PCR技術及其在食品微生物檢測中的應用

胡弘宇 馬慧麗

摘 要：現階段，致病微生物的數量越來越多，且這類微生物的存在范圍也比較廣泛，怎樣在較短的時間內檢測出致病微生物已經成為目前我國食品行業的首要研究課題。PCR技術是一類新型的微生物檢測技術，該項技術可以在較短的時間內檢測出食品當中的各類致病微生物。本文主要對PCR技術及其在食品微生物檢測中的應用進行探究，分析該技術的發展形勢以及使用要點，進一步提升我國食品的安全性，切實保障人們的身體健康。

關鍵詞：PCR技術;食品安全檢測;致病病原體

Abstract：At present， the number of pathogenic microorganisms in the natural environment in China is increasing， and the range of such microorganisms is also relatively wide， how to detect pathogenic microorganisms in a short time has become the development of Chinas food industry the primary research topic. PCR technology is a new type of microbial detection technology in China， which can be used to identify all kinds of pathogenic microorganisms in food in a short time. This paper mainly explores the PCR technology and its application in the detection of food microorganisms， analyzes the development situation of the technology and the key points of its use， and further improves the food safety in China and practically guarantees the health status of people.

Key words：PCR; Food safety testing; Pathogenic agent

我國以往的食品微生物檢測方式通常都是培養可能的病原體，再對這些病原體進行檢測，該種檢測方式所耗用的資金量比較大，整體的成本費用比較高，并且檢測速度慢，工作效率低下，不能達到現階段我國食品安全檢測要求標準。PCR技術進行了改良及處理，改良后的檢測方式可以更精確地檢測出食品中的各類病原體，該技術的快捷性及靈活度比較高，已經廣泛投入到我國的食品微生物檢測中。隨著人們生活水平的提升，人們的安全意識開始不斷增強，這給我國食品安全檢驗工作的開展帶來了挑戰，需要合理的借助PCR技術，完善食品微生物檢測工作內容[1]。

1 PCR技術在食品微生物檢測中的優勢

我國傳統的檢測方式主要是培養致病菌，培養致病菌所損耗的時間比較長，前期培養過程需要耗費大量的人力物力資源，整體操作過程較為繁瑣，并且各類微生物實際生長所需要的pH值以及溫度等數值都有所差異。在培養過程中，耗用的培養時間比較長，要對其細胞特征以及格蘭氏染色狀況進行更為細致的觀察及分析，鑒定各類生物的特性，分辨出各類微生物，該項工作的難度比較高，尤其是對于弱勢菌種來說，其檢測難度更是比較大[2]。

PCR技術便捷性比較強，PCR技術所使用的設備數量比較少，操作更加簡便，總檢測過程更加便捷。PCR技術可以在較短的時間內得到檢測結果，該項技術準確性比較高，食品安全當中的微生物類別會比較繁雜，若使用同一種檢測方式，是不能較為精確的檢測出各類的微生物，但是使用PCR技術就可以規避其上述問題的風險，同時還可以使得食品微生物檢測的準確度得到明顯性的提升[3]。

2 PCR技術在食品微生物檢測中的應用

對各類食品微生物檢測的條件以及PCR技術的使用需求等進行分析，使用和其相對應的檢測技術，分析各類PCR技術的使用優劣勢。

2.1 常規PCR技術的應用

常規PCR技術是較為基礎的一類檢測技術，該技術的便捷性以及準確性等比較強，所以將該技術應用到食品安全微生物檢測中的優勢也比較強。如在檢驗單核細胞增多癥李氏桿菌的過程中，傳統的檢測方式無法較好地進行行檢測。并且簡單的分離技術不能對單核細胞增多癥進行精確檢測，但是PCR技術可以高效分離李氏桿菌，并且所損耗的時間也比較短。一般情況下，其檢測僅需12 h即可完成，就能精確判斷出該食品藥品中是否存在李氏桿菌.另外，其所需要使用的樣本數量也比較少[4]。

2.2 多重PCR技術的應用

多重PCR技術主要是借助PCR技術中不同類別互補的原理，以DNA增長速度差異為基準，分析熒光反射數值差異。多重PCR技術的分離速度比較快，且工作果也比較高，但是也存在一定的缺陷，不斷地完善技術，提高檢測水平才可以將其效用更好地發揮出來，防止其出現誤測等的問題[5]。

2.3 RT-PCR技術的應用

提取微生物當中的RNA，用RNA當做模板得到cDNA，利用PCR技術對其進行擴增。RT-PCR技術的檢驗效率較高，且靈活度也比較高。可以精確識別并辨別出食品中的各類微生物。除此之外，該項技術還可以分辨出生物特征，突破了生物檢測的有限度，避免檢測不到位等問題，切實保證檢測結果以及工作效率。

2.4 熒光PCR技術的應用

不同類別的熒光分子進行染色處理，實時檢測基因標靶，對微生物的特異性進行分析，依據病原體的類別，選擇和其相匹配的具有不同特異性的熒光劑，這樣可以在較短的時間內精確的判斷出多種病原體。

3 PCR技術的發展方向

PCR技術原理是聚合酶鏈式反應，在無細胞條件下對DNA進行克隆。PCR技術在微生物檢測中，第一步是進行細菌細胞的富集，在獲取微生物細胞之后對細胞進行裂解，將其中的DNA完全釋放，再按照微生物的實際特性選擇合適的引物，最后再使用電泳法，對其中的DNA序列進行嚴格的檢測。PCR技術的特點就是檢測速度以及檢測精度高，可以對食品中的沙門氏菌、腸出血性大腸桿菌、以及金黃色葡萄球菌等進行準確的測量。因此，PCR技術在食品的檢測過程中將發揮極為關鍵的作用和效果。傳統自動化檢測技術下，微生物檢測通常需要2～5天不等，較長時間可達1周或1周以上，因檢測時間過長，往往出現食品已投向市場流轉而檢測結果尚未出來的情況，體現了傳統自動化檢測具有費時的弊端，對我國食品行業實際生產運作造成嚴重影響，進而影響我國社會穩定與經濟的發展。而高自動化檢測技術PCR完全規避了費時這一弊端，在較短時間之內便能得出檢測結果，通常幾小時，較長時間僅為1天，因此，高自動化檢測技術PCR始終對我國食品行業的發展具有重要的意義。

4 結語

目前，我國的PCR技術仍舊處于一個發展的時期，需要對該項技術進行完善化的處理，PCR技術在我國未來食品安全檢測當中所占據的地位以及空間會比較大，且其技術所發揮的效應也會比較顯著。就長遠層面進行分析，免疫學及分子生物學等的使用可以進一步的提升食品微生物檢測效果的精確性以及靈活性。利用PCR技術，設定好PCR技術的發展方向，讓其朝向精確化且標準化的方面發展，滿足我國當代的食品安全檢測需求，針對食品的類別，選擇和其相匹配的檢測工藝技術，切實的保障食品的安全。

參考文獻：

[1]夏天爽.流式細胞術在食品微生物檢測領域的研究進展[J].食品安全導刊，2019（34）：62-64.

[2]謝靜玲.食品中微生物檢測能力驗證結果[J].食品安全導刊，2019（30）：104.

[3]沈正艷.食品安全中微生物檢測技術的價值[J].食品安全導刊，2019（30）：128.

[4]王 林.快速檢測技術在食品微生物檢測中的應用[J].檢驗檢疫學刊，2019（6）：141-142.

[5]陳 晨，王 璐，張 文，等.近紅外光譜技術在食品微生物檢測中運用嘗試[J].食品安全導刊，2019（33）：74.