合并顱內動脈粥樣硬化性狹窄的缺血性腦卒中患者血清中CyPA含量變化及其臨床意義

肖家平 聶德云 唐智敏 胡仁琳

(武漢市第五醫院神經內科，湖北 武漢 430050)

顱內和顱外血管動脈粥樣硬化性狹窄是導致缺血性腦卒中最常見的原因之一〔1，2〕，調查研究結果顯示，顱外動脈粥樣硬化性腦卒中的發生率約占缺血性腦卒中的45%，而新發腦卒中則多數與顱內動脈狹窄有關〔3〕。因此，研究顱內動脈粥樣硬化性狹窄的危險因素具有重要意義。通過對有危險因素的患者進行更深層次的檢查可以早期發現并進行針對性的治療，防止顱內動脈粥樣硬化性腦卒中的發生。本研究通過檢測合并顱內動脈粥樣硬化性狹窄的缺血性腦卒中患者血清中親環蛋白(CyP)A含量變化并分析其臨床意義，為臨床早期診斷提供實驗基礎。

1 材料和方法

1.1研究對象 收集2015年7月至2018年7月在武漢市第五醫院就診的腦卒中患者150例為研究對象，患者均經詳細病史采集及顱彩色多普勒超聲 (TCD)等輔助檢查明確診斷。150例患者中男92例，年齡55～87歲；女58例，年齡58～91歲。納入標準：(1)符合缺血性腦卒中相關的診斷標準; (2) 年齡>45歲; (3) 有完整的臨床資料; (4) 身體健康狀況允許接受CT血管造影檢查。排除標準：(1) 合并急性冠狀動脈綜合征; (2) 合并嚴重的心、肝和腎等臟器功能障礙; (3) 合并惡性腫瘤；(4)合并凝血功能障礙。選取與患者年齡和性別構成相匹配的同期健康體檢者150例作為對照組，男90例，年齡50～85歲；女60例，年齡55～85歲。根據CT血管造影結果將腦卒中患者分為狹窄組102例和非狹窄組48例。其中狹窄組根據管腔狹窄程度分為三組：輕度狹窄(管腔狹窄面積≤25%)40例，中度狹窄(狹窄面積26%～50%)30例，重度狹窄(狹窄面積51%～75%)32例。

1.2酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測CyPA含量 研究對象空腹采集靜脈血，1 h內離心分離血清。離心速度為3 000 r/min，離心10 min。按照ELISA試劑盒說明書步驟進行實驗操作：(1)稀釋標準品(倍比稀釋法)；(2)孔板設置：分別設空白孔(空白孔不加任何樣品及酶標試劑，其余各步驟操作相同)和待測樣品孔；(3)完成加樣后將孔板置于37℃溫育1 h；④配洗液、洗滌5次，每次1 min；⑤加酶標試劑，孔板置于37℃溫育1 h；⑥洗滌5次，每次1 min；⑦加試劑顯色，室溫靜置30 min；⑧加終止液終止；⑨測定：以空白孔調零，用酶標儀在相應波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中CyPA的含量。

1.3血脂指標檢測 采用生化分析儀檢測患者總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)。

1.4統計學分析 采用SPSS19.0軟件進行非配對t檢驗、單因素方差分析、Student-Newman-Keuls檢驗、直線相關檢驗。

2 結 果

2.1健康對照組和缺血性腦卒中患者血清中CyPA含量比較 健康對照組、非狹窄組和狹窄組血清中CyPA的含量分別為(9.92±3.56)ng/ml、(25.93±5.64)ng/ml和(153.67±31.56)ng/ml，三組比較，差異有統計學意義(F=1 808，P<0.01)，組間兩兩比較差異亦有統計學意義(P<0.01)。

2.2合并輕度、中度和重度狹窄缺血性腦卒中患者血清中CyPA含量的比較 輕度、中度和重度狹窄患者血清中CyPA的含量分別為(129.86±22.50)ng/ml、(143.60±28.36)ng/ml和(175.37±23.83)ng/ml，三組比較，差異有統計學意義(F=30.77，P<0.01)。

