lncRNAs在三陰性乳腺癌發生發展中的作用

涂強

摘要：乳腺癌是一種發生在乳腺腺上皮組織的一種惡性腫瘤，約占全部乳腺癌的1/5，常見于年輕乳腺癌患者。三陰性乳腺癌相較于其他類型乳腺癌生長迅速，是乳腺癌中預后較差的一個分類。目前，三陰性乳腺癌的特定突變與患者的疾病預后、藥物治療效果的關系尚未明確，導致三陰性乳腺癌一直缺乏有效的生物標志物。近年研究表明長鏈非編碼RNA（lncRNAs）廣泛參與基因沉默、轉錄激活、細胞周期和分化、染色體構型修飾等眾多生理功能，成為腫瘤研究領域的新熱點。本文就三陰性乳腺癌生物學行為及臨床病理特征、lncRNAs概述及其在三陰性乳腺癌發生、發展中的作用作一綜述。

關鍵詞：三陰性乳腺癌;長鏈非編碼RNA;靶向治療;耐藥性

Abstract：Breast cancer is a malignant tumor that occurs in the epithelial tissue of the breast gland， accounting for about 1/5 of all breast cancers， and is common in young breast cancer patients. Compared with other types of breast cancer， triple-negative breast cancer grows rapidly， and it is a classification with poor prognosis in breast cancer. At present， the relationship between specific mutations in triple-negative breast cancer and the patient's disease prognosis and drug treatment effects is not yet clear， resulting in the lack of effective biomarkers for triple-negative breast cancer. Recent studies have shown that long-chain non-coding RNAs （lncRNAs） are widely involved in many physiological functions such as gene silencing， transcription activation， cell cycle and differentiation， and chromosomal configuration modification， which has become a new hotspot in the field of cancer research. This article reviews the biological behavior and clinicopathological characteristics of triple-negative breast cancer， the overview of lncRNAs， and its effect in the occurrence and development of triple-negative breast cancer.

Key words：Triple negative breast cancer;Long non-coding RNA;Targeted therapy;Drug resistance

女性乳腺主要是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體以及脂肪組成。三陰性乳腺癌早期不具備典型的癥狀和體征，但是在乳腺癌發展到后期時會向肺部、肝臟、骨骼、大腦等器官發生擴散及轉移，對其細胞組織產生破壞作用，并損害其正常的生理功能，同時癌細胞轉移率較高，復發率居高不下，若是未實施及時治療，病情后期往往會出現遠處轉移，嚴重影響患者生命安全[1]。特定基因的異常表達以及表觀突變累積在刺激乳腺癌發生、發展的過程中起到十分重要的作用[2]。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNAs，lncRNAs）是基因組序列中的一種，研究表明[3]，LncRNAs異常表達具有促進或抑制腫瘤發生、發展的生物學功能。基于此，本研究就三陰性乳腺癌特殊的生物學行為及臨床病理特征、lncRNAs概述及其在三陰性乳腺癌產生、進展、增殖及凋亡中的作用作一綜述，以期臨床治療提供借鑒。

1三陰性乳腺癌生物學行為及臨床病理特征

三陰性乳腺癌特指其雌激素受體、孕激素受體及人表皮生長因子受體2均呈陰性且發生轉移的乳腺癌患者。三陰性乳腺癌是基因芯片技術應用于臨床，并根據細胞形態和細胞表面受體分出的一個乳腺癌細胞類型，其病理特征表現直接或間接來源于基底樣乳腺癌，也屬于基底樣乳腺癌其中的一個亞型。該類乳腺癌的組織往往為三級，增殖細胞比例較高，C-kit原癌基因、P53人體抑癌基因、人表皮生長因子受體表達大多數為表現為陽性，基底細胞標志物細胞角蛋白（CK）5/6、17表現為陽性[3]。與其他類型乳腺癌相比，三陰性乳腺癌的病理生物學行為明顯呈現出惡性度更高的特征，且以其高侵襲性、低存活率以及缺乏有效的治療手段著稱。

2 lncRNAs概述

2.1 lncRNAs分類? 從哺乳動物基因組轉錄出多種不能編碼蛋白質的lncRNAs，其通過控制細胞核中的核結構和轉錄以及通過調節細胞質中的mRNA穩定性，翻譯和翻譯后修飾而成為基因表達網絡中的重要調節劑。lncRNA是不翻譯成多肽的RNA，按照長度不同，短于200 nt的歸為小非編碼RNA（sncRNAs），長于200 nt的歸為長非編碼RNA（lncRNAs）。根據染色體上與編碼基因的相對位置將lncRNAs分為反義型、內含子型、反向型、基因間型、啟動子上游型、啟動子型、轉錄起始位點型。

