老年冠心病患者血清Metrnl、Perilipin5聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義

汪琳 劉書(shū)芳 王明磊 李文雅 劉穩(wěn) 彭聰

(漯河市中心醫(yī)院 漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校第一附屬醫(yī)院 1高血壓科，河南 漯河 462000；2神經(jīng)內(nèi)科)

冠心病是動(dòng)脈粥樣硬化引起的心血管疾病，近年來(lái)冠心病的死亡率呈遞增的趨勢(shì)，尤其是農(nóng)村地區(qū)的冠心病死亡率明顯上升〔1〕。研究已證實(shí)，炎癥反應(yīng)和脂代謝紊亂是冠心病的關(guān)鍵致病因素，脂滴是脂肪細(xì)胞的基本單位，廣泛存在于生物體多種器官和組織中，如脂肪組織、心肌、骨骼肌、肝臟等，參與機(jī)體能量?jī)?chǔ)存、應(yīng)激等生理過(guò)程〔2〕。研究證實(shí)，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的管壁、心內(nèi)膜肌層中，存在大量脂滴〔3〕。脂肪因子Metrnl可刺激嗜酸粒細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素(IL)-4/IL-3，激活白色脂肪組織中的M2型巨噬細(xì)胞，釋放兒茶酚胺，進(jìn)而促進(jìn)米色脂肪形成，增加產(chǎn)熱〔4〕，此外，Metrnl通過(guò)刺激抗炎基因表達(dá)，抑制炎癥反應(yīng)〔5〕。脂滴包被蛋白(Perilipin)5是PAT(Perilipin-ADRP-TIP47)家族蛋白成員之一，對(duì)脂滴具有屏障保護(hù)作用〔6〕。研究表明，Perilipin5表達(dá)下降，導(dǎo)致脂解率增加，而循環(huán)系統(tǒng)中三酰甘油(TG)含量顯著升高，可促進(jìn)單核細(xì)胞向血管壁浸潤(rùn)，加速血管內(nèi)皮炎癥形成〔7〕。本研究擬探討老年冠心病患者的血清Metrnl、Perilipin5水平及其在冠心病病情評(píng)估及診斷中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 2016年6月至2018年6月，選取確診為冠心病的120例患者為冠心病組，同期選取120例體檢的健康志愿者為對(duì)照組。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)，研究對(duì)象年齡均>60歲，且均簽署知情同意書(shū)。冠心病患者的臨床癥狀、病史、心電圖等檢查均符合歐美心臟病學(xué)會(huì)指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)〔8〕。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他心血管疾病者(心肌病、先天性心臟病等)；合并惡性腫瘤者；合并傳染性疾病者(如乙肝等)；合并自身免疫性疾病者(系統(tǒng)性紅斑狼瘡等)；嚴(yán)重肝腎功能不全者等。兩組研究對(duì)象的基本資料，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，見(jiàn)表1。

1.2樣本采集及觀察指標(biāo) 采集研究對(duì)象清晨空腹靜脈血10 ml，室溫靜置10 min，2 000 r/min離心10 min，取上清，置于-20℃冰箱中保存?zhèn)溆?。血清Metrnl、Perilipin5水平采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)，參照ELISA試劑盒(美國(guó)Clound-Clone公司)說(shuō)明書(shū)操作，ELX800酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。血清IL-11、IL-1β、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)炎性標(biāo)志物水平采用ELISA試劑盒(上海晶抗生物工程有限公司)檢測(cè)，檢測(cè)儀器為ELX800酶標(biāo)儀。7600全自動(dòng)生化分析儀常規(guī)生化檢測(cè)總膽固醇(TC)，TG，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，載脂蛋白(Apo)A1，ApoB等血脂指標(biāo)。

