西白令海夏季狹鱈肝臟異尖線蟲感染特性研究

寧 靜，黃 開，韋貝貝，鄭智泓，賈明秀，朱國平，4，5

（1.上海海洋大學海洋科學學院，上海 201306；2.上海海洋大學極地研究中心，上海 201306；3.中國水產有限公司，北京 100160；4.大洋漁業資源可持續開發教育部重點實驗室極地海洋生態系統研究室，上海 201306；5.國家遠洋漁業工程技術研究中心，上海 210306）

狹鱈（Gadus chalcogrammusPallas，1814），又稱明太魚，隸屬于鱈形目（Gadiformes），鱈科（Gadidae），狹鱈屬，為生活在海洋底層和深海中下層的冷水性魚類，主要分布于北太平洋，也是北太平洋和白令海數量最多、最具商業價值的底層魚類之一［1］，常以海洋中甲殼類、頭足類、貝類以及小型魚類為食［2］。在白令海，狹鱈年產量達到100萬t，產值達10億美元［3］。我國于2015年起在西白令海俄羅斯專屬經濟區水域內通過雙邊協議的形式開展狹鱈資源的開發，但全球約一半的狹鱈魚片在中國市場加工。狹鱈不僅具有一定的商業重要性［4］，而且在白令海生態系統中扮演著捕食者和被捕食者的雙重生態角色，也是北太平洋生態系統能量轉移的關鍵生物［5］。

異尖線蟲（Anisakissp.）是以海洋生物為主要宿主的寄生蟲之一，成蟲寄生于海洋哺乳動物、海洋魚類及食魚鳥類的胃腸道中，幼蟲寄生于海洋魚類、橈足類、頭足類動物和一些甲殼類動物及海洋軟體動物體內［6］。異尖線蟲幼體被甲殼類吞食，并在其體內蛻皮成為三期幼蟲，被魚類及軟體動物攝食后移行至肌肉、腸系膜、肝臟、胃幽門盲囊等部位，直到被海棲哺乳類及其他終末宿主捕食后，在其胃內發育成成蟲［7］。人類可因攝食有異尖線蟲第三期幼蟲的海產品而患異尖線蟲?。?］。

寄生異尖線蟲的魚類多達數百種。我國近海的魚類，如帶魚（Trichiurus lepturus）、大黃魚（Larimichthys crocea）、小黃魚（L.polyactis）等均具有較高的感染性；異尖線蟲對宿主無特異性，但雜食性魚類感染程度更高［7］。據估計，狹鱈的內臟占其總重的9%～32%［9］，而肝臟是內臟的主要器官，其質量和脂質含量受季節、性成熟度和營養狀況等因素的影響［10］。由于肝臟富含多種營養素，也是異尖線蟲寄生較多的場所之一。迄今為止，千島群島北部東岸［11］、庫頁島北部海岸［11］、北海道東部沿海［12］和東朝鮮灣［13］等海域均有關于狹鱈寄生蟲的報道，但國際上對西白令海狹鱈感染異尖線蟲的研究仍較為有限。我國關于狹鱈寄生蟲的研究相對較少，楊玉祥和林成志［14］曾在狹鱈中發現異尖線蟲幼體。2010年，李萍和吳躍雙［15］對狹鱈感染異尖線蟲的情況進行了調查?？偟膩碇v，這些研究只是對狹鱈感染異尖線蟲情況進行了簡單的描述，而目前也未見國內學者對狹鱈肝臟寄生的異尖線蟲進行專門研究。此外，異尖線蟲還可作為研究海洋魚類種群的生物標記［16］。為此，本研究通過對狹鱈肝部寄生的異尖線蟲感染情況進行調查，為初步掌握肝臟寄生蟲感染特性提供參考，為進一步研究北太平洋重要魚種的寄主-寄生關系提供基礎數據。

1 材料與方法

1.1 樣本來源

狹鱈樣本由大型拖網船“新宇一號”采集于西白令海水域，采集時間為2018年8月至9月，取樣站點如圖1所示，采集的樣本于-20℃冷凍保存，待運回實驗室后開展進一步的分析。

圖1 西白令海及調查站位（圓點）Fig.1 W estern Bering Sea and sampling locations（solid circles）

1.2 實驗方法

1.2.1 樣本處理

樣本帶回實驗室后解凍，測量體長（L）、體質量（W）等生物學數據，體長精確到0.1 cm，體質量精確到0.1 g。測量好基礎數據后，用解剖刀和鑷子取肝臟，收集蟲體并計數。

