漁用中草藥的研究進展(上)

王雅麗 王語同 吳叢迪 胡 鯤

(上海海洋大學國家水生動物病原庫，上海海洋大學水產科學國家級實驗教學示范中心，農業農村部淡水水產種質資源重點實驗室，上海 201306)

中草藥是中國傳統醫學的瑰寶，除了被用于水產養殖過程中，還常常作為飼料添加劑，在增加魚類食欲、促進新陳代謝、加速蛋白質的合成、增加酶活性、提高免疫力、增加抗病性等方面發揮著重要作用(朱淼等，2020)。雖然中草藥具有很多優勢，但其化學成分復雜且生物活性不穩定，還需要進一步研究來揭示其有效成分和功能機制。本文介紹了中草藥的有效成分并對其作為水產養殖用藥和飼料添加劑的研究進行綜述。

一、中草藥的有效成分

目前在獸藥范圍內的中草藥種類達到1000多種，其種類繁多且化學成分復雜多樣，因此很難對中草藥的有效成分進行分析鑒定(朱淼等，2020)。隨著氣相色譜、高效液相色譜、紫外分光光度法等分析技術的發展，人們對越來越多的中草藥進行詳細研究，并確定其有效成分。中草藥的有效成分主要包括多糖、甙類、生物堿、有機酸、揮發油，此外還有起到營養作用的脂類、糖類、蛋白質、氨基酸、維生素、常量元素和微量元素以及未知促生長活性物質。對于目前常見的漁用中草藥及其主要有效成分統計見表1。

二、中草藥作為水產養殖用藥

天然中草藥毒副作用小且成本低廉，具有廣譜抗菌、抗病毒、抗寄生蟲作用。我國中草藥品種繁多，目前已知具有免疫活性的中草藥有200多種，具有抗菌作用的中草藥有130多種，有抑殺病毒作用的中草藥有50多種，能夠抑菌、殺菌的中草藥有400多種(胡建平，2017)。

1.中草藥作為抗病毒藥物

中草藥對于病毒的抑殺作用主要是通過其免疫活性物質直接抑制、殺死體內病毒，阻斷病毒的生物吸附、復制、增殖等過程，從而達到抗病毒感染的目的。Wang等(2015)研究發現，綠茶提取物兒茶素(epigallocatechin gallate，EGCG)能夠阻斷抑制草魚呼腸孤病毒與細胞的黏連作用，從而抑制病毒的復制，達到抑制草魚呼腸孤病毒感染草魚腎細胞的效果。另一項研究表明，1.0毫克/千克EGCG可以通過阻斷WSSV晚期基因的表達，顯著提高擬穴青蟹的免疫能力和存活率(Wang et al，2018)。EGCG的轉化物(epicatechin gallate，ECG)也具有很好的抗GCRV和增強免疫的作用(Zhang et al，2020)。此外，板藍根、射干、穿心蓮、野菊花均具有抗病毒吸附和復制作用，連翹、柴胡、麻黃、貫眾能夠直接滅活病毒(王國霞，2005)。

表1 常見水產用中草藥及主要有效成分

除了直接抑制作用外，中草藥還能通過增強提高網狀內皮系統的吞噬功能，增強機體細胞免疫，或通過誘生干擾素，從而增強機體的特異性和非特異性免疫反應以達到抗病毒的作用。Chen等(2017)通過細胞試驗發現：(2.51±0.51)毫克/毫升厚樸酚及(3.18±0.61)毫克/毫升和厚樸酚能有效抑制GCRV感染的草魚腎細胞。其中，厚樸酚顯著提高細胞中干擾素(IFN)調節因子和白細胞介素(IL-1β)的表達，和厚樸酚促進了IL-1β、腫瘤壞死因子α(TNFα)和NF-κB的表達。Haetrakul T.等(2018)發現在錦鯉感染錦鯉皰疹病毒(koi herpesvirus，KHV)前后注射0.99毫克/毫升的山核桃粗提取物均有顯著的抗病毒作用。Wang等(2018)以日本對蝦為實驗模型，用白斑綜合征病毒(WSSV)對其進行攻擊，兒茶素(EGCG)使得機體中MID、肌球蛋白、p53、TNF-a等免疫相關基因的表達顯著增強，提高蝦的免疫水平。Aiyakani Y.等(2012)用對蝦白斑綜合征病毒(WSSV)感染斑節對蝦，同時將苦參、生姜、南非醉茄等提取物作為免疫增強劑喂食，5天后對照組的蝦全部死亡，而投喂中草藥添加劑飼料組在5天、30天、60天的成活率分別為30%、50%和60%。彭軍輝等(2018)研究得出20～40毫克/升的番石榴水提取物可以顯著增強攜帶蟹呼腸孤病毒(MCRV)擬穴青蟹的成活率。由此可見中草藥對于魚類、蝦類、蟹類水產品病毒感染性疾病具有很好的治療作用。

