中藥復方筋脈通對鏈脲佐菌素誘導糖尿病大鼠肝臟損傷和脂肪變性的保護作用

孫青 薛曉偉 閆斌 田國慶 梁曉春

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是一種與胰島素抵抗和遺傳易感性密切相關的代謝應激性肝損傷，其疾病譜包括非酒精性肝脂肪變、非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis，NASH)、肝硬化和肝細胞癌[1-2]。近年來，胰島素抵抗和肥胖在1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus，T1DM)發病機制中的作用受到關注[3]。臨床研究發現成人T1DM患者NAFLD發病風險增加[4-5]；研究證實鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導T1DM大鼠可見肝臟脂肪變性[6-7]，其具體機制尚不清楚，缺乏有效治療方法。本研究擬初步探索中藥復方筋脈通對STZ誘導糖尿病大鼠肝臟損傷和脂肪變性等表型的保護作用，為進一步機制研究奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與試劑

6～8周齡雄性SD大鼠，體重180～200 g，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，許可證號：SCXK(京)2011-0004。于北京協和醫院動物實驗室SPF級環境飼養，維持飼料喂養，進食、飲水不限。筋脈通膠囊為中國醫學科學院北京協和醫院院內制劑，由菟絲子10 g、女貞子10 g、水蛭3 g、延胡索10 g、桂枝10 g、細辛3 g等組成，每粒含生藥0.35 g，由北京九龍制藥廠加工生產(批號120119)。STZ購自美國Sigma-Aldrich公司；血糖儀購自美國Abbott公司；蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining，HE)液購自北京九州柏林生物科技有限公司；Masson三色染色液購自珠海貝索生物技術有限公司。

1.2 動物分組及給藥

SD大鼠適應性喂養3天，隨機分正常對照組和糖尿病組和筋脈通組，每組各8只。造模前禁食過夜，正常對照組注射等量的枸櫞酸鹽緩沖液，糖尿病組和筋脈通組一次性腹腔注射1%STZ 55 mg/kg(0.1 mmol/L枸櫞酸鹽緩沖液配制，pH 4.5)。72小時后用血糖儀測定尾尖血糖，正常對照組大鼠血糖<7.0 mmol/L，糖尿病組和筋脈通組大鼠血糖≥16.7 mmol/L為造模成功，筋脈通組按成人劑量10倍(0.876 g·kg-1·d-1)灌胃，每日1次，糖尿病組和筋脈通組灌胃等量的生理鹽水，連續灌胃12周，每4周監測血糖、體重。

1.3 組織取材

灌胃12周后禁食過夜，次日空腹測量體重，予12%烏拉坦腹腔注射麻醉，頸動脈取血，離心取血清并分裝，-80℃保存，用于檢測肝功、血脂。……