蛇床子素對(duì)慢性坐骨神經(jīng)壓迫模型大鼠背根神經(jīng)節(jié)中MyD88、p-ERK表達(dá)的影響

溫超，王春梅，楊柳

（大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院麻醉科，遼寧 大連 116011）

蛇床子素是中藥蛇床子主要有效成分，具有神經(jīng)保護(hù)、抗炎和免疫調(diào)節(jié)的作用［1-2］。有研究［3］發(fā)現(xiàn)硬膜外腔注射蛇床子素能夠緩解髓核引起的坐骨神經(jīng)痛大鼠的疼痛行為。慢性坐骨神經(jīng)壓迫 （chronic constriction injury of the sciatic nerve，CCI） 模型是研究外周神經(jīng)不完全損傷的病理性疼痛的動(dòng)物模型［4］。髓樣分化因子88 （myeloid differentiation factor 88，MyD88）是Toll樣受體 （Toll-like receptor，TLR） 信號(hào)通路中的關(guān)鍵接頭分子，CCI模型大鼠能夠激活MyD88依賴性信號(hào)通路，引起下游蛋白細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal regulated kinase，ERK） 激活為磷酸化ERK （phosphated ERK，p-ERK）［5］。研究［6］顯示蛇床子素能夠通過抑制脊髓背角p-ERK活化下調(diào)COX-2mRNA表達(dá)，對(duì)髓核導(dǎo)致的神經(jīng)根炎性痛發(fā)揮明顯的鎮(zhèn)痛作用。本研究檢測(cè)蛇床子素治療后CCI大鼠背根神經(jīng)節(jié) （dorsal root ganglion，DRG） 中MyD88與p-ERK表達(dá)變化，旨在明確蛇床子素緩解慢性神經(jīng)病理性疼痛的分子機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)試劑、動(dòng)物及分組

蛇床子素 （美國Selleck Chemicals公司），β-actin抗體、MyD88抗體 （英國Abcam公司），ERK和p-ERK（美國Cell Signaling 公司）。24只SD大鼠 （180～200 g，雌性） 由大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，并獲得大連醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物管理倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。大鼠自由飲水，鼠糧充足，每天照明12 h/關(guān)燈12 h，適宜溫度、濕度飼養(yǎng)。大鼠在進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)測(cè)試環(huán)境1 h。實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組 （sham組）、CCI組、治療組，每組8只。手術(shù)后14 d完成動(dòng)物行為測(cè)試，然后進(jìn)行DRG取材。

1.2 CCI模型制作

在CCI手術(shù)前，掀開大鼠L6的硬脊膜，沿蛛網(wǎng)膜下腔向頭端置入 PE-10導(dǎo)管 （美國Smiths Medical International公司） 約5 cm，隨后縫皮固定導(dǎo)管，1 d后進(jìn)行坐骨神經(jīng)結(jié)扎手術(shù)。大鼠腹腔注射l%戊巴比妥鈉后麻醉，參照Bennett-Xie模型制作CCI模型［4］。……