吸煙COPD 患者中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)凋亡基因CHOP表達(dá)研究

甘桂香 胡瑞成 戴愛(ài)國(guó) 譚雙香

1湖南省人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科 臨床轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究所,長(zhǎng)沙410016;2湖南中醫(yī)藥大學(xué),長(zhǎng)沙410016

COPD 是危害中老年健康的全球高發(fā)病,病情常呈進(jìn)行性發(fā)展,最終導(dǎo)致患者勞動(dòng)能力喪失和死亡,造成沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。香煙煙霧中的氧化性物質(zhì)可以通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 (endoplasmic reticulum stress,ERS)導(dǎo)致肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞凋亡,從而促進(jìn)COPD 的發(fā)生、發(fā)展[1-2]。而CCAAT 增強(qiáng)子結(jié)合蛋 白 同 源 蛋 白 (CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein,CHOP)僅在ERS狀態(tài)下表達(dá)明顯升高,其作為ERS的標(biāo)志,在正常生理狀態(tài)下基本檢測(cè)不到。本研究采用原位缺口末端標(biāo)記法 (terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)方法檢測(cè)肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞的凋亡,本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)、免疫印跡、聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)COPD 患者中CHOP 的表達(dá),從而為COPD 的防治提供新方向。

1 對(duì)象與方法

1.1對(duì)象與試驗(yàn)試劑及儀器

1.1.1臨床標(biāo)本的收集 臨床肺組織標(biāo)本均來(lái)自于湖南省腫瘤醫(yī)院2008年6月至2010年3月因肺鱗癌行肺葉切除術(shù)的患者。研究均獲得湖南省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)的批準(zhǔn) (科研批號(hào)2011-10),并在該委員會(huì)的監(jiān)督下進(jìn)行,所有參與人員均被告知詳情并且簽署知情同意書(shū)。且所有患者術(shù)后經(jīng)病理確診均為肺鱗癌,且術(shù)前均未接受生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、放射治療及化學(xué)藥物等治療。患者術(shù)前均詳細(xì)詢問(wèn)病史、體格檢查,并且抽血查血常規(guī)及凝血功能、血糖、肝腎功能、自身抗體譜、甲狀腺功能、輸血前四項(xiàng)、心電圖、胸部CT 掃描等,并行肺功能、血?dú)夥治觥⒍嗥绽粘曅膭?dòng)圖等檢查。并且按照中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)慢性阻塞性肺疾病學(xué)組2007 年制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]進(jìn)行COPD 診斷。……