表1 兩組一般資料比較

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)、Pearson相關(guān)分析、多因素Logistic回歸分析、受試者工作特征(ROC)曲線分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清Metrnl、Perilipin5、炎性標(biāo)志物、血脂的比較 冠心病組血清Metrnl、Perilipin5、IL-11、HDL-C及ApoA1水平顯著低于對(duì)照組(均P<0.001)，而血清IL-1β、TC、TG、LDL-C、hs-CRP及ApoB水平顯著高于對(duì)照組(P<0.001)，見(jiàn)表2、3。

表2 兩組血清Metrnl、Perilipin5和炎性標(biāo)志物比較

表3 兩組血脂指標(biāo)比較

2.2冠心病組血清Metrnl、Perilipin5水平與炎性標(biāo)志物、血脂的相關(guān)性 冠心病組血清Metrnl水平與IL-11呈正相關(guān)(P<0.001)，與IL-1β、hs-CRP、TC、LDL-C呈負(fù)相關(guān)(P<0.05，P<0.001)；血清Perilipin5水平與HDL-C、ApoA1呈正相關(guān)(均P<0.05)，見(jiàn)表4。

2.3冠心病發(fā)生的多因素Logistic回歸分析模型 因變量為冠心病病變(1=冠心病，0=否)，Metrnl、Perilipin5、IL-11、IL-1β、hs-CRP、TC、TG、LDL-C、HDL-C、ApoA1、ApoB等多個(gè)指標(biāo)為自變量，這些指標(biāo)均為連續(xù)變量，為提高統(tǒng)計(jì)效率使回歸結(jié)果清晰，按各指標(biāo)的兩組總均值(適當(dāng)取整)進(jìn)行分段(分層)，轉(zhuǎn)化成兩分類變量，各變量賦值見(jiàn)表5?；貧w過(guò)程采用后退法設(shè)定α=0.10剔除，α=0.05保留。結(jié)果顯示：Metrnl、Perilipin5、IL-11，LDL-C、HDL-C進(jìn)入回歸模型(P<0.05)，其中Metrnl、Perilipin5、IL-11，LDL-C是冠心病發(fā)生的危險(xiǎn)因素(OR>1)，HDL-C是冠心病發(fā)生的保護(hù)因素(OR<1)。見(jiàn)表5。

2.4冠心病診斷指標(biāo)的分析 將Metrnl、Perilipin5各劃分成7～8個(gè)組段，構(gòu)建ROC曲線，結(jié)果顯示：兩指標(biāo)對(duì)冠心病的預(yù)測(cè)診斷價(jià)值均較高，見(jiàn)表6，圖1。兩指標(biāo)各自的閾值為診斷閾值，兩指標(biāo)均為陽(yáng)性或陰性時(shí)做陽(yáng)或陰性診斷，兩指標(biāo)一陽(yáng)一陰則進(jìn)行復(fù)測(cè)，復(fù)測(cè)未改變則認(rèn)可Perilipin5的診斷結(jié)果或與臨床醫(yī)師會(huì)商。

