毒螺旋體作為孕前保健、獻血的重要檢測項目，就是為了有效抑制其傳播。

當前，我國在實施梅毒檢測的過程中，絕大部分地區的衛生機構，使用的方法都是酶聯免疫吸附試驗，通過酶聯免疫吸附和雙抗原夾心法來實施檢測，從而對患者是否受梅毒感染作出判斷[4]。這種方法降壓相對簡單，所以受到了廣泛的應用。本次實驗中，酶聯免疫吸附試驗檢測的陽性率0.58%略高于梅毒特異性抗體檢測的0.39%，但兩種方式的陽性率無統計學差異，P＞0.05。這充分體現了該方法所具有的價值。但是，隨著該方法大范圍展開應用，逐漸發現存在這一定比例的假陽性結果，本次研究結果中也體現出了這一點。這也迅速引起了臨床上的高度重視，檢測的假陽性結果容易造成不良的效應，尤其是當前我國梅毒發病率逐漸提升的背景下，檢測結果的準確率對于控制梅毒有非常重要的影響。所以，針對酶聯免疫吸附試驗假陽性結果展開原因分析，具有非常重要的顯示意義。

3.2 酶聯免疫吸附試驗假陽性原因分析

本次檢驗中采用酶聯免疫吸附試驗檢測11238 例血液樣本，共出現了65 例陽性結果，其中21 例為假陽性結果。這也充分證明了酶聯免疫吸附試驗檢測梅毒抗體的確有一定的概率會得到假陽性結果。就導致酶聯免疫吸附試驗檢測梅毒抗體假陽性的原因來看，年齡因素、樣本因素、疾病因素和螺旋體共生因素，分別有11 例、5 例、3 例和2 例。

（1）年齡因素。本次研究中，11 例患者因為年齡因素而出現假陽性。患者及未表現出相關癥狀，也沒有發病史與接觸史，但是檢驗結果卻呈現出陽性。這樣的結果的原因就是因為年齡造成的。人體機能會隨著年齡的增加而逐漸衰退，各器官都會逐漸表現出衰退跡象，免疫功能也會出現明顯的跡象，這種情況下人體就會易產生一些針對連接用的白蛋白的抗體或一些異常蛋白質，這就會對檢測結果造成影響[5]。因為酶聯免疫吸附試驗，就是通過檢測特異性蛋白抗來作出判斷的，所以對于老年受檢者來說，會由于本身的白蛋白抗體、異常蛋白質，導致檢測結果出現假陽性。

（2）樣本因素。樣本因素同樣是導致假陽性的重要因素，本次研究中11 例假陽性結果是樣本因素引發的。在采用酶聯免疫吸附試驗檢測過程中，如果對樣本沒有實施有效的處理，就有可能使得血液樣本中纖維蛋白為完全析出；而在樣本中遺留下來的纖維蛋白原，會附著在板孔成為薄膜層，或者呈絮狀存在，這樣也會導致檢驗結果呈假陽性。研究表明，因為纖維蛋白原殘留而造成的假陽性，二者之間有密切的正相關性。并且完全有效吸出纖維蛋白原幾乎是不可能實現的，即使提高離心強度，也無法真正實現這一效果。

（3）疾病因素。在造成酶聯免疫吸附試驗檢測假陽性的因素中，疾病也是較為重要的因素。特別是諸如系統性紅斑狼瘡、類風濕關節炎等疾病，會造成致多克隆B 細胞活化，進而在體內分泌出一過性抗磷脂抗體，進而使得酶聯免疫吸附試驗結果表現為陽性。

（4）螺旋體共生因素。在本次研究中，有2 例假陽性是因為螺旋體共生因素所導致的。本次研究中涉及的研究對象有極大的年齡跨度，從1 歲的嬰兒到95 歲的高齡者，所以患者體內難免會存在螺旋體共存的狀況，諸如倡導螺旋體、口腔螺旋體等等；這些螺旋體的存在與檢測抗原發生反應，從而使得結果表現為假陽性。

（5）其他原因。雖然本次研究結果中的假陽性原因分析僅限于上述四大類，但事實上，在檢測過程中還有其他的一些原因，有可能會對結果造成影響，從而表現出假陽性。比如，標本保存問題，采集的血液樣本保存不當受到細菌污染，特別是帶有有內源性辣根過氧化物酶的細菌提，會對酶聯免疫吸附試驗結果造成影響，出現弱的假陽性；比如檢測儀器問題，檢測過程中使用的酶標儀，當其反應板底部有污染后，會造成吸光度值升高，進而使得檢測結果出現假陽性。

所以，在采用酶聯免疫吸附試驗檢測梅毒的過程中，如果出現可疑陽性標本，務必要認真查找干擾因素，并在此抽血復雜，而不能草率作出決定。

3.3 結論

綜上所述，酶聯免疫吸附試驗檢測檢測梅毒抗體會有一定概率出現假陽性結果，所以在臨床上檢驗的過程中要針對造成假陽性的相關敏感因素有充分了解，以有效降低檢測差錯。