胃癌組織中VEGF-A、ADD1與臨床病理特征的相關性

張志明

胃癌是嚴重危害人體健康的惡性腫瘤，近年來在我國發病率不斷增長，且呈年輕化發展，而臨床研究發現，胃癌患者進展期5年生存率較低，但早期5年生存率在90%以上[1-2]。因此，為提高胃癌患者生存質量，幫助其早期確診治療，尋求有效的特異性標志物尤為重要。相關研究發現，在食管鱗狀細胞癌、原發性膽囊癌、宮頸癌等惡性腫瘤中，血管內皮生長因子-A(vascular endothelial growth factor-A，VEGF-A) 及α-內收蛋白(α-adducin，ADD1)存在異常表達，均與腫瘤的發生發展及侵襲轉移具有密切聯系[3-4]。鑒于此，本研究探討胃癌組織中VEGF-A、ADD1與臨床病理特征的相關性。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析我院2018年11月至2019年11月96例經病理證實為胃癌患者的腫瘤組織標本，其中男59例，女37例；年齡30～78歲，平均年齡(54.45±5.61)歲；組織分化程度：中低分化74例，高分化22例；腫瘤位置：上部41例，中部22例，下部33例。

1.2 入選標準 納入標準：經病理證實為胃癌；臨床資料完整者；術前未經任何治療；無嚴重精神系統疾病者。排除標準：存在嚴重器官功能異常者；存在其他惡性腫瘤者；存在其他消化系統疾病者；不能配合治療或中途退出者。

1.3 方法

1.3.1 免疫組織化學檢測 將收集的標本用10%中性甲醛溶液固定，乙醇梯度脫水，石蠟包埋，以4 μm厚連續切片，脫蠟用二甲苯，抗原修復用檸檬酸鹽緩沖液，漂洗用磷酸緩沖液(PBS)，滅活用內源性過氧化物酶，封閉采用山羊血清；將兔抗人ADD1多克隆抗體以1∶300比例稀釋及兔抗人VEGF-A多克隆抗體以1∶200比例稀釋并加入，過夜4 ℃孵育，PBS漂洗；將羊抗鼠IgG以為1∶400比例稀釋并加入，20 min、37 ℃孵育、PBS漂洗；顯色采用購于北京中杉金橋生物有限公司的DAB顯色試劑盒，反應5 min，PBS終止反應，蘇木精復染，脫水，封固采用中性樹脂封片劑，觀察ADD1及VEGF-A表達。

1.3.2 結果判斷 由2名經驗豐富的病理科醫師對結果進行分析，對陽性信號染色強度進行評估，并計數陽性細胞百分比，按染色強度及陽性細胞百分率計分乘積進行結果判定。染色強度為1分：黃色；2分：棕黃色；3分：棕褐色。陽性細胞百分率為0 分：≤5%；1 分：6%～25%；2 分：26%～50%；3分：51%～75%；4分：＞76%。其中，陰性：0分，弱陽性：1～4分；中度陽性：5～8分；強陽性：9～12分。高表達為中度陽性及強陽性；低表達為陰性及弱陽性。

1.4 統計學方法 采用SPSS 20.0進行統計學分析，均經正態分布檢驗全部數據，符合正態分布，計數資料用率表示，采用χ2檢驗，等級資料采用Spearman 相 關 檢 驗，P ＜0.05 表 示 差 異 具 有 統 計學意義。

2 結果

2.1 胃癌組織中VEGF-A、ADD1表達與臨床病理特征(表1) 96例胃癌患者的腫瘤組織中VEGF-A高表達48例，占比50.00%；ADD1高表達61例，占比63.54%。VEGF-A 表達癌腫瘤位置中上部最高，其次為中部、下部，差異有統計學意義(P＜0.05)；ADD1表達在組織分化程度中中低分化最高，其次為高分化，差異有統計學意義(P＜0.05)；ADD1表達在淋巴結轉移中≥16個最高，其次為7～15個、3～6個、1～2個、0個，差異有統計學意義(P＜0.05)。