表4 冠心病組血清Metrnl、Perilipin5水平與血脂、炎性標(biāo)志物相關(guān)性

表5 冠心病發(fā)病的危險(xiǎn)因素Logistic回歸分析

表6 血清Metrnl、Perilipin5對(duì)冠心病診斷價(jià)值的ROC分析結(jié)果

圖1 血清Metrnl、Perilipin5對(duì)冠心病診斷價(jià)值的ROC曲線

3 討 論

冠心病是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化引起血管腔狹窄、堵塞，進(jìn)而引發(fā)心肌缺血缺氧的一類慢性炎性疾病，其臨床表現(xiàn)主要有胸痛、心絞痛，甚至猝死〔9〕。大量臨床研究證實(shí)〔10,11〕，炎癥反應(yīng)、脂代謝異常與冠心病關(guān)系密切，機(jī)體炎癥反應(yīng)增強(qiáng)、脂代謝異常引起的脂質(zhì)沉積，均可誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成，進(jìn)而加速冠心病的形成。IL-1β是血管炎癥發(fā)生發(fā)展過(guò)程中重要的致病物質(zhì)〔12〕。hs-CRP是在炎癥刺激時(shí)，肝細(xì)胞合成的一種經(jīng)典的急性時(shí)相蛋白，在心血管疾病診治方面價(jià)值已被廣泛證實(shí)。冠心病患者血清hs-CRP水平越高，斑塊的壞死核越大、纖維化越少〔13〕?？寡准?xì)胞因子IL-11是IL-6家族新成員，具有極強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)功能，與機(jī)體炎癥狀態(tài)相關(guān)〔14〕。本研究提示冠心病患者的機(jī)體炎癥反應(yīng)增強(qiáng)，與其他研究者〔15,16〕的臨床研究結(jié)果一致。脂代謝紊亂是冠心病發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素〔17〕。ApoA1和ApoB分別具有抗動(dòng)脈硬化和促動(dòng)脈硬化作用，ApoA1是HDL-C的主要成分，具有逆向轉(zhuǎn)運(yùn)TG、抑制LDL-C氧化、抗炎等作用；ApoB主要存在于LDL-C表面，細(xì)胞主要通過(guò)ApoB攝取和識(shí)別LDL-C。本研究提示冠心病患者體內(nèi)存在脂代謝紊亂，血脂水平異常是冠心病患者的重要生化檢測(cè)特征。

脂肪組織是最大的內(nèi)分泌和旁分泌器官，可分泌激素、酶、生長(zhǎng)因子等多種脂肪因子，具有抗炎和抗動(dòng)脈粥樣硬化的功能〔18〕；瘦素可引起內(nèi)皮功能紊亂、激發(fā)炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激等〔19〕，瘦素或其受體缺失，可減輕動(dòng)脈壁損傷引起的動(dòng)脈血栓和內(nèi)膜增生〔20〕；內(nèi)臟脂肪中的內(nèi)脂素具有促炎功能，可激發(fā)血管炎癥進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成〔21〕。Metrnl是一種在白色脂肪組織中高表達(dá)的新型脂肪因子。Rao等〔5〕發(fā)現(xiàn)在急速寒冷刺激時(shí)白色脂肪組織中的Metrnl表達(dá)增加，且可通過(guò)激活I(lǐng)L-4/IL-3通路促進(jìn)棕色脂肪產(chǎn)熱并增強(qiáng)葡萄糖耐受。研究表明，糖尿病患者的血清Metrnl水平降低，且與血糖水平、胰島素抵抗呈負(fù)相關(guān)〔22〕。Chung等〔23〕發(fā)現(xiàn)血清Metrnl水平與多種心肌代謝危險(xiǎn)因素(如腎功能)呈負(fù)相關(guān)。本研究提示Metrnl可能具有抑制炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)脂代謝的作用。脂滴的脂質(zhì)核心為T(mén)G和膽固醇，蛋白組學(xué)研究證實(shí)，脂滴表面覆蓋的功能蛋白主要以PAT家族蛋白為主，PAT家族蛋白與動(dòng)脈粥樣硬化板塊的形成相關(guān)〔24,25〕。Beylot等〔26〕發(fā)現(xiàn)，動(dòng)脈粥樣硬化板塊中Perilipin1表達(dá)水平顯著高于正常血管壁。Perilipin5是新近發(fā)現(xiàn)的PAT家族蛋白，主要通過(guò)胞質(zhì)中脂滴依賴的細(xì)胞代謝和變換狀態(tài)的不同而變化，在心肌能量代謝中發(fā)揮重要功能，主要分布在心臟、骨骼肌、肝臟等高氧化代謝的組織〔27〕。Andersson等〔28〕研究表明，Perilipin5在缺血心肌中具有保護(hù)作用。本研究提示，Perilipin5可能具有抗動(dòng)脈硬化作用，參與了冠心病的發(fā)生和病情進(jìn)展。

綜上，Metrnl、Perilipin5在冠心病的發(fā)病及病情進(jìn)展過(guò)程中發(fā)揮作用，兩指標(biāo)具有作為預(yù)測(cè)冠心病患病風(fēng)險(xiǎn)的生化指標(biāo)的潛能。