豬肉中4種氟喹諾酮類藥物含量檢測(cè)探究

劉慧娟

摘 要 氟喹諾酮藥物作為廣譜殺菌藥物，價(jià)錢便宜，被廣泛應(yīng)用于牲畜治療疾病上，存在殘留于豬肉中的可能性。基于此，采用高效液相色譜法對(duì)河北省滄州市孟村回族自治縣30處豬肉樣品中4種氟喹諾酮類藥物的含量進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，當(dāng)?shù)刎i肉中的環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星都沒有超出國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。但是長(zhǎng)期以往，人們長(zhǎng)期食用此類豬肉，其后果讓人擔(dān)憂。

關(guān)鍵詞 高效液相色譜;豬肉;氟喹諾酮

中圖分類號(hào)：S859 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.02.075

氟喹諾酮是一類化學(xué)合成抗菌藥物，1962年合成第一代喹諾酮類藥物，只對(duì)大腸桿菌、痢疾桿菌、克雷白桿菌等少數(shù)菌有效，吸收效果差，副作用多，僅用于治療尿路感染。1974年合成第二代喹諾酮類藥物，對(duì)革蘭氏陰性桿菌致病菌的作用明顯，抗菌活性也大大提高，口服少量吸收，不良反應(yīng)也明顯減少，用于治療尿路和腸道感染等疾病。1979年合成第三代喹諾酮類藥，其母體都含有喹諾酮結(jié)構(gòu)，母核6位C上被氟取代，氟喹諾酮因此而得名[1]。第三代藥物結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，增加了脂溶性，增強(qiáng)了對(duì)組織細(xì)胞的穿透力，因而吸收好，大大增加了該類藥物的抗菌譜和殺菌效果。隨著構(gòu)效關(guān)系的研究進(jìn)一步展開，新的氟喹諾酮類藥物如雨后春筍，成為一個(gè)十分活躍的研究領(lǐng)域[2]。自1979年合成第三代喹諾酮（即諾氟沙星）以來，經(jīng)過40年的發(fā)展，氟喹諾酮已成為在臨床上應(yīng)用廣泛的廣譜、高效、低毒抗菌藥，常用于細(xì)菌性感染疾病，如呼吸道感染、消化道感染、泌尿系統(tǒng)感染等疾病的治療[3]。

喹諾酮類抗生素也廣泛用于治療牲畜疾病。喹諾酮類藥物具有抗菌譜廣、抗菌活性強(qiáng)、與其他抗菌藥物無交叉耐藥性以及毒副作用小等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)、畜牧等養(yǎng)殖業(yè)中，包括在牛、雞、鴨、豬等的養(yǎng)殖中用于疾病防治[4]。恩諾沙星是喹諾酮類抗生素的一種，對(duì)于預(yù)防和治療畜禽的細(xì)菌性感染及支原體病有良好的效果，在豬病防治中，對(duì)包括大腸桿菌、克雷伯氏菌、腸桿菌屬、彎曲桿菌屬、綠膿桿菌、沙門氏菌屬、氣單胞菌屬、嗜血桿菌屬、耶爾森菌屬、沙雷氏菌屬、弧菌屬、變形桿菌屬等在內(nèi)的革蘭氏陰性桿菌和球菌，對(duì)布魯氏菌屬、巴斯德氏菌屬、丹毒絲菌、博德特氏菌、葡萄球菌、支原體屬和衣原體也有效[5-7]。近年來，氟喹諾酮類藥物被養(yǎng)殖戶廣泛使用，作為飼料添加劑來預(yù)防動(dòng)物疾病的發(fā)生，隨之新的問題出現(xiàn)了，過度使用該類藥物，致使動(dòng)物體內(nèi)該藥物的殘留量積累的越來越多。當(dāng)前，世界各國(guó)對(duì)動(dòng)物體內(nèi)的氟喹諾酮?dú)埩舻难芯慷己苤匾暎绻覈?guó)不加以關(guān)注，會(huì)導(dǎo)致人們的健康存在巨大隱患，使得細(xì)菌的耐藥性逐漸增加[8]。我國(guó)規(guī)定，動(dòng)物性食品中環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、恩諾沙星和沙拉沙星的檢出限為20 μg·kg-1。為探究豬肉中4種氟喹諾酮類藥物含量，本次采用高效液相色譜法對(duì)河北省滄州市孟村回族自治縣30處豬肉樣品中4種氟喹諾酮類藥物的含量進(jìn)行檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 儀器設(shè)備與試劑

