基于“味性化味”和網絡藥理學的藏藥三熱散治療慢性胃炎的藥性和作用機制研究＊

東改措，文成當智

（1. 青海省海西州蒙藏醫醫院 德令哈 817000；2. 成都中醫藥大學 民族醫藥學院 成都 611137）

慢性胃炎是由多種致病因素引起的胃腸疾病，是慢性萎縮性胃炎、慢性腸炎、胃潰瘍等的病理基礎。而藏醫認為脾胃疾病是由于飲食和起居等不調而引起三胃火紊亂、培根偏盛所致，是培根加扎（）、培根蘭()、木布病（）以及腫痞()、胃癌()等的前期病因。脾胃病是藏醫的優勢病種，尤其治療慢性胃炎有良好的效果，藏藥三熱散是治療慢性胃炎、消化不良等培根偏盛型疾病的核心藥方和加減方，該方始載于《四部醫典》[1]，是由蓽茇、干姜、胡椒等三種藏藥組成。初步統計，僅在《四部醫典》中，該方記載頻次可達166 次，且主要集中在培根病、消化道疾病、腫瘤、腹水、隆病等，尤其與三胃火紊亂和胃腸道部位等有著密切關系，見圖1。

近年來，隨著網絡藥理學逐漸興起，以中藥學、化學、藥代動力學、藥理學和計算科學等多學科融合網絡藥理學平臺，該平臺以探索中藥方劑的化學物質實體與機體生命活動的交互規律的一種新模式[2]，其中多成分、多靶點、多途徑的研究方法可以引用于多組分、多靶點的藏藥方劑學，探索藏醫方劑配伍的隱形知識、推測藏藥三熱散治療慢性胃炎的作用機制，對藏醫治療慢性胃炎的臨床應用具有參考意義。

1 研究方法

圖1 《四部醫典》中含三熱散方劑的功效網絡

1.1 “味性化味”分析

數據來源 以《四部醫典》為依據，搜集三熱散的組方和劑量，根據《晶珠本草》收集組方藥味，應用本研究前期提出的“味性化味”矢量結構模型

其中以組方矢量（B）、劑量矢量（T）、配伍結構矢量（D）等三種影響方劑藥性的矢量為重點，從三熱散的六味、三化味、十七效、二十種特性、三因、本質功效等層面其藥性。

1.2 網絡藥理學分析

化學成分和來源中醫網絡藥理學的藥材數據庫TCMSP、ETCM 等中檢索藏藥蓽茇、干姜、胡椒，收集所有化學成分，并建立生藏藥三熱散的化學成分數據庫。

疾病靶點收集在網絡藥理學的疾病靶標庫，ETCM Disease 中以“gastritis”作為疾病或癥狀關鍵詞進行檢索，并上HomePage 的疾病靶標信息設定模塊，在中藥靶標預測界面中已建立的藏藥三熱散化學成分庫中的成分進行靶標預測，選取相似性分數大于等于0.6的成分預測靶標作為候選。

GO 功能及KEGG 通路分析候選靶標上傳并導入DAVID 6.8數據庫中進行GO 和KEGG 通路分析，并構建“化合物-基因靶標-通路”網絡。

2 研究結果

2.1 藥性分析

六味和三化味根據《四部醫典》三熱散的組方劑量為等量，其中蓽茇的味辛甘外，干姜和胡椒均味辛，因此該方辛味偏盛，辛味是治療培根性疾病的主要藥味。根據“味性化味”矢量結構模型，分析其六味與三化味比值，六味中以辛味偏盛，三化味中苦化味偏盛，根據藏醫三化味理論，苦化味對培根、赤巴性疾病有治療作用，見表1。

八性和十七效藏醫認為藥物在六味和三化味不同層面有不同的藥性，本研究分析三熱散的六味藥性，八性以輕銳糙熱等突出，十七效中以糙輕熱干等突出，主要對治鈍穩重潤等培根性疾病特性，主治培根病。三化味藥性中涼性突出，十七效以涼稀鈍等突出，對治熱臭銳等赤巴性疾病特性，主治赤巴病，見表2，圖2。

表1 藏藥三熱散的六味與三化味

本質性能藏藥經典《晶珠本草》[4]中對藥物的本質性能細分為氣味性能、生地性能、對治性能、形態性能、顏色性能等八種[5]，并以八種本質性能總結概括地記載了各個藥物的功效。藏藥三熱散的組方蓽茇、干姜、胡椒均有芳香氣味，而且均對培根、隆等寒性疾病有治療作用，見表3。

3 網絡藥理學分析結果

成分收集在ETCM 等網絡藥理學平臺的中藥材數據庫及中藥成分數據庫，檢索三熱散的化學成分，共檢索到蓽茇有蓽茇明堿、蓽茇明寧堿、胡椒堿等17個成分，共預測除126個靶標；干姜有姜油酮、姜烯酚、六氫姜黃素、姜辣二酮、5ξ-羥基-1-（4-羥基-3-甲氧基苯基）-7-（4-羥基苯基）-3-庚酮、內消旋-3,5-二乙酰氧基-1,7-雙-（4-羥基-3-甲氧基苯基）庚烷等38個成分，共預測出1020 個靶標；胡椒有5-羥基-7,3',4'-三甲氧基黃酮、胡椒內酰胺A、3,8(9)-p-薄荷二烯-1-醇等93 個成分，共預測出1320 個靶標。藏藥“三熱散”治療慢性胃炎總共預測出2466個靶標。

