超聲異常胎兒產前遺傳學分析

師園園 劉學軍 劉慈

摘要：目的 ?通過515例超聲示胎兒異常產前遺傳學分析，探討妊娠期胎兒不同種類的結構畸形及其與染色體異常的關系，為臨床提供更有價值的遺傳咨詢。方法 ?收集2017年1月～2019年4月因超聲提示胎兒異常于我院行胎兒染色體產前診斷的515例孕婦的臨床資料，均進行染色體核型分析和染色體拷貝數變異檢測，統計各類胎兒異常情況及其在超聲異常項目中的核型異常數、拷貝數變異數、染色體異常率。結果 ?515例胎兒超聲軟指標異常362例，占70.29%，其中鼻骨缺失或發育不良染色體異常率最高，占20.93%。胎兒超聲結構異常153例，占29.71%，其中胎兒多發畸形染色體異常率最高，占50.00%，其次為心臟畸形，異常率為18.82%。胎兒染色體核型異常42例，檢出率8.16%，其中數目異常32例，結構異常10例。染色體拷貝數變異57例，檢出率11.07%。結論 ?妊娠期超聲提示胎兒各類畸形及胎兒染色體異常率存在較大差異，分布無規律，在孕婦咨詢胎兒染色體異常風險率時，需要綜合考慮超聲所示胎兒結構畸形及軟指標的種類和數量，以提供更有價值的遺傳咨詢。

關鍵詞：超聲;胎兒異常;染色體;拷貝數變異

中圖分類號：R714.5;R445 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.11.052

文章編號：1006-1959（2020）11-0161-02

Abstract：Objective ?To study the abnormal prenatal genetic analysis of fetal abnormalities in 515 cases to explore the different types of structural abnormalities of fetuses during pregnancy and their relationship with chromosomal abnormalities， so as to provide more valuable genetic counseling for clinic.Methods ?Collecting clinical data of 515 pregnant women who underwent prenatal diagnosis of fetal chromosomes in our hospital due to ultrasound suggesting fetal abnormalities from January 2017 to April 2019， all got the chromosome karyotype analysis and chromosome copy number variation detection， statistics of various fetal abnormalities and their karyotype abnormalities， copy number variations， and chromosome abnormality rates in ultrasound abnormalities.Results ?Of the 515 cases of fetal ultrasound soft index abnormalities， 362 cases accounted for 70.29%， of which nasal bone loss or dysplasia had the highest rate of chromosome abnormalities， accounting for 20.93%. There were 153 fetal ultrasound structural abnormalities， accounting for 29.71%， of which the fetal multiple malformations had the highest chromosomal abnormality rate， accounting for 50.00%， followed by cardiac malformation， with an abnormal rate of 18.82%. There were 42 cases of fetal karyotype abnormalities， with a detection rate of 8.16%， including 32 cases with abnormalities and 10 cases with abnormal structures. There were 57 cases with chromosomal copy number variation， and the detection rate was 11.07%.Conclusion ?Ultrasound during pregnancy indicates that there are large differences in the rate of fetal malformations and fetal chromosomal abnormalities， and the distribution is irregular. When pregnant women consult the risk rate of fetal chromosomal abnormalities， it is necessary to comprehensively consider the type and number of fetal structural abnormalities and soft indicators shown by ultrasound to provide more valuable genetic counseling.

Key words：Ultrasound;Fetal abnormality;Chromosome;Copy number variation

隨著科學技術的快速發展，超聲檢查的應用越來越廣泛，其可以檢測出不同胎兒異常，包括結構異常和微小異常，后者也被稱為超聲軟指標[1，2]。胎兒超聲軟指標包括胎兒頸后透明帶（NT）、頸后皮褶厚度（NF）、鼻骨缺失或鼻骨發育不良、側腦室增寬、后顱窩增寬、心內強回聲、腸管強回聲、腎盂增寬、單臍動脈、長骨短、脈絡叢囊腫等。胎兒超聲異常中部分是由于染色體核型或基因組拷貝數變異（copy number variations，CNV）造成的[3]，需進行胎兒染色體產前診斷，其作為有創性診斷，導致的流產率可達0.5%～1%[4]。孕婦及家屬更傾向于非侵入性檢查，而超聲具有及時、迅速、直觀、無創等特點，當超聲提示胎兒不同異常時胎兒染色體異常率不同。本研究結合2017年1月～2019年4月我院515例因超聲示胎兒異常而行產前診斷孕婦的臨床資料，探討妊娠期胎兒不同種類的結構畸形及其與染色體異常的關系，為臨床提供更有價值的遺傳咨詢

