液相色譜質譜法檢測尿液中的痕量甲基苯丙胺

吳 輝

（福建歷思司法鑒定所，福建廈門 361000）

在以往的檢測方法中，尿液中的甲基苯丙胺含量檢測方法檢出限在1ng/mL，該方法檢出限基本上能追溯到吸毒人員一周內吸食甲基苯丙胺；對吸毒人員毛發進行檢測，使用剪刀剪取涉嫌人員頭發時，無法取到毛囊，貼于頭皮撿取也往往只能剪取到1mm甚至更往后的頭發，因此毛發中毒品檢測往往只能夠追溯到吸毒人員15d前或20d前吸食的情況；那么10d以前，20d以內的吸毒情況則很難被檢測到。本實驗使用超高靈敏度的液相色譜質譜法對尿液中甲基苯丙胺進行檢測[1]，由于靈敏度的極大提高，能夠檢測到吸毒人員10d前，乃至20d前吸食甲基苯丙胺的成分。

1 材料與方法

1.1 試劑與材料

甲基苯丙胺標準品（美國Sigma 1mg/mL）、苯丙胺標準溶液（美國Sigma 1mg/mL）、質譜純甲醇、乙腈、甲酸；分析純氨水；實驗用水為一級水；MCX固相萃取柱（Waters Oasis MCX 500mg）。

1.2 儀器與測試條件

（1）儀器： Waters UPLC-TQXS超高效液相色譜串聯三重四極桿質譜、高速離心機（湘儀H1650）、氮吹儀（杭州奧盛WD-12）、漩渦振蕩器（德國IKA）。

（2）色譜條件： RESTEK Ultra PFPP（3μm 100×2.1mm）超高效液相色譜柱；柱溫35℃；流動相A1：B1=30%水（0.1%甲酸）：70%乙腈（0.1%甲酸）0.4mL/min等度洗脫。

（3）質譜條件 ：離子源：ESI+，MRM選擇離子模式，毛細管電壓2.5kV，去溶劑溫度550 ℃，碰撞氣為高純氬氣。

1.3 樣品來源

公安部門送檢兩份尿液檢材，一份尿液的當事人自述12天前有吸食冰毒，另一當事人自述15d前有吸食冰毒。另取2份空白尿液2mL，分別添加10μL和20μL的10ng/mL 的甲基苯丙胺和苯丙胺漩渦混勻，則一份尿液樣品中目標物濃度為50pg/mL，另一份尿液樣品中目標物濃度為100pg/mL。

1.4 制樣

將樣品裝入5mL離心管進行離心，準確移取1mL尿液樣品，進行固相萃取。萃取柱使用5mL 甲醇活化，5mL水平衡，加入1mL尿液樣品后使用10%甲醇水溶液淋洗，加入5mL 5%氨水甲醇溶液洗脫。洗脫液用氮吹儀濃縮至干后加入1mL甲醇復溶，取10μL進樣[2-3]。

1.5 儀器設置

配制50ng/mL甲基苯丙胺和苯丙胺溶液作調諧液，優化質譜參數。甲基苯丙胺錐孔電壓為20，150.1/119.1離子對碰撞能量為10eV，150.1/91.1離子對碰撞能量為16eV；苯丙胺錐孔電壓為20，136.1/119.1離子對碰撞能量為8eV，136.1/91.1離子對碰撞能量為14eV。配制甲基苯丙胺和苯丙胺標準曲線濃度分別為5、10、20、50、100、200、500、1 000pg/mL，各取10μL進樣后，甲基苯丙胺定性離子對為150.1/119.1，定量離子對為150.1/91.1，線性方程為Y=947.618×X+2586.1，r=0.999 6；苯丙胺定性離子對為136.1/119.1，定量離子對為136.1/91.1，線性方程為Y=250.379×X-31.0584，r=0.9996。甲基苯丙胺和苯丙胺線性均良好，且曲線最低濃度點5pg/mL時，甲基苯丙胺信噪比為24.308，苯丙胺信噪比為27.070，滿足定量限信噪比大于10的要求。選擇離子圖見圖1。

表1 甲基苯丙胺標準曲線數據

圖1 200pg/mL甲基苯丙胺和苯丙胺MRM選擇離子圖

2 結果

50pg/mL目標物尿液樣品經提取10μL上機檢測，檢出甲基苯丙胺含量為38.1pg/mL，檢出苯丙胺含量為34.5pg/mL；100pg/mL目標物尿液樣品經提取10μL上機檢測，檢出甲基苯丙胺含量為75.8pg/mL，檢出苯丙胺含量為71.1pg/mL。則該提取方法中甲基苯丙胺的回收率為76.0%，苯丙胺的回收率為70.4%。甲基苯丙胺定量標準曲線見圖2。

圖2 甲基苯丙胺定量標準曲線

自述12d前有吸食冰毒情況的尿液中檢出甲基苯丙胺含量為191.8pg/mL，檢出苯丙胺含量為192.1pg/mL；自述15d前有吸食冰毒情況的尿液中檢出甲基苯丙胺含量為12.9pg/mL，檢出苯丙胺含量為23.0pg/mL。

3 討論

對尿液中甲基苯丙胺使用MCX固相萃取，樣品提取效果好，回收率高，同時實際樣品測試數據結果和當事人供述情況相符，因此該方法能有效對10天，乃至15天前涉嫌吸毒人員的尿液進行鑒定，為辦案單位提供相關證據，提高辦案效率。