核心靶標分析由平臺生成的核心靶標網絡，圖2，藥物預測靶標（紅色節點）、已知疾病靶標（黃的節點）、其他靶標（灰色節點），三者相互作用構成一個整體網絡，其他靶標具有中間連接的作用，網絡藥理節點的Degree 值越高，說明與之相接的節點數目越多，該節點在網絡中越重要。Degree 值較高的KRAS 是已知疾病靶標，即胃炎病相關靶標，其蛋白在調節細胞增生中起重要作用，見圖3。

其中核心靶標B4GALT1 即β-1,4-半乳糖基轉移酶1，有文獻報道該酶在樹突狀細胞粘附、成熟及T 細胞粘附、激活的過程中發揮重要作用[6]，與免疫及炎癥反應密切相關，而且在調控上皮細胞增殖和分化過程中也發揮著重要作用，也是結直腸癌的一個潛在生物標志物[7]，而且。在腫瘤細胞侵襲轉移過程中發揮著重要作用，且與受精過程、神經元遷移、細胞信號轉導、細胞粘附和轉移等生物學功能密切相關[8]。B4GALT2 主要在腦、心臟、肌肉和胰腺中表達，B4GALT4 主要在胎盤、腎臟和胰腺中表達[9]。CDK9即細胞周期依賴性蛋白激酶9，其參與機體炎癥反應、病毒感染、復制，以及腫瘤細胞的抗凋亡促增殖的代謝過程[10]。PRKCD 基因下調，會發生肝脾腫大、淋巴增生、系統性自身免疫疾病，是免疫穩態的守護者[11]。HSP90AA1 基因與細胞神經系統病理學的蛋白質聚集和衰老有關[12]，且與胰腺癌、腫瘤、白血病等有關[13]。

表2 藏藥三熱散的十七效

表3 藏藥三熱散的本質性能

GO 功能分析 藏藥三熱散治療慢性胃炎的主要與三磷酸腺苷結合、信號轉導、酶結合、RNA 聚合酶Ⅱ啟動子轉錄調控、蛋白激酶活性、蛋白質復合物結合、蛋白質磷酸化、蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶活性、谷胱甘肽衍生物生物合成過程、激酶活性、線粒體、刺激性C型凝集素受體等功能有關。見表4。

圖2 藏藥“三熱散”的“味性化味”藥性分析

圖3 藏藥“三熱散”的靶標-疾病基因相互作用網絡圖

表4 藏藥“三熱散”的功能信息條目

表5 藏藥三熱散的通路信息條目

GO 功能分析結果顯示有ATP 結合，而且與信號轉導（signal transduction）Na +和K +泵等信號轉導通路，直接相互作用蛋白作為分子機制和環境[14]。蛋白質磷酸化（protein phosphorylation）可以參與重要酶促反應，是信號傳遞有關的蛋白激酶類主要受控于胞內信使[15]，有助于胃腸道中蛋白激酶之間的信號傳遞和提供能量。絲氨酸/蘇氨酸激酶活性（protein serine/threonine kinase activity）是治療套細胞淋巴瘤的潛在的新的治療靶點[16]，而且該激酶15 結合位點與結腸癌發病及淋巴轉移、血管內皮生長因子的表達、腫瘤血管生長等有關[17]，11位點與調節糖尿病的內毒素血癥，改善炎癥狀態有關[18]，并可抑制消化道癌變和內毒素等引起的代謝紊亂。谷胱甘肽的衍生物（glutathione derivative biosynthetic process）對胃黏膜有預防及保護作用[19]，其基因多態性與胃癌發展相關[20]。線粒體（mitochondrion）內腺苷酸的含量異常是慢性淺表性胃炎形成機理之一[21]，并有研究提出了“脾-線粒體相關”理論，認為線粒體與脾胃有著密切的聯系[22]。另外酪氨酸激酶等蛋白激酶活性與胃粘膜損傷修復有重要意義[23]。可知藏藥“三熱散”治療慢性胃炎可能通過調節質子泵、信號轉導蛋白，從而改善胃腸道對膳食的化學和物理消化，蛋白激酶和線粒體等修復胃黏膜損傷并提供能量，且抑制胃腸道細胞及淋巴細胞的癌變，使該方具有多途徑的提高人體免疫系統、治療慢性胃炎等消化道疾病的作用。

KEGG 通路分析利用網絡藥理學平臺進行靶標通路富集分析，通路富集分析結果主要與內分泌系統、甲狀腺激素、循環系統、蛋白信號轉導、神經營養因子信號轉導、細胞生長與死亡、ErbB 信號、Toll 樣受體信號、乙型肝炎、縫隙連接等通路有關。見表5。