2.2 lncRNAs優勢? lncRNAs的本質是RNA，是由核苷酸組成的長鏈。lncRNAs有以下幾個優勢：①可以輕松結合同源DNA序列（轉錄lncRNAs的基因和序列類似的基因）;②可以輕松結合同源RNA序列;③自身具備絲帶般特征，能夠折疊為復雜的二級結構，輕松結合多樣蛋白質。同時，lncRNAs可以參與大量不同的細胞過程，如染色質重塑、調節轉錄和翻譯、RNA穩定、細胞支架和先天免疫等。IncRNA-a是一類具有增強子特性的lncRNAs，可以正調控附近的基因，這一類中的一個著名成員是ncRNA-a7，可以調控Snail轉錄因子;另一個成員是競爭性內源RNA（ceRNAs），與編碼蛋白的轉錄本共享一段序列，可以競爭性結合其調控的分子從而發揮功能[4]。盡管大多數注釋的lncRNAs與mRNA類似，但它們的豐度較低且進化保守性較低，且與mRNA相比含有較少的外顯子。與mRNAs相比，lncRNAs核定位的情況通常更多，一是由于無效的剪接和聚腺苷酸化以及染色質上外泌體降解的敏感性;二是lncRNAs含有與核蛋白有關的順式元件會阻止核輸出;三是lncRNAs源自Alu元件的短C富集序列是靈長類特異性的短散布核元件（SINE），通過與核基質蛋白HNRNPK的結合促進lncRNA核保留。此外，具有非常規形式的lncRNAs由于其不尋常的生物發生途徑和特定的順式元件也會在細胞核中積累。

2.3 lncRNAs與腫瘤的關系? 大部分lncRNAs在腫瘤中表現特征性較為明顯，在組織分化過程中也表現出明顯的時空特異性。lncRNAs包括與增強子和啟動子相關的長鏈RNAs，涉及細胞核結構的動態連接，且影響染色質結構，調控染色質重塑。lncRNAs能承擔作為蛋白-DNA或者蛋白質-蛋白支架、miRNA海綿、蛋白質誘餌和參與翻譯調控等多項功能，影響表觀遺傳修飾、合成蛋白質、調節激素信號、細胞核構架等，其中的任意一個環節出現異常均可使得腫瘤細胞產生惡變。有研究表明[5]，腫瘤的浸潤、轉移和血管生成的進程中伴隨lncRNAs表達的變化。而上述行為的變化會引起腫瘤細胞的代謝改變，即lncRNAs能夠利用影響糖代謝、脂肪代謝來影響腫瘤的生成。

lncRNAs的結構與核苷酸序列是眾多細胞基礎功能的決定因素，細胞功能的多樣性在很大程度上依賴于其結構的可塑性。與蛋白質一樣，lncRNAs也同樣有著一級結構、二級結構、三級結構，其中在一級結構中與蛋白質有著較為類似的核酸構成;在二級結構中與堿基配對密切相關，并參與其中，也是最基本的結構域功能區域。目前，針對一級結構與二級結構之間的轉變過程的研究一直在進行，且二級結構與三級結構間相互作用的過程中對分子調節產生的重要影響也在研究中，但尚無明確定論。

3 lncRNAs在乳腺癌中的作用

3.1 lncRNAs在乳腺癌產生中的作用? 三陰性乳腺癌患者早期乳房內有無痛性質硬的單發腫塊，短時間內腫塊進行性增大，可伴隨出現乳頭溢液，乳頭改變，提示乳腺癌產生[6]。劉艷華等[7]和呂明明等[8]通過對乳腺癌組織與外周血中的lncRNA表達進行分析，結果顯示血清lncRNAs表達水平對乳腺癌的診斷敏感度和特異度均較滿意，表明lncRNAs在乳腺癌發展過程中具有重要作用。提示lncRNA在乳腺癌組織以及外周血中存在差異表達，參與乳腺癌的發生，可能成為臨床診斷與治療乳腺癌的新靶點。

