離子色譜-直接電導法在鹽酸二甲雙胍藥物中二甲胺殘留檢測中的應用

楊 芹，朱鳳姝，邵長冰，李祥群

（江蘇豪森藥業集團有限公司，江蘇連云港 222000）

鹽酸二甲雙胍是目前主要用于治療單純飲食療法控制血糖效果不佳的2型糖尿病，在臨床應用時具有較為滿意的治療效果[1]。二甲胺作為鹽酸二甲雙胍藥物的主要原料之一[2]，其對于機體具有較強烈的刺激作用，如長期接觸二甲胺極易導致眼角膜損傷、皮膚壞死等情況，因此在鹽酸二甲雙胍的生產過程中，應嚴格控制二甲胺的殘留量，以免增加藥物的不良反應[3]。雖然目前可用于二甲胺檢測的方法較多，但其中氣相色譜法對色譜柱有著較大的損傷，因此應用受限。而液相色譜法由于需先行住前衍生，且各項操作較為復雜，使其應用也受到一定限制。而離子色譜法以其較高的靈敏度、優異的重復性和操作便捷等優勢，被廣泛用于多個領域[4]。本文將通過對相關文獻進行整理，總結離子色譜法在用于二甲胺殘留檢測時的應用效果。

1 材料與方法

1.1 儀器

主要設備及儀器見表1。

表1 設備儀器

1.2 試劑

研究所用試劑見表2。

表2 研究試劑

1.3 方法

1.3.1 配制對照品溶液

精準稱取二甲胺鹽酸鹽16.56mg，將其裝入10mL量瓶內，加入少許制備好的超純水，使其溶解并定容。按照1∶1000的比例配制二甲胺鹽酸鹽溶液，并放置在4℃冰箱內冷藏備用。在實驗需要時將其加入適量超純水配制成研究所需濃度的標準工作液，作為對照品溶液使用。

1.3.2 配置供試品溶液

精準稱取10mg的鹽酸二甲雙胍置入到10ml玻璃量瓶中，向其內加入適量的超純水震蕩使鹽酸二甲雙胍藥物充分溶解，然后定容。再按照每1ml溶液中含有4μg二甲胺鹽酸鹽和1mg鹽酸二甲雙胍的比例配置溶液，用作系統適用性溶液備用。所有配置好的溶液均采用0.22μm水系濾膜過濾后進行色譜分析。

1.3.3 色譜條件

研究采用戴安lonpac CS12A（4mm*250mm）陽離子交換柱作為色譜柱，以甲磺酸溶液作為流動相，其濃度為20mmol/L-1，柱溫設定為30℃，流速為1.0mL/min。采用抑制電導法見檢測，抑制電流控制為60mA，電動池溫度設定為35℃，進樣時的體積為25μL。

2 結果

2.1 色譜條件優化

研究可見，二甲胺相對密度為0.680，易溶于水。本次研究采用不同的流速和不同濃度的淋洗液作為色譜條件，分別考察了二甲胺峰以及其他離子峰的分離度，經研究發現，以1.0mg/min作為流速，以20mmol/L作為甲磺酸淋洗液濃度時，物質的分離度最好，因此本次研究以該條件作為色譜條件。

2.2 系統適用性試驗

將制備好的系統適用性溶液、對照品溶液以及空白水，分別按照設計好的色譜方法注入到離子色譜儀內，觀察色譜圖，結果可見，二甲胺峰型較好，約在5.5min時出峰。

2.3 定量限以及檢測限

精準稱取適量二甲胺鹽酸鹽置入量瓶內，加入適量超純水后溶解定容，對其檢測限和定量限進行分析，定量限和檢測限的分別為0.032 8μg/ml和0.120μg/ml。

2.4 線性關系

分 別 配 制0.10μg/ml、0.20μg/ml、0.50μg/ml、1.0μg/ml以及5.0μg/ml和10.0μg/ml濃度的二甲胺對照品溶液，將不同濃度的對照品溶液注入到離子色譜儀內。根據峰值面積計算出濃度曲線，線性回歸方程為Y=0.825X-0.036 1，r=0.9994。結果顯示，當二甲胺鹽酸鹽的濃度在0.1～10.0μg/mL時，線性關系良好。

2.5 回收率試驗

在不含有二甲胺的鹽酸二甲雙胍空白品內加入不同限定濃度的二甲雙胍對照品溶液開展回收率測定實驗，結果表明其具有著良好的回收率，平均回收率在97.7%-99.5%，見表1。

表1 回收率試驗

3 討論

離子色譜-直接導電法是一種常用的檢測手段，其通過液相色譜法來檢測被檢測物中的陰陽離子，進而達到快速、準確檢測的目的，且操作較為簡便，使其應用范圍較廣。本次研究為了能夠有效降低鹽酸二甲雙胍藥品中二甲胺的含量，進而對離子色譜-直接導電法在二甲胺殘留檢測時的應用情況進行分析，并對該方案的線性、定量限、回收率以及重復性等問題進行深入研究，通過研究結果可以看出，該方案在用于二甲胺殘留檢測時，具有較好分離度和靈敏度，且回收率、重復性以及定量等條件均可以滿足臨床檢測需求，故而是一種高效的鹽酸二甲雙胍藥物中二甲胺殘留檢測方案，適宜用于臨床分析和實驗研究，也為鹽酸二甲雙胍合成反應提供了有效的參考研究。

4 結論

鹽酸二甲雙胍藥物中二甲胺殘留量超標將嚴重影響藥品質量，利用離子色譜-直接導電法能夠有效、快速地檢測出其中二甲胺殘留情況，可良好地滿足實驗和臨床需求。