表1 胃癌組織中VEGF-A、ADD1表達與臨床病理特征[n(%)]

2.2 胃癌組織中VEGF-A、ADD1與臨床病理特征的相關性 Spearman相關檢驗結果顯示，VEGF-A表達與腫瘤位置呈正相關(r ＝0.287，P ＜0.05)；ADD1表達與組織分化程度呈負相關(r＝-0.514，P＜0.05)；ADD1表達與淋巴結轉移呈正相關(r＝0.317，P＜0.05)。

3 討論

胃癌是臨床常見的惡性消化系統腫瘤，主要發生在胃黏膜上皮，細菌感染、飲食、生活習慣、環境等均可誘發，部分患者伴有上腹疼痛、消瘦、惡心等癥狀，易損傷消化系統，嚴重者出現轉移，累及呼吸機肝腎功能，危及患者生命安全[5]。因胃癌早期患者無特異性癥狀，在進展期出現明顯的進食后飽脹、上腹不適等上消化道癥狀，且依據腫瘤位置不同，其臨床表現具有差異性。因此，為幫助胃癌患者提高早期確診率，明確其發生發展機制具有積極意義。

研究發現，腫瘤發生發展及轉移與血管生成密切相關，是血管生成抑制因子與刺激因子共同作用的結果[6]。其中，VEGF是一種血管生成刺激因子，屬于同源二聚體糖蛋白，由單一基因編碼，可增強血管通透性，促使血漿蛋白如纖維蛋白原等外滲，且對間質形成具有促進作用，進而誘導新生血管生成；同時可強效刺激血管形成，并結合內皮細胞上的FIt-1、KDR兩種受體，誘導血管內皮細胞增生、遷移[7-8]。而作為VEGF重要家族成員之一的VEGF-A，屬于血管生成調節因子，可通過促進血管生成，影響腫瘤的發生發展[9]。本研究結果顯示，96例胃癌患者的腫瘤組織中VEGF-A高表達占比50.00%；Spearman相關檢驗結果顯示，VEGF-A表達與腫瘤位置呈正相關(r＝0.287，P＜0.05)。提示胃癌患者腫瘤組織中VEGF-A表達與腫瘤位置明顯相關，在李良等[10]研究結果中，胃癌患者組織中VEGF-A 高表達率49.66%，且VEGF-A表達水平在不同腫瘤位置有差異，與本研究結果一致。分析其原因在于，人體是通過新生血管向各個部位運輸營養物質，而在胃癌腫瘤細胞發生發展過程中，需要攝取大量的營養元素，在激活VEGF-A后，會造成腫瘤的增生、遷移。ADD1屬于異源二聚體，由22個殘基組成，可影響多個細胞的生命活動，如細胞黏附、細胞膜離子轉運、細胞增生等，并在細胞膜骨架網狀結構的構建中產生重要作用，同時具有胞間信號轉導功能，可維持細胞膜穩定性，而在ADD1被磷酸化后，會降低與血影蛋白、肌動蛋白件的交互，減弱細胞間黏附力，進而影響細胞生長、分化[11]。本研究結果顯示，胃癌組織中ADD1 高表達占比63.54%；ADD1表達與組織分化程度呈負相關(r＝-0.514，P＜0.05)；ADD1 表達與淋巴結轉移呈正相關(r＝0.317，P＜0.05)。提示胃癌患者腫瘤組織中ADD1表達與組織分化程度及淋巴結轉移明顯相關，在宋韜等[12]研究結果中，胃癌組織中ADD1陽性表達率為67.50%，且不同淋巴結轉移情況胃癌組織中ADD1陽性表達率有差異，與本研究結果一致。分析其原因在于，細胞生命活動主要通過磷酸化進行調控，對細胞分化、增生及凋亡產生影響，同時可促進蛋白質活性改變，而ADD1被磷酸化后，其正常調控功能受影響，會造成細胞惡性增生。

綜上所述，胃癌患者腫瘤組織中VEGF-A表達與腫瘤位置明顯相關，ADD1表達與組織分化程度及淋巴結轉移明顯相關。