1對象與方法

1.1研究對象 ?收集2017年1月～2019年4月河北醫科大學第二醫院515例因超聲提示胎兒異常行胎兒染色體產前診斷孕婦的臨床資料，孕婦年齡20～43歲，平均年齡30歲;孕周19～28周，平均孕周24周。所有孕婦均在知情同意的前提下行超聲引導下羊膜腔穿刺術，進行染色體核型分析和染色體拷貝數變異檢測。

1.2方法

1.2.1羊膜腔穿刺術 ?所有孕婦均在超聲引導下經腹壁抽取羊水30 ml（20 ml用于羊水細胞培養檢測胎兒染色體核型，10 ml用于高通量測序檢測胎兒染色體拷貝數變異）。

1.2.2胎兒染色體核型檢測 ?抽取的20 ml羊水分裝到2個培養瓶中，在37 ℃培養箱培養7～9 d，制片，染片，上機。每例計數30個分裂相，分析5個分裂相。

1.2.3胎兒染色體拷貝數變異檢測 ?首先用10 ml羊水提取全基因組DNA，基因組DNA濃度>10 ng/Ul。然后構建測序文庫，純化文庫DNA濃度不低于25 nM/Ul，然后進行測序檢測，最后通過生物信息分析軟件分析所測數據，檢測出染色體拷貝數變異。

1.3觀察指標 ?胎兒超聲異常中分為2大類，胎兒超聲軟指標異常：NT、NF、鼻骨缺失或發育不良、其它超聲軟指標;胎兒超聲結構異常：心臟結構畸形、神經系統結構畸形、消化系統結構畸形、泌尿系統結構畸形、呼吸系統結構畸形、骨骼結構畸形、唇腭裂、胎兒水腫、多發畸形。統計各種超聲異常的病例數，及在各種超聲異常項目中核型異常數，拷貝數變異數及染色體異常率。

1.4統計學方法 ?將數據錄入Excel中進行分析，計數資料以（n）進行描述。

2結果

2.1胎兒超聲異常情況 ?515例胎兒超聲異常中，胎兒超聲軟指標異常362例，占70.29%。胎兒超聲結構異常153例，占29.71%。

2.2胎兒遺傳學結果 ?發現胎兒染色體核型異常42例，檢出率為8.16%，其中數目異常32例，結構異常10例。染色體拷貝數變異檢測出57例，檢出率為11.07%。超聲軟指標中鼻骨缺失或發育不良染色體異常率最高，占20.93%。胎兒結構異常中，胎兒多發畸形染色體的異常率最高，占50%，其次為心臟畸形，占18.82%，見表1。

3討論

染色體是基因的載體，胎兒染色體異常，可影響胎兒的發育，引起胎兒結構的異常及不同程度的智力低下。確診染色體病的“金標準”是羊水培養染色體核型分析，但染色體核型分析具有培養周期長，不能檢出<5 Mb的染色體片段結構異常的缺陷[5]。基于高通量測序技術的拷貝數變異（CNV）檢測很大程度上彌補了這一缺陷，但胎兒染色體產前診斷可能會導致流產[4]。超聲檢查是一種無創、安全的檢查方法，可重復性操作，成為篩查胎兒畸形的首要檢測方法。本研究中515例超聲示胎兒異常中，檢出胎兒染色體核型異常42例，檢出率8.16%，而檢出染色體拷貝數變異57例，檢出率為11.07%，較單純羊水培養檢出染色體異常率增加了2.91%。有文獻報道[6]，在超聲結構異常而核型分析正常時，6%的病例可被檢出致病性拷貝數變異。因此在孕婦及其家屬同意的條件下，因超聲示胎兒異常行羊穿時盡量檢測胎兒染色體核型和拷貝數變異兩項，以減少染色體異常兒的出生，但如果檢出不明意義的拷貝數變異，也會給臨床咨詢帶來困擾和挑戰。