3.2 lncRNAs在乳腺癌進展中的作用? 在出現無痛小腫塊后，皮膚出現橘皮樣改變，乳腺出現酒窩征，提示乳腺癌處于進展期[9]。殷飛等[10]通過對lncRNAs GAS5在乳腺癌組織中的表達水平及臨床意義進行研究，結果得出lncRNA GAS5在乳腺癌組織中的表達顯著降低，與腫瘤進展有關，可作為預測乳腺癌的獨立標志。熊晶等[11]研究也表明，乳腺癌發生、發展等過程受到多基因、多因素的調控，lncRNA分子可作為潛在地評估乳腺癌患者預后的分子標志物。石建國[12]研究認為，lncRNA是利用表觀遺傳學對基因產生調控作用，且其表達異常與眾多疾病有著密切的關系。Wang SH等[13]研究認為，乳腺癌中以及癌旁組織中的lncRNA-ROR比較而言，前者的表達量高，受雌激素、孕激素影響更大，可能是上皮-間充質轉化（EMT）的重要調控因子，通過調控miRNA表達，從而促進腫瘤細胞的增殖、侵襲及遷移等過程。Sun H等[14]研究發現，lncRNA H19過度表達可促進乳腺癌的生長與發展。上述lncRNA的特異度表達充分說明了其與乳腺癌的發生有著密不可分的聯系，這也為下一步研究乳腺癌相關lncRNA的功能奠定了基礎。

3.3 lncRNAs在乳腺癌增殖及凋亡中的作用? 伴隨著癌細胞的不斷侵襲，同側腋窩淋巴結、鎖骨下淋巴結甚至是鎖骨上對側淋巴結可出現腫大，癌細胞一旦松散脫落，游離的癌細胞就轉移向內臟，可能隨著血液或淋巴液向全身擴散，此時處于增殖期。乳腺癌的增殖是被多基因調控、多步驟發展的一個復雜過程，涵蓋腫瘤細胞生長、發展和增殖等一系列過程。張瑞華等[15]研究顯示，lncRNA SNHG7在乳腺癌組織和乳腺癌細胞系中呈高表達，沉默lncRNA SNHG7后，細胞的增殖和侵襲遷移能力均降低，提示lncRNA SNHG7調控乳腺癌細胞的增殖和侵襲遷移可能與β-catenin蛋白的表達下調和p-β-catenin蛋白降解增加有關。因lncRNAs自身功能較為多樣，和腫瘤密切相關的作用有保持細胞的生長和增殖、對生長抑制因子進行躲避、確保正常進行連續復制、刺激轉移及侵襲、誘發生成血管、阻礙細胞凋亡。Gomez-maldonado L等[16]研究指出，lncRNA同樣可以作為腫瘤抑制因子來調節乳腺癌的浸潤、侵襲、轉移過程。針對lncRNA能刺激腫瘤浸潤、侵襲、轉移的作用機制，臨床進行治療的實踐中能利用藥物來下調lncRNA的表達，繼而達到實現癌細胞凋亡的效果，可以為乳腺癌的靶向治療提供新的靶點。王遠鶴等[17]研究表明，HOTAIR作為一種反式激活lncRNA的機制敏感基因，對動脈及靜脈內皮細胞都具有機械敏感性，通過抑制HOTAIR能抑制胃癌的增殖能力。房群[18]研究指出，lncRNA UCA1利用下調miR-27b表達增強胃癌耐藥性。楊卉[19]研究認為，lncRNA MALAT-1的表達與三陰性乳腺癌相關，抑制三陰性乳腺癌MDA-MB-231細胞株中MALAT-1的表達使癌細胞的增殖受抑制，侵襲和遷移能力均明顯下降，說明MALAT-1有望成為診斷三陰性乳腺癌的潛在生物學標志物和靶向治療的新靶點。也有研究表明[20，21]，lncRNA可調節多種致癌信號通路，包括MAPK信號途徑，黏著斑、過氧化酶增殖物激活受體（PPAR）信號途徑，而PPAR的過度表達會阻斷蒽環類藥物的抗增殖能力，并通過與核轉錄因子相互作用抑制細胞凋亡，降低化療敏感性，因此lncRNA-ATB、lncRNA-ARA高表達的乳腺癌患者更容易出現曲妥珠單抗耐藥。以上研究均表明lncRNA可以作為今后乳腺癌靶向治療的一個有著較為廣闊前景的研究方向。

4總結

早期三陰性乳腺癌不具備典型的癥狀和體征，但是在乳腺癌發展到后期時會向肺部、肝臟、骨骼、大腦等器官發生擴散及轉移，對其細胞組織產生破壞作用，并損害其正常的生理功能。目前針對乳腺癌的早期診斷、控制其轉移發展仍是臨床研究的重點。lncRNAs可通過與蛋白質、DNA、RNA相互作用，在轉錄水平、表觀遺傳或者轉錄后水平等方面調控基因表達，并廣泛參與乳腺癌的發生、發展、增殖、凋亡等各個重要過程。lncRNAs以分子靶向藥物治療展現出較為廣闊的發展前景，相信隨著對lncRNAs進行大量的隨機對照試驗研究，其能更好的用于乳腺癌的臨床診斷與治療中，為廣大患者帶來福音。

參考文獻：

[1]王蔚文.臨床疾病診斷與療效判斷標準[M].北京：科學技術文獻出版社，2010：1371-1375.

