自發(fā)性早產(chǎn)的高危因素及血清TLR2、MCP-1、TNF-α水平的預(yù)測(cè)價(jià)值

于哲 張洛英 潘大歡 王靜

自發(fā)性早產(chǎn)屬于圍生期較為常見(jiàn)的妊娠并發(fā)癥，新生兒出生死亡率高達(dá)15%，是圍生兒死亡的首要原因，而存活新生兒也有一部分存在智力發(fā)育障礙或者神經(jīng)系統(tǒng)等嚴(yán)重后遺癥［1，2］。明確早產(chǎn)的高危因素，盡早采取有效措施，對(duì)降低早產(chǎn)發(fā)生率以及圍生兒死亡率至關(guān)重要。報(bào)道顯示，感染所導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)是早產(chǎn)發(fā)生的病因之一［3］。Toll 樣受體2（toll-like receptor 2，TLR2）［4］、單核細(xì)胞趨化蛋白1（monocyte chemotactic protein 1，MCP-1）［5］、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）［6］等細(xì)胞因子均在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮作用，從而引起子宮收縮，促進(jìn)早產(chǎn)發(fā)生。本研究旨在探討自發(fā)性早產(chǎn)的高危因素，并分析血清炎癥因子TLR2、MCP-1、TNF-α 水平對(duì)早產(chǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年11月至2018年11月于本院產(chǎn)檢并分娩的婦女138 例作為研究對(duì)象，年齡20～46歲，平均（29.87±5.68）歲，隨訪至孕婦分娩孕周，孕28～36+6周自發(fā)性早產(chǎn)分娩者納入研究組（n=42），孕37 周足月分娩者納入對(duì)照組（n=96）。全部入組對(duì)象知情同意，本研究通過(guò)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合早產(chǎn)診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］；孕20～24周；單胎妊娠；年齡18～35 歲；超聲診斷無(wú)胎兒生長(zhǎng)受限跡象。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除雙胎妊娠；合并由于早產(chǎn)前胎膜早破、前置胎盤(pán)或?qū)m內(nèi)窘迫等妊娠合并癥治療性引產(chǎn)者；既往早產(chǎn)史者；有消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)以及泌尿生殖系統(tǒng)等感染患者；既往吸煙、酗酒等不良嗜好者；由于胎兒異常或者畸形引產(chǎn)者；治療性早產(chǎn)、晚期流產(chǎn)或失訪者。

1.2 方法

于孕20～24 周時(shí)分別抽取入組孕婦靜脈血，離心并置于4℃條件下保存?zhèn)溆茫逖装Y因子TLR2、MCP-1、TNF-α 水平采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）進(jìn)行檢測(cè)，嚴(yán)格按照TLR2 ELISA 試劑盒（購(gòu)買(mǎi)自上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司）和MCP-1、TNF-α ELISA 試劑盒（購(gòu)買(mǎi)自上海澤葉生物科技有限公司）操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

1.3 觀察指標(biāo)

①比較研究組和對(duì)照組孕婦血清炎癥因子TLR2、MCP-1、TNF-α 水平。②繪制受試者工作特征曲線（ROC），計(jì)算血清炎癥因子TLR2、MCP-1、TNF-α 水平預(yù)測(cè)自發(fā)性早產(chǎn)的靈敏度和特異度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以（）形式描述，數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，兩組均值比較采用獨(dú)立t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以n（%），采用卡方檢驗(yàn)；有顯著差異的單因素進(jìn)行多因素logistic回歸分析；制作ROC 曲線并計(jì)算曲線下面積（AUC）以及最佳截?cái)嘀担琍＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組和對(duì)照組一般情況比較

兩組孕產(chǎn)婦早產(chǎn)史、生殖系統(tǒng)感染、妊娠期高血壓、TLR2、MCP-1、TNF-α 水平等方面比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），年齡、體質(zhì)量指數(shù)、孕次、產(chǎn)次、妊娠期糖尿病等方面比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組一般情況比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general situation between 2 groups［n（%），（±s）］

表1 兩組一般情況比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general situation between 2 groups［n（%），（±s）］

因素年齡（歲）體質(zhì)量指數(shù)（kg/m2）孕次（次）產(chǎn)次（次）早產(chǎn)史生殖系統(tǒng)感染妊娠期高血壓妊娠期糖尿病TLR2（ng/mL）MCP-1（pg/mL）TNF-α（pg/mL）研究組（n=42）30.15±5.82 21.98±2.36 0.98±0.39 1.46±0.28 5(11.90)12(28.57)14(33.33)2(4.76)3.85±0.66 403.62±79.54 13.27±2.21對(duì)照組（n=96）29.44±5.39 21.81±2.32 0.86±0.34 1.55±0.31 1(1.04)7(7.29)9(9.38)4(4.17)2.41±0.57 281.79±51.68 7.95±1.74 t/χ2值0.695 0.394 1.823 1.615 5.884 11.144 12.075 0.025 13.004 10.721 15.183 P 值0.488 0.694 0.071 0.109 0.015 0.001 0.001 0.875＜0.001＜0.001＜0.001