狹鱈性成熟度可以通過對性腺的宏觀觀察、性腺體指數（GSI）和組織學方法予以確定。本研究中雌體性成熟度根據卵巢中出現最晚時相的卵母細胞［17］以及排卵卵泡出現與否［18］判斷狹鱈卵巢的發育階段；雄性則通過觀察性腺特征并與STAHL［19］對不同階段精巢的描述相比較確定狹鱈精巢的發育階段。

肥滿度指數，也稱身體狀況指數，在生物學研究中用來表示動物的生理或營養狀況的形態生理指數［20］。一般認為，動物個體的生理或營養狀況與其體內儲存的能量物質存在正相關關系，且體內儲存的能量物質與體質量呈正相關［21］。本研究采用經典的Fulton狀態指數K表示肥滿度F，K為在近似地認為動物體長增長和體質量增加均勻速的情況下得出。

如果近似地認為動物的體質量隨體長增加而均勻增長，則體質量與體長的關系為：

W＝aL3，

肥滿度公式也以此為依據建立：

其中，W為體質量，L為體長。

1.2.2 蟲體處理及鑒定

將收集的異尖線蟲蟲體用生理鹽水洗凈，放入70%乙醇隔水加熱至70℃左右固定，待蟲體伸直固定后，將其置甘油透明液中使其透明，待乙醇揮發后，將蟲體放在載玻片上，置于顯微鏡下進一步觀察蟲體結構，測量蟲體體長（AL；精確到0.01 mm）。根據《魚類寄生蟲與寄生蟲病》［22］鑒定種類。

1.3 寄生蟲感染程度分析

按照以下公式計算感染率、平均感染強度及魚體肥滿度［23］：

感染率＝（被寄生蟲感染的宿主數／所檢查的所有宿主數）×100%；

平均感染強度＝（檢查到的寄生蟲總數／所檢查宿主總數）×100%；

感染率指標用于說明感染寄生蟲的魚類樣本占總樣本的比例，感染強度指標用于說明平均每尾魚感染寄生蟲的個數，肥滿度是反映魚類肥瘦程度和生長情況的指標。

1.4 數據處理

狹鱈體長-體質量關系采用冪函數表示，并用單因素方差分析檢驗兩者擬合程度。線性關系采用單因子方差分析（ANOVA）檢驗顯著性。采用Shapro-Wilk檢驗分析樣本總體是否符合正態分布；如為正態，則采用t檢驗（兩個樣本總體）或單因子方差分析（3個或以上樣本總體）；如為非正態，則采用非參數檢驗。顯著性水平為P＝0.05。

2 結果與分析

2.1 異尖線蟲特征及感染情況

本次檢出的寄生蟲種類初步鑒定為蛔目（Asodris）蛔 亞 目 （Asearidina）異 尖 科（Anisakidae）異尖線蟲屬幼體。體長11.51～35.14 mm，平均為（24.72±3.00）mm，體寬為0.08～0.91 mm，平均為（0.42±0.15）mm。其主要特征是呈黃白色長圓筒形，半透明，兩端鈍圓，較細，口唇還未發育完全。

60尾狹鱈樣本中，肝臟感染異尖線蟲的樣本為56尾，感染率為93%。共收集異尖線蟲864條，其中19尾雄性狹鱈中16尾受到感染，感染率為84%；41尾雌性狹鱈中40尾感染，感染率為98%（表1）。

2.2 狹鱈生長指標

狹鱈樣本體長范圍為21.7～63.5 cm，平均體長為（37.95±7.23）cm；體質量范圍為 96.8～2 023.8 g，平均體質量為（585.21±332.41）g。體長-體質量關系為W＝0.012 9L2.9214（R2＝0.966 1，n＝60，P＜0.001）（圖2）。

2.3 肝部感染異尖線蟲的狹鱈體長變化

60尾狹鱈肝臟樣本共感染了864條異尖線蟲；感染寄生蟲數量最多的狹鱈樣本為體長51.4 cm，共檢查出95條異尖線蟲。異尖線蟲的數量隨著狹鱈體長的增加呈現線性增加（R2＝0.307 7，P＜0.001，F＝25.78）（圖3）。

2.4 狹鱈肥滿度與異尖線蟲平均感染強度

93%的狹鱈個體寄生異尖線蟲數量均低于50條，且對應的狹鱈樣本的肥滿度主要集中在0.7～0.9之間。通過統計分析去除兩個異常值后，對狹鱈肥滿度與寄生線蟲數量進行線性回歸分析，結果顯示二者間負相關水平較弱（R2＝0.061 2，P＝0.06＞0.05）（圖4）。

