實時熒光定量核酸擴增技術對結核篩查的臨床診斷價值分析

余冬黎 楊淳 馮鋼

（皖南醫學院弋磯山醫院檢驗科 安徽 蕪湖 241001）

結核病是一種因感染結核分枝桿菌導致的慢性傳染病，對人類健康危害極大[1]。目前結核病的實驗室診斷方法主要有痰涂片、藥敏試驗和結核菌培養，但都具有一定的局限性[2]。實時熒光定量核酸擴增技術是世界衛生組織近年來推薦使用的一種快速檢測結核病的分子技術，快速簡單且靈敏度高[3]。因此本研究旨在分析實時熒光定量核酸擴增技術在結核病診斷中的臨床價值。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年7 月—2019 年5 月我院收治的疑似結核病患者86 例，其中男52 例，女34 例，年齡25 ～76 歲，病例資料均完整。

1.2 方法

收集所有患者清晨漱口后咳出的深部痰液標本。①取痰液分別行痰涂片檢查：使用無菌移液管添加1.5ml 標本處理液至0.5ml痰沉淀樣本中，將處理后的痰液在玻璃片上涂片，操作均按照《痰涂片鏡檢標準化操作以及質量保證手冊》進行，經抗酸染色后在顯微鏡下進行觀察，并結合患者影像學檢查結果進行診斷；②取痰液行熒光定量核酸擴增技術（Xpert MTB/RIF 法）：用標本處理液對痰液標本進行處理，將處理后的標本2ml 加入反應試劑盒中，將反應試劑盒放入GeneXpert 儀器中進行全自動檢測和結果判定。

1.3 統計學方法

2.結果

Xpert MTB/RIF 法與痰涂片抗酸染色法的比較

送檢的86 例標本中，Xpert MTB/RIF 法檢測出結核菌38 例，陽性率為44.19%（38/86）；痰涂片抗酸染色法檢測出結核菌47例，陽性率為54.65%（47/86）。以痰涂片抗酸染色法為金標準時，Xpert MTB/RIF 法陽性預測值為100.0%（38/38），陰性預測值為81.25%（39/48），見表1。

Xpert MTB/RIF 檢測法的靈敏度為80.85，特異度為100.00%。兩種方法檢出陽性率比較，χ2=1.884，P ＞0.05，無顯著差異。

表1 Xpert MTB /RIF 法與痰涂片抗酸染色法結核菌檢出情況

3.討論

目前結核病診斷的金標準仍是抗酸桿菌染色和結核分枝桿菌培養，但臨床檢測時常存在敏感度低、培養周期長等不足，不利于結核病的及時有效確診和治療[4]。因此如何找到敏感度和特異度均高且快速方便的檢測方法對結核病的診治具有重要意義。本研究所用的Xpert MTB/RIF 法即采用實時熒光定量核酸擴增技術，具有快速、生物安全性高、效率高等優點，對臨床檢測工作有極大的幫助。本研究結果發現：在送檢的86 例疑似結核病的痰標本中，Xpert MTB/RIF 法和痰涂片抗酸染色法具有良好的一致性，且Xpert MTB/RIF 法的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值均高于痰涂片抗酸染色法，與之前相關研究結果類似[5]，這說明實時熒光定量核酸擴增技術對診斷結核病具有良好的價值，同時該技術相較于傳統檢測方法，培養時間短，自動化操作一定程度上提高了檢測結果的準確性。同時有研究發現[6]，Xpert MTB/RIF 法也能提供利福平耐藥基因突變信息。

綜上，實時熒光定量核酸擴增技術在結核病的診斷中具有良好的價值，檢測快捷簡便，靈敏度和特異度良好，可應用于結核病的臨床檢測工作。