紅心獼猴桃總皂苷的含量測定

羅安福 葉冬梅（通訊作者） 席加喜 蒙明瑜 王丹陽

(1 廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院 廣西 南寧 530021）

（2 廣西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院 廣西 南寧 530022）

獼猴桃(Actinidin Chinesis PIanch)，又名藤梨、羊桃等，為獼猴桃科植物獼猴桃的果實,獼猴桃的藥食應(yīng)用歷史悠久[1]。《本草拾遺》記載“主骨接風(fēng)，癱瘓不遂，長年白發(fā)、痔瘡、調(diào)中下氣。”《食療本草》記載“取瓤和蜜，去煩熱，主黃疸，止消渴”。現(xiàn)代研究表明，獼猴桃果具降血脂、保肝護(hù)肝等作用[2，3]，是基于其內(nèi)含多種有效成份，包括多糖、多酚、黃酮等。同時還證實獼猴桃尚含有皂苷成份[4]，中藥活性成分皂苷具有降血糖、血脂，抗炎，抗衰老，抗氧化以及調(diào)節(jié)免疫等作用等生物活性作用[5]。近年來，紅心獼猴桃由于果肉細(xì)膩、甜度高，深受廣大消費(fèi)者歡迎，對其開展進(jìn)一步研究有助于該產(chǎn)品的深入開發(fā)。本文建立測定紅心獼猴桃的總皂苷含量方法，為制定紅心獼猴桃深加工產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1.儀器與試藥

1.1 儀器

UV-1800 型紫外-可見分光光度計（上海菁華科技儀器）；AL204 型分析天平（瑞士梅特勒）；HH-S 數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市醫(yī)療器械廠）；DF-101S 集熱式攪拌器（金壇市科析儀器有限公司）；RE5298A 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)；R300 真空泵（SCIERNCETOOL）。

1.2 試藥

紅心獼猴桃干燥果粉（廣西旭昇農(nóng)業(yè)有限公司）；三七皂苷對照品（供含量測定，中國食品藥品檢定研究院，110745-201820）；水為蒸餾水；甲醇、乙醇、高氯酸、香草醛、冰醋酸等試劑均為分析純。

2.方法與結(jié)果

2.1 溶液的配制

2.1.1 5%香草醛-冰醋酸溶液 精密稱取香草醛5.00g，放置100mL 容量瓶中，用冰醋酸溶解，并定容至刻度，搖勻即得。

2.1.2 高氯酸-5%香草醛-冰醋酸溶液 吸取高氯酸溶液4mL,加入1mL 5%香草醛-冰醋酸溶液中，混勻（此溶液現(xiàn)配即用）。

2.1.3 對照品溶液的配制 精密稱取減壓干燥至恒定質(zhì)量的三七皂苷對照品20.5mg，加甲醇適量溶解并定容至10mL 量瓶中，得2.05mg·mL-1 的三七皂苷對照品溶液。

2.2 供試品制備

2.2.1 稱取紅心獼猴桃干燥果粉5.0g，加水300ml 90℃ 水浴回流 2h,過濾，濾液合并，減壓濃縮至50ml 得提取物溶液。精密取提取物溶液 5ml 稀釋至10ml,定容、搖勻，得樣品液。

2.2.2 供試品制備 用5ml 注射器垂直固定，以3︰1 的比例裝填D101 大孔樹脂與中性氧化鋁。先用25ml 70%乙醇溶液洗脫柱子，棄去洗脫液，再用25ml 蒸餾水洗脫柱子，棄去洗脫液。精確加入樣品液 0.5ml,用25ml 蒸餾水洗脫柱子，棄去洗脫液，再用70%乙醇溶液洗脫柱子，收集洗脫液，于蒸發(fā)皿蒸干，得供試品。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密吸取三七皂苷對照品溶液 20,40,60,80,100,120μL，置于具塞試管中，烘干，加入配置好的高氯酸-5%香草醛-冰醋酸溶液1ml,搖勻，密塞，60℃水浴加熱15min，取出后立即置于冰水中冷卻，加冰醋酸5ml，搖勻，以蒸餾水作空白，于560mn 處測定吸收值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以三七皂苷質(zhì)量（μg）為橫坐標(biāo)x，吸光度為縱坐標(biāo)y，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為y=0.0048x-0.0651，相關(guān)系數(shù)r=0.9994。

2.4 加樣回收率實驗

樣品液稀釋一倍后精密移取0.5 mL 平行移取9 份，分成3組（3 份/組），每份分別加入三七皂苷對照品溶液，每組加入量分別約為試樣中總皂苷含量（以三七皂苷計）的50%，100%，150%。按“2.4 紅心獼猴桃中皂苷的含量測定”步驟操作，平行測試6 次，計算加樣回收率及RSD。結(jié)果見表1。低、中、高3 個濃度水平的加樣回收試驗，回收率分別96.98%，100.52%，94.84%，RSD 分別為3.8%，3.7%，4.3%，均滿足定量分析的要求。

表1 回收率實驗結(jié)果

2.5 穩(wěn)定性實驗

制備供試品一份，按“2.4 紅心獼猴桃中皂苷的含量測定”步驟操作，在560nm 波長處，分別測定0,10,20,40,60min 吸光度,結(jié)果分別0.471,0.462,0.478,0.465,0.459,平均值0.467，RSD 為1.62%，表明 60min 內(nèi)顯色穩(wěn)定。

2.6 紅心獼猴桃中皂苷的含量測定

取供試品加高氯酸-5%香草醛-冰醋酸溶液 1ml,搖勻，密塞，60℃水浴加熱15min，取出后立即置于冰水中冷卻，加冰醋酸 5ml，搖勻，以蒸餾水作空白，于560mn 處測定吸收值，從回歸方程中求出供試

品中皂苷的含量。結(jié)果見表2。

表2 皂苷含量測定

3.討論

本文證實采用香草醛-高氯酸-冰醋酸顯色法測定紅心獼猴桃總皂苷含量[6]，準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性好。并將該方法成功用紅心獼猴桃水提取物中總皂苷的含量測定。本文研究結(jié)果可為深度開發(fā)紅心獼猴桃產(chǎn)品的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)提供參考。