探討ABO、RhD血型調(diào)查與建立Rh表型庫在安全輸血中的臨床意義

胡梅京，車麗敏，張艷賓，楊君青

(1.冀中能源峰峰集團總醫(yī)院檢驗科，河北 邯鄲 056200；2.冀中能源峰峰集團總醫(yī)院輸血科，河北 邯鄲 056200；3.河北省秦皇島市中心血站，河北 秦皇島 066001)

血型是一種抗原，不同血液成分表面存在的抗原類型不同[1]。1900年，奧地利研究者Landsteiner發(fā)現(xiàn)了人類ABO血型系統(tǒng)，因其紅細(xì)胞表面的抗原表型不同分為A、B、O、AB 4種，ABO血型系統(tǒng)對臨床輸血工作的安全保障具有極其重要的作用及意義[2]。隨著近年來人口流動的數(shù)量不斷增大，既往統(tǒng)計得出的ABO血型分布情況已不能準(zhǔn)確地反映真實情況，因此對ABO血型系統(tǒng)的分布再次進行調(diào)查統(tǒng)計是十分必要的[3]。1940年，以恒河猴命名的Rh血型系統(tǒng)被發(fā)現(xiàn)，解釋了新生兒溶血病的病因，加快了臨床血液學(xué)的發(fā)展。Rh血型系統(tǒng)相比ABO血型系統(tǒng)更為復(fù)雜和多樣化，其抗原類型最多，其中C、c、D、E、e是臨床上最常見的5種抗原類型，其抗原性從強到弱依次為D、E、c、C、e，由于D抗原免疫性最強，因此依據(jù)有無D抗原將Rh血型分為RhD陽性及RhD陰性[4]。Rh血型系統(tǒng)對臨床輸血工作安全的影響僅次于ABO血型系統(tǒng)，若Rh陰性血輸注Rh陽性血，或妊娠足月產(chǎn)母親與胎兒Rh血型不符，都會導(dǎo)致溶血等一些列不良反應(yīng)。不規(guī)則抗體是血清中一種特異性抗體，不包括抗-A、抗-B抗體，是由輸血等相關(guān)刺激形成的非天然抗體，是導(dǎo)致輸血不良反應(yīng)的主要因素，嚴(yán)重者可危及生命[5]。因此了解ABO、RhD血型在人群中的分布情況及分析患者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果，建立Rh表型庫對于臨床輸血工作的安全保障具有重要意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2016年5月—2018年5月我院住院患者8 000例的血樣進行ABO及RhD血型的檢測，其中男性3 572例，女性4 428例，年齡0～80 歲，平均(43.34±12.56)歲。另外收集同期需輸血的患者5 000例進行不規(guī)則抗體篩查，其中男性3 070例，女性1 930例，年齡 15～78 歲，平均(44.21±10.07)歲。隨機選取2016年5月—2017年5月血站提供的3 000袋RhD陽性濾白紅細(xì)胞懸液樣本檢測Rh表型，通過電腦建立獻血者Rh表型數(shù)據(jù)庫。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者臨床資料完整；②患者知情并簽署同意書，自愿參加本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者臨床資料不全；②心肝腎等重要臟器功能不全及既往血液系統(tǒng)免疫系統(tǒng)疾病史；③不愿意參加本次研究的患者。

本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)通過。

1.2方法

1.2.1ABO及RhD血型及不規(guī)則抗體篩查 8 000例住院患者采集清晨空腹靜脈血2 mL，乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝，離心后使用Microlab STAR IVD全自動血型分析儀(瑞士哈美頓博納圖斯股份有限公司)。按照儀器使用說明對標(biāo)本進行檢測。5 000例需輸血患者采集不抗凝靜脈血4 mL，分離血清，48 h內(nèi)采用微柱凝膠法行不規(guī)則抗體篩查。

1.2.2RhD陽性濾白紅細(xì)胞懸液樣本抗原表型檢測 3 000袋RhD陽性濾白紅細(xì)胞懸液樣本離心后配制濃度為1%，向Rh血型抗原檢測卡的微孔中滴加30 μL紅細(xì)胞懸液，使用血型血清離心機檢測其抗原表型。

1.3觀察指標(biāo) ①ABO血型及Rh血型的檢測結(jié)果；②不規(guī)則抗體篩選結(jié)果；③RhD陽性濾白紅細(xì)胞懸液樣本表型檢測結(jié)果。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1ABO、RhD血型在人群中的分布情況

2.1.1ABO血型系統(tǒng)分布情況 8 000例患者中A型血2 161例(27.01%)，B型血2 562例(32.02%)， AB型血959例(11.99%)，O型血2 318例(28.98%)，ABO血型系統(tǒng)的分布情況為由多到少依次為B型、O型、A型、AB型。將8 000例患者按年齡分為0～20歲、>20～40歲、 >40～60歲、>60歲4組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)， 0～20歲組分布情況由多到少為 B型、A型、O型、AB型，其他各組分布情況由多到少依次是B型、O型、A型、AB型。不同年齡組間ABO血型分布情況差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。不同性別組中ABO血型的分布情況差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.1.2Rh血型系統(tǒng)分布情況 8 000例患者中RhD陰性48例(0.60%)。男性和女性 Rh血型分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表3。

表1 不同年齡ABO血型系統(tǒng)分布情況Table 1 Distribution of ABO blood type system in different ages (例數(shù)，%)

*P值<0.05與0～20歲組比較(χ2檢驗)

表2 不同性別ABO血型系統(tǒng)分布情況Table 2 Distribution of ABO blood type system in different genders (例數(shù)，%)

表3 Rh血型系統(tǒng)分布情況Table 3 Distribution of Rh blood type systems (例數(shù)，%)