圖2 狹鱈體長-體質量關系Fig.2 Length-weight relationship of Gadus chalcogrammus

圖3 狹鱈體長與異尖線蟲數量之間關系Fig.3 Relationships between Anisakis sp.number and standard length of Gadus chalcogrammus

圖4 狹鱈肥滿度與異尖線蟲數量關系Fig.4 Relationships between Anisakis sp.number and fatness of Gadus chalcogrammus

表1 狹鱈肝臟異尖線蟲感染情況Tab.1 Infection of Anisakis sp.to Gadus chalcogrammus

2.5 狹鱈性成熟度等級與肝部異尖線蟲感染程度關系

雌、雄狹鱈個體的性成熟度均處于Ⅱ～Ⅴ期，并以Ⅲ期為主。性成熟度為Ⅱ期和Ⅳ期的狹鱈對異尖線蟲的感染強度較高，Ⅱ期個體平均感染強度為（21±27）條·尾-1，Ⅳ期個體平均感染強度為（18±26）條·尾-1，而Ⅴ期感染強度較低，僅為（6±6）條·尾-1。狹鱈個體感染異尖線蟲的平均強度隨性成熟度等級增大而逐漸降低，但由圖5中Ⅱ和Ⅲ期個體的異常值可以說明，性成熟度較低的個體也會出現感染強度異常高的狀況（圖5）。狹鱈性腺組織的營養水平可以用能量密度表示，能量密度隨著性腺的發育呈現增長的趨勢，并在Ⅳ期左右達到最大值［24］，圖5顯示性成熟度為Ⅳ期的樣本異尖線蟲感染強度最大，可以推斷與性腺能量密度較大有關。

圖5 狹鱈性成熟度與異尖線蟲數量之間的關系Fig.5 Relationships between Anisakid sp.number and sexualmaturity of Gadus chalcogrammus

2.6 狹鱈肝重與異尖線蟲感染程度之間的關系

隨著肝臟質量的增加，異尖線蟲數量也增加。肝重與異尖線蟲數量之間呈線性關系，其線性回歸方程為y＝0.389 3x+0.059 5（R2＝0.238 2，n＝60，F＝18.18，P＜0.001）。

3 討論

3.1 異尖線蟲特征

本研究檢出的異尖線蟲主要特征與孫世正和何毅勛［25］所描述的異尖線蟲I型幼體相符合。

狹鱈及其他鱈科魚類如太平洋鱈（G.macrocephalus）、大西洋鱈 （G.morhua）、牙鱈（Merlangiusmerlangus）等，為異尖線蟲合適的中間宿主或轉續宿主之一。異尖線蟲以海洋浮游植物或半浮游甲殼類動物為第一中間宿主，魚類為中間宿主或轉續宿主，第一中間宿主可以被包括頭足類動物和魚類在內的中間宿主或轉續宿主捕食，寄生蟲以此轉移到下一個寄主體內繼續發育。線蟲幼蟲在宿主的全身內，包括肌肉組織、各種內臟器官或腸系膜上均可寄生，但成年線蟲通常寄生在最終宿主的消化道中［26］。宿主受感染器官的損害狀況與組織中線蟲的數量成正比［26］。通過觀察發現，本研究中狹鱈樣本受尖異線蟲感染的器官主要為肝臟，而其他學者的研究發現，異尖線蟲在狹鱈的體腔、胃、肝臟和腸系膜中均普遍存在。NURHIDAYAT等［13］表示，東中國海韓國水域狹鱈肝臟寄生的異尖線蟲比例達到70%。

圖6 狹鱈肝重與異尖線蟲數量之間的關系Fig.6 Relationships between Anisakid sp.number and liver weight of Gadus chalcogrammus

