煙酰胺單核苷酸對阿爾茨海默病模型大鼠認知功能的影響

王曉楠，張勵，徐茜，楊旸，胡雪君

（中國醫科大學附屬第一醫院老年醫學科，沈陽 110001）

阿爾茨海默病 （Alzheimer disease，AD） 是以漸進性記憶和認知功能受損為主要臨床癥狀的一種神經退行性疾病。目前，AD的病因和發病機制尚不清楚，但在AD發病機制的諸多學說中，神經細胞外β淀粉樣蛋白 （β-amyloid，Aβ） 沉積處于主導地位［1］。AD的認知功能障礙主要與神經細胞能量代謝受損和氧化應激 （活性氧產生） 等密切相關［2-3］。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 （nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+） 是氧化還原的輔酶，廣泛參與細胞內能量代謝、信號轉導、DNA修復等多種生物學效應［4］。NAD+的前體物質煙酰胺單核苷酸 （nicotinamide mononucleotide，NMN） 可增加細胞內NAD+水平。本研究采用AD大鼠模型，觀察NMN對認知功能及海馬CA1區錐體神經細胞的影響，以期為AD的防治提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

清潔級雄性Wistar大鼠36只，體質量280～300 g （遼寧長生生物技術股份有限公司提供）。大鼠飼養于清潔級環境中，光照、通風良好，溫度、濕度適宜，進食、飲水自由。適應性飼養1周后，經Morris水迷宮測試反應正常，隨機分為假手術組、AD組和AD+NMN組，每組l2只。NMN和Aβ1-42均購自美國Sigma公司。

1.2 方法

1.2.1 AD動物模型建立及干預方法：給予大鼠3.6%水合氯醛 （1 mL/100 g） 腹腔注射麻醉。將大鼠頭部固定于腦立體定向儀，保持前后囟同一水平，切開硬腦膜，選取海馬定位點，用微量注射器從腦表面垂直進針，將1 μL Aβ1-42 （4 μg/μL） 在5 min內緩慢注入，留針5 min，使Aβ1-42充分彌散，緩慢拔針，封補針孔，皮膚切口處用青霉素抗感染［5］。假手術組給予等體積的人工腦脊液。術后1 d大鼠完全清醒后，AD+NMN組每天給予腹膜注射NMN （500 mg/kg）干預治療，假手術組及AD組給予腹膜注射等滲生理鹽水注射液 （104.5 mg/kg），連續注射6周［6］。……