2.3不同狹窄程度患者TC、TG、LDL-C和HDL-C比較 隨著狹窄程度的加深患者TC、TG、LDL-C水平逐漸升高，HDL-C水平逐漸下降，差異有統計學意義(P<0.001)。見表1。

表1 不同狹窄程度患者TC、TG、LDL和HDL比較

2.4血清CyPA含量與動脈粥樣硬化危險因素的關系分析 血清CyPA的含量與TC、TG和LDL-C含量呈正相關關系(P<0.001)，與HDL-C呈負相關關系(P<0.001)，見圖1。

圖1 血清CyPA含量與動脈粥樣硬化危險因素的關系分析

3 討 論

腦卒中包括缺血性腦卒中和出血性腦卒中，其中缺血性腦卒中的發病率較高，占腦卒中總數的60%～70%〔4，5〕。文獻報道，頸動脈粥樣硬化在缺血性腦卒中的發生發展中起到非常重要的作用，約半數以上的缺血性腦卒中患者伴隨不同程度的頸動脈粥樣硬化性狹窄，而頸動脈粥樣硬化是導致顱內動脈狹窄的最主要原因之一〔6，7〕。早期顱內動脈粥樣硬化性狹窄無明顯癥狀，隨著狹窄程度的增大，突發缺血性腦卒中的風險大大增加，致殘致死率極高。因此，臨床上需要一種可以早期診斷缺血性腦卒中合并顱內動脈粥樣硬化性狹窄的指標。

CyP是一類高度保守和普遍存在的蛋白家族，具有肽脯氨酰順反異構酶活性。人類CyP由16個結構不同的家族成員組成，其中含量最豐富的是CyPA，占所有胞質蛋白的0.1%～0.6%〔8，9〕。雖然CyPA存在于細胞內，但也可由細胞分泌以應對炎癥刺激，如缺氧、感染和氧化應激等〔10〕。在中樞神經系統中，蛛網膜下腔出血、癲癇、外傷性腦損傷等病理條件均可增強大鼠腦組織CyPA的分泌〔11，12〕。文獻報道〔13～15〕，循環中的CyPA濃度對慢性阻塞性肺疾病、冠狀動脈疾病、急性心肌梗死和充血性心力衰竭等疾病均有影響。Kao等〔16〕發現血清CyPA濃度與顱內動脈腫瘤嚴重程度和預后密切相關。因此，CyPA可能是反映急性腦損傷嚴重程度和評估預后的潛在生物標志物。本研究結果提示CyPA濃度可反映急性腦損傷；同時合并顱內動脈粥樣硬化性狹窄患者血清中CyPA含量明顯高于非狹窄組，且其濃度隨著狹窄程度的增加而增加，提示血清CyPA含量與顱內動脈狹窄嚴重程度密切相關，可作為判斷狹窄程度的指標。

高脂血癥是世界公認的導致動脈粥樣硬化和相關心腦血管疾病的主要原因。人類血脂主要由TC、TG、LDL-C、HDL-C，少量磷脂和游離脂肪酸構成，是人體必需不可少的營養物質。但當HDL-C以外的血脂含量過高可導致脂質代謝紊亂引起動脈粥樣硬化，粥樣斑塊可堵塞血管，引起心肌梗死、腦血栓、腦溢血和腦卒中等，嚴重危害人類生命。因此，高血脂是動脈粥樣硬化的主要危險因素〔17〕。本研究結果顯示：血清CyPA的含量與TC、TG和LDL-C含量呈正相關關系，而與HDL-C呈負相關關系，提示血清CyPA含量與血脂含量具有良好的相關性，聯合檢測CyPA可能能夠提供診斷的準確程度。

綜上所述，合并顱內動脈粥樣硬化性狹窄的缺血性腦卒中患者血清中CyPA含量升高，且其含量與動脈狹窄嚴重程度密切相關。檢測缺血性腦卒中患者血清CyPA含量有助于判斷患者是否合并顱內動脈粥樣硬化性狹窄及其嚴重程度，血清CyPA或可作為臨床早期診斷指標，尚需進一步研究。