2.2 影響早產(chǎn)的多因素logistic 回歸分析

以是否發(fā)生自發(fā)性早產(chǎn)為因變量，以早產(chǎn)史、生殖系統(tǒng)感染、妊娠期高血壓、TLR2、MCP-1、TNF-α 為自變量，進(jìn)行多因素logistic 回歸分析結(jié)果顯示，生殖系統(tǒng)感染、妊娠期高血壓、TLR2、MCP-1、TNF-α 水平是影響自發(fā)性早產(chǎn)發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 影響早產(chǎn)的多因素logistic 回歸分析Table 2 Multivariate logistic regression analysis of preterm birth

2.3 血清炎癥因子TLR2、MCP-1、TNF-α 水平對(duì)自發(fā)性早產(chǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值

繪制ROC 曲線分析結(jié)果顯示，TLR2+MCP-1+TNF-α 三者聯(lián)合診斷的預(yù)測(cè)值優(yōu)于單測(cè)TLR2、MCP-1、TNF-α 預(yù)測(cè)自發(fā)性早產(chǎn)發(fā)生的預(yù)測(cè)值及TLR2+MCP-1 診斷、TLR2+TNF-α 診斷、MCP-1+TNF-α 診斷的預(yù)測(cè)值。見(jiàn)圖1，表3。

表3 血清炎癥因子TLR2、MCP-1、TNF-α 水平對(duì)自發(fā)性早產(chǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值Table 3 Predictive value of serum inflammatory factors TLR2，MCP-1 and TNF-α on spontaneous preterm delivery

3 討論

自發(fā)性早產(chǎn)對(duì)早產(chǎn)新生兒總體發(fā)病率影響較大，并與腦癱、癲癇、發(fā)育遲緩以及早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變等長(zhǎng)期發(fā)病率有關(guān)，大約有50%的早產(chǎn)病例與微生物侵入羊膜腔有關(guān)，進(jìn)而出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，最終影響早產(chǎn)發(fā)病率［8，9］。盡管?chē)卺t(yī)學(xué)取得了不錯(cuò)的進(jìn)展，且對(duì)于自發(fā)性早產(chǎn)有關(guān)的危險(xiǎn)因素和潛在機(jī)制的了解日益增加，使得早產(chǎn)發(fā)病率仍然處于較高水平［10］。因此，篩選影響自發(fā)性早產(chǎn)發(fā)生的高危因素，尋找診斷早產(chǎn)的高效生物標(biāo)志物，減少炎癥相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生率，以降低圍產(chǎn)期發(fā)病率具有重要意義。

Toll 樣受體（toll-like receptor，TLR）作為一類可識(shí)別病原菌的蛋白質(zhì)受體，能夠發(fā)揮促炎作用以及在絨毛膜羊膜炎、未足月胎盤(pán)早破等病理變化中發(fā)揮作用［11］。TLR2 屬于一種活性很高的Toll 樣受體因子，主要在革蘭氏陽(yáng)性菌中激活細(xì)胞，在巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞以及中性粒細(xì)胞中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，可通過(guò)相關(guān)信號(hào)途徑激活炎性反應(yīng)，誘導(dǎo)環(huán)氧合酶-2以及前列腺素E2 合成，從而導(dǎo)致子宮收縮，誘發(fā)早產(chǎn)［12］。研究表明，外周血可溶性CD14 可促進(jìn)肽聚糖TLR2 結(jié)合，從而促進(jìn)肽聚糖激活核轉(zhuǎn)錄因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑［13］。Walsh 等［14］報(bào)道顯示，TLR2 在早產(chǎn)特別是合并妊娠絨毛膜羊膜炎中表達(dá)明顯上調(diào)，其可能通過(guò)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡促進(jìn)早產(chǎn)。研究表明，白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子以及γ-干擾素等可誘導(dǎo)MCP-1 生成，從而增加單核-巨噬細(xì)胞活性，繼續(xù)分泌白細(xì)胞介素等細(xì)胞因子，最終導(dǎo)致早產(chǎn)、流產(chǎn)發(fā)生［15］。周靜等［16］報(bào)道表明，感染性早產(chǎn)產(chǎn)婦血清MCP-1、sTNFR-Ⅰ、HMGB1 以及TNF-α 表達(dá)明顯上調(diào)，上述指標(biāo)可以作為預(yù)測(cè)感染性早產(chǎn)的生物標(biāo)志物。本研究發(fā)現(xiàn)，TLR2+MCP-1+TNF-α 三者聯(lián)合診斷的優(yōu)于各指標(biāo)單獨(dú)診斷以及不同組合間診斷，表明TLR2、MCP-1、TNF-α 對(duì)自發(fā)性早產(chǎn)發(fā)生具有良好的預(yù)測(cè)價(jià)值，各指標(biāo)聯(lián)合診斷可降低誤診率。但本研究樣本量受限，只能得到初步的結(jié)論，今后將需要增加樣本例數(shù)，增加納入指標(biāo)，為自發(fā)性早產(chǎn)的預(yù)測(cè)提供更加全面的證據(jù)。

綜上所述，自發(fā)性早產(chǎn)發(fā)生與孕產(chǎn)婦孕次、早產(chǎn)史、生殖系統(tǒng)感染、妊娠期高血壓以及血清炎癥因子TLR2、MCP-1、TNF-α 水平等多種因素有關(guān)，監(jiān)測(cè)血清炎癥因子TLR2、MCP-1、TNF-α 水平對(duì)預(yù)測(cè)自發(fā)性早產(chǎn)的發(fā)生，以及盡早采取積極預(yù)防措施具有臨床指導(dǎo)意義。