超聲軟指標是指胎兒微小的一過性、非結構改變性異常，可作為判斷胎兒是否出現染色體異常的一項危險因素[7]。研究表明[8]，NT增厚、鼻骨缺失與染色體疾病尤其是21-三體綜合征密切相關。21三體綜合征在臨床上表現為特殊面容、眼裂小、眼距寬、伸舌、鼻梁低平，由英國醫生LangdonDown首次提出，故也稱為Down 綜合征，是導致胎兒智力低下最常見染色體異常之一。本研究超聲軟指標中鼻骨缺失或發育不良染色體異常率最高，占20.93%;且胎兒NT染色體異常率為12.35%，胎兒NF染色體異常率為13.33%，而其它超聲軟指標染色體異常率為3.93%。因此，聯合胎兒鼻骨、NT、NF超聲檢測，當任一項異常時，行產前診斷可以很大程度上減少染色體異常胎兒的出生，提高人口出生質量。

另外，本研究胎兒結構異常中，胎兒多發畸形染色體的異常率最高，占50.00%，其次為心臟畸形，占18.82%;而泌尿系統、骨骼系統、呼吸系統、唇腭裂染色體異常率最低，為0。在心血管畸形中，胎兒染色體異常既有染色體非整倍體異常，又有染色體重排，而在染色體重排中又以DiGeorge綜合征（22q11缺失）最為常見。DiGeorge綜合征是最常見的染色體微缺失綜合征，常規的染色體核型分析難以檢測，而基于高通量測序技術的拷貝數變異檢測則可以檢測。本文中泌尿系統，骨骼系統，呼吸系統，唇腭裂超聲結構異常胎兒未檢出異常染色體，可能由于標本量較少，也可能由于這些超聲結構異常胎兒染色體異常率較低。不同種類的結構畸形，胎兒染色體的異常率不同，且多發畸形染色體異常率高于單發畸形。對于胎兒心臟畸形和多發畸形應高度重視，以免漏診異常胎兒，給家庭和社會造成負擔。在孕婦咨詢胎兒染色體異常風險率時，需要考慮超聲所示胎兒異常的結構畸形及軟指標，盡早發現染色體異常胎兒，提高人口出生質量。

綜上所述，妊娠期超聲提示胎兒各類畸形及胎兒染色體異常率存在較大差異，分布無規律，在孕婦咨詢胎兒染色體異常風險率時，需要綜合考慮超聲所示胎兒結構畸形及軟指標的種類和數量，以提供更有價值的遺傳咨詢。

參考文獻：

[1]Benn P，Borrell A，Chiu RW，et al.Position statement from the Chromosome Abnormality Screening Committee on behalf of the Board of the International Society for Prenatal Diagnosis[J].Prenat Diagn，2015，35（8）：725-734.

[2]李載紅，洪燕，覃伶伶，等.超聲檢查頸項透明層增厚在胎兒染色體異常診斷中的應用價值[J].實用醫學雜志，2016，32（3）：402-405.

[3]朱繼紅.產前超聲軟指標檢查與母體血清學聯合檢測篩查胎兒染色體異常[J].中國臨床醫學影像雜志，2016，27（1）：38-41.

[4]許碧秋，汪莎，萬俐，等.孕早中期超聲軟指標在產前染色體篩查中的價值[J].中國婦幼健康研究，2017，28（5）：587-589.

[5]呂時銘.產前診斷實驗技術的臨床選擇[J].中華檢驗醫學雜志，2015，38（8）：505-507.

[6]Mottola AT，Kuller JA.What′s new in prenatal genetics？Areview of current recommendations and guidelines[J].Obstet GynecolSurv，2017，72（10）：610-617.

[7]孫玲玲，鄧學東，姜緯，等.中孕期超聲軟指標在胎兒染色體篩查中的價值[J].中國醫學影像技術，2016，32（5）：765-768.

[8]郭曉玲，鐘進，鄧璐莎，等.胎兒超聲軟指標在診斷染色體異常中的應用價值[J].廣東醫學，2018，39（10）：1513-1517.

收稿日期：2020-02-20;修回日期：2020-03-12

編輯/成森