2.2不規(guī)則交叉配血抗體篩選結(jié)果 5 000例需輸血患者的血樣標(biāo)本中不規(guī)則抗體陽性者30例，陽性率為0.60%，其中Rh血型系統(tǒng)抗體陽性19例(63.33%)，抗-E檢出率最高，為36.67%，見表4。不規(guī)則抗體的檢出率女性顯著高于男性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表5。

表4 不規(guī)則抗體篩查結(jié)果Table 4 Results of irregular antibody screening

表5 不同性別患者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果Table 5 Results of irregular antibody screening in patients of different genders (例數(shù)，%)

2.3RhD陽性獻血標(biāo)本中Rh表型分布情況 3 000例RhD陽性獻血者血樣標(biāo)本Rh血型表型共8種，其中CCDee檢出率最多，其次為CcDEe，DcDEE和ccDee檢出率較少，見表6。

表6 不規(guī)則抗體篩查結(jié)果Table 6 Results of irregular antibody screening (例數(shù)，%)

3 討 論

ABO血型系統(tǒng)及Rh血型系統(tǒng)是影響臨床輸血工作安全問題的最主要的2個系統(tǒng)[6]。調(diào)查了解本地ABO血型系統(tǒng)及Rh血型系統(tǒng)在人群中的分布情況有利于提高臨床輸血工作的效率，并進一步保障安全，也有利于司法鑒定等相關(guān)工作的順利進行[7]。本研究納入河北省邯鄲市峰峰礦區(qū)8 000例住院患者，A型血2 161例(27.01%)，B型血2 562例(32.02%)， AB型血959例(11.99%)，O型血2 318例(28.98%)， ABO血型系統(tǒng)的分布情況為由多到少依次為B型、O型、A型、AB型。將8 000例患者按年齡分為0～20歲、>20～40歲、 >40～60歲、>60歲4組進行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0～20歲組分布情況由多到少為 B型、A型、O型、AB型，其他各組分布情況由多到少依次為B型、O型、A型、AB型。不同年齡組間ABO血型分布情況差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。以上結(jié)果提示，ABO 血型系統(tǒng)的分布是有地域差異的，河北省邯鄲市峰峰礦區(qū)分布情況符合北方地區(qū)ABO血型系統(tǒng)分布特點，且其分布與年齡相關(guān)，既往相關(guān)研究表明，新生兒溶血中以A型最常見，這可能是0～20歲患者中A型血分布較多的原因，另外其分布與性別無關(guān)，與既往相關(guān)研究相符[8-9]。本研究8 000例患者中RhD陰性48例(0.60%)，男性和女性Rh血型分布情況差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。該調(diào)查中RhD陰性率超過了全國平均水平，其原因可能是改革開放以來，我國人口流動規(guī)模不斷增大，外來人口增多，導(dǎo)致本地區(qū)RhD陰性率高于全國平均水平。不規(guī)則抗體是血清中一種特異性抗體，不包括抗-A、抗-B抗體，是由輸血等相關(guān)刺激形成的非天然抗體，是導(dǎo)致輸血不良反應(yīng)的主要因素，嚴(yán)重者可危及生命，因此輸血前對患者進行不規(guī)則抗體篩查并進一步檢測其抗體特異性是避免一系列輸血不良反應(yīng)的基本措施[10]。本研究結(jié)果顯示，5 000例需輸血患者的血樣標(biāo)本中，不規(guī)則抗體陽性者30例，陽性率為0.60%，其中Rh血型系統(tǒng)抗體陽性者19例(63.33%)，其中抗-E的檢出率最高，為36.667%。不規(guī)則抗體的檢出率女性顯著高于男性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。研究表明，在輸血引起的不良反應(yīng)中主要以Rh血型系統(tǒng)最多，且主要以抗-E為主，因此輸血前對于E抗原的檢測具有重要的臨床意義，但目前我國臨床大部分工作只圍繞檢測抗D抗原為主，忽略了E抗原在輸血安全中的隱患[11]。關(guān)于其性別不同導(dǎo)致不規(guī)則抗體的檢出率女性顯著高于男性原因可能是女性由于妊娠等相關(guān)因素的影響，其機體更容易產(chǎn)生抗體[12]。ABO血型系統(tǒng)作為人類最經(jīng)典且最被廣為人知的系統(tǒng)，已有很多研究及臨床工作的支持，避免有關(guān)ABO血型不符導(dǎo)致的輸血不良反應(yīng)[13]。目前臨床上較多見的還是Rh血型表型不符導(dǎo)致的一系列輸血反應(yīng)，因此對于本地區(qū)Rh血型表型的調(diào)查與統(tǒng)計不僅能提高臨床輸血工作的安全性，而且能進一步避免其引起的不良輸血反應(yīng)[14]。本研究結(jié)果顯示，3 000例RhD陽性獻血者血樣標(biāo)本Rh血型表型共8種，其中CCDee檢出率最多，其次為CcDEe，DcDEE和ccDee檢出率較少。由此可見，除了ABO血型系統(tǒng)外，Rh血型系統(tǒng)在臨床輸血工作中起到重要作用，收集并建立Rh血型表型庫能夠很大程度上避免輸血導(dǎo)致的不良反應(yīng)，減少血液浪費[15]。

總之， ABO血型的分布與地域及年齡有關(guān)，臨床上除在患者輸血前進行不規(guī)則抗體篩查，應(yīng)進一步檢測其抗體特異性，建立RhD陽性獻血者表型數(shù)據(jù)庫有利于預(yù)防因Rh表型不符輸血引起的溶血等嚴(yán)重不良后果，對于臨床輸血工作具有重大意義。