圖4 藏藥三熱散的成分-關鍵藥靶-通路網絡圖

通路富集結果涉及多個方面，如信號轉導、循環系統、內分泌系統、神經營養因子信號、神經調節蛋白激活ErbB 蛋白的受體酪氨酸激酶信號等疾病的相關通路。研究發現，胃腸道器官中存在自分泌或旁分泌的定向神經調節蛋白激活ErbB 蛋白的受體酪氨酸激酶信號（ErbB signaling pathway）通路[24]，且與免疫系統識別病原相關分子的主要受體，調控適應性免疫應答的Toll 樣受體[25]通路有關系。縫隙連接（Gap junction）蛋白43是細胞間隙連接通訊中最重要的間隙連接蛋白，對胃腸道動力的形成和調節起著關鍵作用，胃腸運動功能障礙是消化道疾病的重要臨床表現[26]。因此，可進一步表明該方與胃腸道細胞增殖分化過程、提高消化道免疫調節、加強胃腸道蠕動等作用，對慢性胃炎，尤其是“培根”偏盛而胃腸功能障礙、消化不良、寒性胃炎等有著治療作用。

網絡藥理學平臺生成的中藥-成分-關鍵藥靶-通路網絡，見圖4，將復雜的作用機制以網絡的形式具體表達。中藥-成分-關鍵藥靶-通路網絡分為四層，綠色節點代表藥物，粉色節點代表化學成分，藍色節點代表作用的靶點，紅色節點代表富集得到的通路。

4 總結與討論

慢性胃炎是臨床上常見的疾病，藏醫認為該病與飲食、起居、心理等有關，是長期偏食、暴飲暴食、風寒潮濕等引起三因紊亂所致，從病理上可以分為三個階段，早期是培根過盛，膳食的精華和糟粕不能及時分解、消化，過多的黏液積聚于胃內，逐漸影響胃腸道的微血管，引起胃腸蠕動障礙，導致培根性胃炎。中期是培根性胃炎逐漸影響消化道的功能，精華和糟粕凝結為濁液，引起胃腸道潰瘍，且胃液使消化道生熱，破壞胃腸道表面，導致赤巴性胃炎。晚期是胃腸道無法正常消化膳食，吸收營養，引起隆性胃炎。可知藏醫對慢性胃炎的病理病機由從培根-赤巴-隆等的轉變。藏藥三熱散是治療慢性胃炎的常用藥物，本研究基于藏藥“味性化味”理論分析三熱散的藥性，六味藥性中方主治培根病，三化味藥性中該方主治赤巴病，根據《四部醫典》收載含三熱散方劑功效中主治培根病、不消病、腫痞、腹水等來看，該方藥性主要以六味藥性，主治培根偏盛而隆、赤巴衰弱性疾病，藏醫認為隆主生“輕動”，行于白脈；赤巴主生熱，行于肝膽、血液等；培根主生津，行于脾肺。因此，藏藥三熱散可調節精華和津液過剩、胃火功能減弱、白脈功能減弱等疾病。

從十七效層面看，糙效、輕效、熱效、干效等突出，其中糙效可對治培根的“柔粘”性引起的培根粘液過剩而微管堵塞等病機，影響遍行隆的功能；輕效可對治培根的重性引起的不消腫痞、蠕動減弱等病機，影響下行隆功能；熱效可對治培根的涼性引起的三火減弱、精濁分解不清等病機，影響能化培根、消化赤巴、伴隆火等三胃火功能；干效可對治赤巴的“瀉濕”性引起的腹瀉、慢性胃炎、慢性腸炎等病機，影響能依培根的功能。本質性能分析中均為溫性，主治胃腸疾病。可見三熱散通過對治培根，增強三胃火改善胃腸白脈功能，從而達到溫胃益脾、化濕行隆等效果，對精華過剩、風寒潮濕等外因和三因紊亂、培根偏盛等內因所引起的慢性胃炎、寒性胃腸道具有良好效果。

網絡靶點分析得到藏藥三熱散治療慢性胃炎的物質基礎和分子機制，發現該方與B4GALT1、COX7C、CDK9、PRKCD、B4GALT2、PRKAA2 等關鍵靶點有關聯，在功能靶標中有三磷酸腺苷結合、信號轉導、蛋白激酶活性、蛋白質磷酸化、蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶活性、谷胱甘肽衍生物生物合成過程、線粒體等有關。通路靶標中主要與內分泌系統、循環系統、蛋白信號轉導、神經營養因子信號轉導、縫隙連接等有關。藏藥三熱散可能作用于分泌細胞、神經營養因子信號轉導、線粒體等能量代謝通路和信號轉導通路，調節ATP，修復消化道黏膜，達到治療慢性胃炎的作用。

綜上，藏醫“味性化味”理論分析三熱散主要調節“三胃火”而作用于慢性胃炎，而網絡靶點分析得到該方通過調節胃腸道免疫而起效，啟示藏醫“三胃火”理論與現代免疫功能之間具有潛在的聯系[27]。本研究結合藏藥藥性與網絡藥理學，揭示藏藥三熱散的臨床用藥特點和內在藥性，探索其治療慢性胃炎的機制，為藏醫臨床和藏藥方劑研究提供新的方法與思路。