[2]許濤，李萍，龐國蓮，等.乳腺癌組織miRNAs的異常表達及犀黃丸對體外乳腺癌細胞候選miRNAs的表達影響[J].中國醫師雜志，2019，21（7）：979-983.

[3]張毅，袁梅，劉薇，等.老中青三年齡段三陰性乳腺癌的病理生物學行為及預后影響因素分析[J].中華普通外科雜志，2014，29（11）：873-875.

[4]Koduru SV，Tiwari AK，Leberfinger A，et al.Abstract 3499：Differentially expressed small noncoding RNAs in triple-negative breast cancer[J].Cancer Res，2017，77（13）：3499.

[5]付雷，孫琰.伴髓樣特征的非特殊型浸潤性乳腺癌超聲表現1例[J].臨床超聲醫學雜志，2019，21（10）：728-728.

[6]梁之孔.膠質瘤細胞U87中NSPc1與lncRNAs分子的功能性互作研究[D].河北醫科大學，2017.

[7]劉艷華，孫三元，鹿存濤.長鏈非編碼RNA在乳腺癌組織與外周血中的表達[J].中華臨床醫師雜志，2016，10（12）：1710-1713.

[8]呂明明，許楠，王鳳良，等.長鏈非編碼RNA在乳腺癌患者外周血與癌組織中的表達[J].中華乳腺病雜志，2015，9（4）：26-30.

[9]周潔.動態增強磁共振成像和高頻彩超在乳腺癌診斷中的應用比較[J].影像研究與醫學應用，2017，1（14）：143-144.

[10]殷飛，倪毅.長鏈非編碼RNA GAS5在乳腺癌組織中的表達水平及臨床意義[J].中國婦幼保健，2018，33（23）：5369-5371.

[11]熊晶，王渝，王君，等.乳腺癌組織中lncRNA CCHE1水平及其臨床意義[J].臨床腫瘤學雜志，2018，23（6）：519-523.

[12]石建國.長鏈非編碼RNA-ROR在腎癌中的表達及臨床意義的研究[D].山東大學，2017.

[13]Wang SH，Zhang MD，Wu XC，et al.Overexpression of LncRNA-ROR predicts a poor outcome in gallbladder cancer patients and promotes the tumor cells proliferation，migration，and invasion[J].Tumour Biol，2016，37（9）：12867-12875.

[14]Sun H，Wang G，Peng Y，et al.H19 lncRNA mediates 17beta-estradiol-induced cell proliferation in MCF-7 breast cancer cells[J].Oncol Rep，2015，33（6）：3045-3052.

[15]張瑞華，勞偉思，許英，等.LncRNA SNHG7通過調控β-catenin蛋白影響乳腺癌細胞的增值、遷移和侵襲[J].嶺南現代臨床外科，2019，19（1）：28-33.

[16]Gomez-maldonado L，Tiana M，Roche O，et al.EFNA3 long noncoding RNAs induced by hypoxia promote metastatic dissemination[J].Oncogene，2015，34（20）：2609-2620.

[17]王遠鶴，劉勇，劉飛.lncRNA HOTAIR在胃癌中的表達及對胃癌細胞增殖及自噬的影響[J].解剖科學進展，2019，25（3）：289-292.

[18]房群.LncRNA UCA1通過下調miR-27b表達增強胃癌多藥耐藥性的研究[D].山東大學，2017.

[19]楊卉.lncRNAs在乳腺癌中的表達及lncMALAT-1對三陰性乳腺癌細胞增殖和侵襲性的影響[D].江蘇大學，2018.

[20]Jang M，Huang O，Xie Z，et a1.A novel long non-coding RNA-RA：adriamycin resistance-associated[J].Biochem Pharmacol，2014，87（2）：254-283.

[21]Shi SJ，Wang LJ，Yu B，et al.LncRNA-ATB promotes trastuzumab resistance and invasion-metastasis cascade in breast cancer[J].Oncotarget，2015，6（13）：11652-11663.

收稿日期：2020-03-21;修回日期：2020-04-15

編輯/杜帆