3.2 狹鱈體長與尖異線蟲感染強度的關系

本研究中，狹鱈體長與肝臟感染異尖線蟲的數量呈顯著的線性關系。這說明，感染狹鱈肝臟寄生異尖線蟲的數量與魚類體長密切相關，即隨著狹鱈體長的增加，肝部寄生異尖線蟲數量也越高，且當狹鱈體長大于37 cm時，其肝臟寄生異尖線蟲的數量呈現明顯的增加趨勢（圖3）。由此，宿主體型在狹鱈寄生尖異線蟲方面發揮重要的作用。事實上，在許多海洋魚類中，異尖線蟲感染率均隨寄主體長增加而呈線性增加的趨勢［27-28］。SASAKI［29］指出，在體長 30 cm以上的魚類中，異尖線蟲對狹鱈的感染率高于較小個體的魚類。GRABDA［30］對由前蘇聯進口到波蘭的狹鱈產品進行了寄生蟲檢驗，結果發現了11種寄生蟲；該研究還注意到，未感染寄生蟲的魚類比例隨著寄主體型的增加而下降，但其并沒有列出寄生蟲的種類。ARTHUR等［31］發現，隨著狹鱈體型的增加，其肌肉組織中的Nybelinia surmenicola和Anisakis simplex的累積能力也明顯增強。一般來說，寄主的體長與線蟲數量之間的正相關關系被認為是重復感染寄生蟲的累積效應［32］。由于寄主在其整個生活史中均處于感染階段，大多數感染海洋魚類的寄生蟲幼蟲可能隨著寄主年齡的增長而不斷積累［32］。

3.3 狹鱈肥滿度與異尖線蟲感染強度

一般情況下，由于某些環境條件或自身情況影響，魚類體質量并非嚴格隨著體長增加而均勻增加，在公式W＝aLb中的b值不一定等于3。相同的營養狀況下，當b＞3時，體長越大的個體，K越大；當 b＜3時，體長越大的個體，K越小［33］。本研究中狹鱈樣本的體長-體質量關系為W＝0.012 9L2.9214，即 b＜3，因此表明肥滿度隨體長的增加而降低，這說明體長增長速度比體質量快，隨著狹鱈體長的增加，體型越來越細長。據此，狹鱈肝臟中異尖線蟲的感染強度隨體長的增加而增加，而狹鱈的肥滿度隨著感染強度的增加有下降的趨勢。

寄生蟲會給寄主帶來危害，而肥滿度是反映寄生蟲對寄主受害程度的指標之一［34］，但目前國內關于寄生蟲與肥滿度的研究較少。李云等［35］對鰾等睪吸蟲（Isoparorchis hypselobagri）與瓦氏黃顙魚（Pelteobagrus vachelli）肥滿度的關系進行了研究，結果顯示鰾等睪吸蟲的寄生引起瓦氏黃顙魚肥滿度顯著下降。溫安祥［34］比較了感染寄生蟲和未感染寄生蟲的幾種黃鱔的肥滿度，顯示兩者無顯著性差異。由于寄主和寄生蟲的不同，寄主肥滿度和感染強度之間的關系也可能會發生相應的變化［36］。雖然從統計上來看，可能由于樣本較少的原因導致本研究中異尖線蟲的感染度與狹鱈的肥滿度相關性并不顯著，這在一定程度上表明了寄主的生長不僅與寄生蟲有關，其他因素如食物、氣候及魚體自身差異也會引起狹鱈肥滿度的變化［37］。

3.4 狹鱈肝臟與異尖線蟲感染強度

本研究中，狹鱈肝臟內及表面檢測出大量異尖線蟲，且異尖線蟲數量與肝重之間呈顯著正相關（圖6）；大于100 g的肝臟中，異尖線蟲的數量顯著增加。MLADINEO和POLIJAK［38］也在歐洲無須鱈（Merluccius merluccius）（64.5%）和牙鱈（63.7%）的肝臟中發現了較高的異尖線蟲感染率。相比其他內臟器官，肝臟的體積更大，且富含脂肪，這也導致異尖線蟲幼蟲較易進入到肝臟組織中，并以肝臟組織為食［39］。鱈魚肝臟中寄生了線蟲對其肝臟的大小和質量、肝臟脂肪質量、魚體總重量和肥滿度等均會產生一定的影響，且這些影響與線蟲的數量和大小有關［39］。雖然受感染鱈魚肝重的變化、脂肪含量的下降及組織病理學變化等研究均有所進展［31，39］，但引起這些變化的機制尚不清楚，仍需要進行進一步研究。

此外，寄生蟲可以為了解寄主魚的生物學信息提供參考，如寄主的攝食、遷徙、繁殖、生活史等，這些信息使寄生蟲成為海洋魚類重要的生物標簽。已有學者將異尖線蟲作為研究海洋魚類種群的生物標簽［16］，本研究也可為了解西白令海狹鱈的生物學提供基礎數據。

致謝：感謝中國水產有限公司及拖網漁船“新宇一號”輪船長及全體船員協助收集并提供樣品。感謝劉慧為本文中站位等繪制提供的幫助。