2.中草藥作為抗菌藥物

中草藥通過其活性成分直接作用于病原菌，影響或破壞其生長、繁殖和代謝過程，從而達到殺菌、抗菌的目的。

(1)增強機體器官與組織抗菌功能。用1.0%韓國槲寄生提取物混合飼料喂養日本鰻鱺14天后，用嗜水氣單胞菌感染存活率達到80%(對照組為26.6%)，同時魚體的免疫指標提高(Choi et al，2008)。Kakoolaki等(2016)發現200毫克/千克綠茶提取物能顯著增強鯔魚的免疫反應，提高溶菌酶活性，進而使其對美人魚發光桿菌的抗菌能力增強。TANG等(2014)用不同劑量的黃芪、當歸、山楂、甘草根和金銀花組成的中草藥混合飼料喂養尼羅羅非魚4周后，對其進行嗜水氣單胞菌感染實驗，結果顯示，和對照組相比實驗組的死亡率明顯降低，說明該中草藥復方制劑能有效增強魚體的抗菌能力。

(2)直接作用于細菌的結構和代謝過程。賈春紅(2013)研究證明了中草藥復合配方(由桉葉、猴耳環和蘇木組成)通過破壞細菌細胞壁和細胞膜的完整性，導致其細胞膜通透性增加，從而對哈維氏弧菌、創傷弧菌和副溶血弧菌產生抑制作用。張冬星等(2016)研究表明高濃度五倍子、紅花及黃連水煎液能抑制維氏氣單胞菌TH0426株生物膜的形成，具有抗AV TH0426株生物膜的作用。

中草藥能有效地抑殺弧菌屬、氣單胞菌屬、愛德華氏菌、假單胞菌屬、鏈球菌等水產常見的致病菌。Md.Abdul Hannan等(2019)篩選出21種對溶藻弧菌生長有強烈抑制作用的中草藥提取物。在活體條件下，以10毫克/克飼料為劑量，用乙酸乙酯提取物成功地控制了對蝦弧菌病。王玉娥等(2008)研究表明五倍子和黃連對5種海洋致病弧菌(溶藻弧菌、哈氏弧菌、副溶血弧菌、河流弧菌、麥氏弧菌)的抑殺作用最強。另一項研究表明，五倍子和石榴皮對溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、創傷弧菌也具有很好的抑菌效果(林炎權等，2019)。朱成科等(2018)研究發現五倍子、石榴皮、地榆和烏梅對維氏氣單胞菌的抑菌效果最好。其中，五倍子的抑菌作用和殺菌作用最強，地榆次之。Tang等(2014)對羅非魚的研究表明，黃芪、當歸、山楂、甘草根和金銀花能顯著降低嗜水氣單胞菌感染導致的死亡率。王瑋等(2018)研究表明，大黃對愛德華氏菌的抑菌效果最好，其次是黃柏、黃連，黃芪并未表現出抑菌效果。此外，五倍子、石榴訶子、黃芩對愛德華氏菌也具有明顯的抑菌效果(杜迎春等，2017；馬玉和等，2014)。夏與晴等(2019)研究25種中草藥及其聯合用藥配伍對5種水產養殖常見致病菌的抑菌作用，結果表明，烏梅＋石榴皮組合對嗜水氣單胞菌、副溶血弧菌具有最佳抑菌作用，烏梅＋白頭翁、石榴皮＋白頭翁組合對蠟樣芽孢桿菌、熒光假單胞菌、弗氏檸檬酸桿菌具有最佳抑菌作用。姚麗等(2020)通過水煎煮法提取30種中草藥對鱘魚源海豚鏈球菌進行體外抑菌試驗，證明黃連、黃芩、連翹、丁香和秦皮都具有很好的抑菌、殺菌功效，其中黃連功效最佳。另一項研究表明，秦皮對金黃色葡萄球菌也有明顯的抑制作用(翁遠超等，2014)。