1.1.1 儀器設(shè)備

島津系列高效液相色譜儀LC-20A;高速離心機(jī)（50 mL離心管）;固體萃取柱C18（100 mg·mL-1）;

0.45 μm微孔濾膜。

1.1.2 標(biāo)準(zhǔn)品和試劑

環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星等標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)于農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所測(cè)試中心;三乙胺、磷酸、磷酸二氫鉀為優(yōu)級(jí)純;甲醇、乙腈均為色譜純（Fisher公司）試劑;水為娃哈哈水。

1.2 色譜條件

色譜柱：phenomenexluna C18（4.6 mm×250 mm，

5 μm）。流動(dòng)相：0.05 mol·L-1磷酸/三乙胺（pH=2.4）-乙腈（體積比82∶18）。流速：1.0 mL·min-1。檢測(cè)波長(zhǎng)：Ex=280 nm，Em=450 nm。進(jìn)樣量：20 μL;采用外標(biāo)法峰面積定量。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

分別把環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、恩諾沙星和沙拉沙星標(biāo)準(zhǔn)品1 000 μg·mL-1，用流動(dòng)相稀釋，達(dá)氟沙星稀釋成20 μg·mL-1，其他三項(xiàng)稀釋成100 μg·mL-1。分別取環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、恩諾沙星和沙拉沙星單品稀釋液

10 μL，流動(dòng)相960 μL，制成含有環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、恩諾沙星和沙拉沙星的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.4 樣品前處理

1.4.1 提取

稱取2.00 g試料于離心管中，加磷酸鹽提取液

10.0 mL，渦旋1 min（渦旋時(shí)間可以長(zhǎng)一些），振蕩

10 min，每分鐘10 000 r離心10 min，上清液轉(zhuǎn)入另一離心管中。用磷酸鹽提取液10.0 mL洗殘?jiān)瑴u旋1 min，振蕩10 min，每分鐘10 000 r離心10 min，合并上清液于同一離心管中，備用。

1.4.2 凈化

備用液過固相萃取柱后，柱子依次用甲醇2.0 mL、磷酸鹽緩沖液2.0 mL預(yù)洗，取上清液5.0 mL過柱，水

2.0 mL淋洗，擠干，進(jìn)行吸附，后用1.0 mL流動(dòng)相洗脫，擠干，收集洗脫液，過膜上機(jī)測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

對(duì)孟村縣30處豬肉樣品中4種氟喹諾酮類藥物的含量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果見表1。

可以看出，孟村縣6個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的豬肉樣品中都含有這4類氟喹諾酮藥物，環(huán)丙沙星的平均值為8.654 μg·kg-1，達(dá)氟沙星的平均值為2.001 μg·kg-1，恩諾沙星的平均值為5.785 μg·kg-1，沙拉沙星的平均值為6.814 μg·kg-1。

3 結(jié)論與討論

河北省滄州市孟村回族自治縣30處采集點(diǎn)的豬肉，經(jīng)檢測(cè)均合格，其環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星含量數(shù)值都低于國(guó)標(biāo)20 μg·kg-1。

但是，居民長(zhǎng)期使用這種含有氟喹諾酮藥物的食品，會(huì)不會(huì)對(duì)身體有害，會(huì)不會(huì)增加身體的耐藥性，當(dāng)身體出現(xiàn)疾病的時(shí)候，再使用此類藥物會(huì)不會(huì)影響到實(shí)際藥物的治療效果等都有待研究，希望有關(guān)人士關(guān)注，加強(qiáng)對(duì)相關(guān)藥物的研究，找到合適的解決方法。

參考文獻(xiàn)：

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（責(zé)任編輯：劉昀）