紅景天中有效成分山萘酚的薄層色譜鑒別

胡英婕

(錦州醫科大學醫療學院，遼寧 錦州 121000)

紅景天是《中國藥典》一部收錄的中藥材，具有益氣活血，通脈平喘功效，用于氣虛血淤，胸痹心痛，中風偏癱，倦怠氣喘等癥[1]。近年來國內外的藥學工作者對紅景天進行了深入的研究，提出了紅景天具有類似人參“扶正固本”的“適應原樣”的作用，而且在某些方面還優于人參，沒有人參興奮作用過強的不足。紅景天所含有效成分具有強心鎮靜、調節新陳代謝、調節神經系統和內分泌系統雙向調節血糖、血壓的作用，用于治療腦血管疾病，老年性心肌能衰竭、糖尿病、低血壓等癥，也用于病后體虛、年老體弱、神經乏力等[2]。

現代藥理研究表明，山萘酚為黃酮類化合物,具有抗癌、抗氧化、抗病毒、抗炎、抗菌、增強機體免疫等多種藥理作用，是紅景天主要有效成分之一[3]。《中國藥典一部》(2015版)紅景天質量標準中有紅景天苷的薄層色譜鑒別，而沒有山萘酚的鑒別。本研究根據相關文獻[4-6]，建立紅景天中有效成分山萘酚的薄層色譜鑒別方法，對完善中藥材紅景天的質量標準及其他藥材中含有山萘酚成分的鑒別提供借鑒。

1 材料

KQ-100A 型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，FA2004N電子天平(上海精密儀器公司)，HH-S恒溫水浴鍋(江蘇醫療儀器廠)，山萘酚對照品(購自中國食品藥品檢定研究院)，甲醇、鹽酸，環己烷、乙酸乙酯、甲酸、乙醇、三氯甲烷、丙酮為分析純。紅景天藥材，經遼寧錦州大德堂藥店王景山執業藥師鑒定為正品。

2 方法

2.1 山萘酚對照品溶液的制備

取山萘酚對照品2mg，用甲醇配制成濃度為1mg/mL的對照品溶液。

2.2 山萘酚供試品溶液制備方法考察

(1)取本品粉末(過三號篩)約0.5g，用甲醇-鹽酸混合液(甲醇終濃度50%，鹽酸終濃度2.0mol/L)于90℃水浴回流水解1h。

(2)用醋酸乙酯浸泡一夜，第二日在恒溫水浴鍋(35℃)加熱回流1h。

(3)用60%乙醇水溶液，料液比1∶15混合，超聲波提取，超聲波功率：100W，超聲頻率：35赫茲，提取方式：間隔2min超聲作用一次，超聲時間5min，總提取時間28min，提取溫度35℃。

2.3 展開系統的篩選

Ⅰ 三氯甲烷-甲醇-丙酮-水(6∶3∶1∶1)的下層溶液

Ⅱ 三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)于5-10℃放置12h的下層溶液

Ⅲ 環己烷-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶0.1)

2.4 山萘酚供試品溶液制備方法和展開系統的優選

用供試品溶液制備方法2和3制備的供試液，分別用3個展開系統展開后，斑點模糊一片，說明制備方法2和3分離效果不好。用供試品溶液制備方法1制得的供試液，用展開系統Ⅰ展開后，Rf值為0.2；用展開系統Ⅱ展開后，展開時間過長；而用展開系統Ⅲ展開后，Rf值為0.4，斑點清晰，圓整，重現性也好。因此，采用供試品溶液制備方法1制得的供試液，用展開系統Ⅲ展開。

2.5 薄層色譜鑒別檢測限的確定

取山萘酚對照品溶液(1mg/mL)0.5,1,1.5,2,2.5,3μL分別點于同一硅膠G薄層板上，按照薄層色譜鑒別方法操作，結果自1μL起，可見到明顯斑點，故山萘酚的最小檢出量為1μg。

3 結果

取三種不同產地(黑龍江、寧夏、四川)紅景天藥材，分別制成供試品溶液。取硅膠G薄層板，105℃活化后，吸取對照品溶液和3種供試品溶液各2μL,以環己烷-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶0.1)為展開劑，展開，展距約為10cm，取出，晾干。噴以5%AlCl3乙醇溶液，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜在與對照品色譜相應的位置上出現相同的斑點(見照片1)。本方法可將山萘酚與其他成分較好的分離，而且鑒別的靈敏度較高，專屬性好。

照片1

1.山萘酚對照品;2.供試液(紅景天藥材產地：黑龍江) ;3.供試液(紅景天藥材產地：寧夏);4.供試液(紅景天藥材產地：四川)

4 討論

(1)提取方法的考察 首先對回流提取法、超聲提取法和酸水解提取進行了比較，結果回流提取和超聲提取所得供試品溶液提取效果差，經展開劑展開后，均未呈現清晰、圓整的斑點。實驗證明酸水解法提取效果好，斑點圓整、清晰。

(2)因山萘酚含有酚羥基，顯酸性，展開系統中加入少量甲酸，能有效控制主斑點不擴散，保持斑點更為圓整，實驗證明展開系統中加入少許甲酸展開效果更好。