皮損組織Cx26 蛋白及信使RNA 表達與PV 患者PASI 評分的關聯性

張雪嬌 高丁 石衛華

尋常型銀屑病（psoriasis vulgaris ，PV）為臨床常見慢性炎癥性皮膚病，臨床表現為紅色丘疹、銀白色鱗屑，具有病程長，易復發等特點，約30%銀屑病患者發病機制與遺傳、免疫、感染及環境等因素相關[1-3]。目前，部分學者認為PV 發生、發展同細胞間信息傳遞異常有關。相關研究指出，Cx26蛋白為縫隙連接功能單位，主要作用于細胞間信息傳遞，Cx26 蛋白高表達可能與PV 發病相關，但PV 患者Cx26 蛋白水平是否與健康人群有別，臨床研究較少[4-6]。基于此，本研究選取我院PV 患者60 例，旨在探究皮損組織Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達與其皮損面積和嚴重程度指數（psoriasis area and severity index ，PASI）評分的關聯性。現報告如下。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

經本院倫理委員會審批通過，2018 年7 月—2019 年7 月選取本院PV 患者60 例作為研究組，其中女24 例，男36 例；年齡24 ～65 歲，平均（44.12±8.12）歲；另選同期健康體檢者32例作為對照組，其中女14 例，男18 例；年齡25 ～67 歲，平均（43.78±7.89）歲。兩組基線資料差異無統計學意義（P ＞0.05）。

1.2 選例標準

納入標準：（1）研究組患者均符合PV 相關診斷標準[7]；（2）對照組均為體檢健康者；（3）所有研究對象均知曉本研究，已簽署同意書。排除標準：（1）膿皰型銀屑病；（2）有精神疾病史者；（3）關節病型銀屑病；（4）血液系統疾病患者；（5）合并其他腎臟疾病者；（6）免疫功能缺陷者。

1.3 方法

1.3.1 標本采集 采用環鉆孔器獲取研究組皮損處組織及對照組正常皮膚組織，進行液氮速凍保存。

1.3.2 檢測方法 采用免疫熒光染色法和B203LED 型光學顯微鏡（重慶奧特光學儀器有限公司）檢測皮損組織Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平，所用免疫組化試劑盒、DAB 顯色試劑盒、基因組擴增試劑盒均購自美國Sigma 公司，由相同檢驗科高年資醫師嚴格依照儀器、試劑盒說明書完成操作規程。

1.4 觀察指標

（1）比較兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平。（2）比較研究組不同病情程度之間（輕度、中度、重度）Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平。病情程度根據PASI 評分分級，重度≥30 分、中度15 ～29 分、輕度＜15 分[8]。PASI 評分=皮損面積×[0.1×（Dh+Ih+Eh）+0.2×（Du+Iu+Eu）+0.3×（Dl+Il+El）+0.4×（Dt+It+Et）]，E：紅斑，I：浸潤，D：鱗屑，h：頭（包括頸），u：上肢，t：下肢，l：軀干。皮疹部位均為5 個等級：0 ～4分。皮損面積為0 ～6 分，總分0 ～72 分，得分越高，皮損越嚴重。（3）Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平與PASI 評分的關聯性。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較

研究組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平均高于對照組（P＜0.05），見表1。

2.2 研究組不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較

研究組輕度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平低于中度，中度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平低于重度（P＜0.05），見表2。

2.3 Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平與PASI 評分的關聯性分析

經Pearson 分析可知，PASI 評分與Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平存在明顯正相關關系（r1=0.625，P1=0.004；r2=0.541，P2=0.012）。

3 討論

Cx 蛋白為細胞縫隙連接基本功能單位，細胞之間通過縫隙連接進行物質、信息及能量傳遞交換，Cx 蛋白水平可直接影響細胞增殖、分化、新陳代謝[9-10]。相關研究指出，Cx26 可調節細胞間信息傳遞及分化，于機體毛囊外毛根鞘及內耳呈現高表達，Cx26異常突變與皮膚損傷、耳聾密切相關[11-12]。本研究結果顯示，研究組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平均高于對照組，提示PV患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平呈異常高表達狀態。相關研究指出，PASI 評分系統對評估銀屑病患者病情嚴重程度及預后具有重要臨床意義，評分越高皮損越嚴重[13]。本研究結果發現，研究組輕度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平低于中度，中度患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平低于重度，可見，隨著銀屑病患者PASI 評分升高，Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平逐漸升高；進一步經Spearman 分析可知，PASI 評分與Cx26蛋白含量及信使RNA 表達水平存在明顯正相關關系。可見，Cx26蛋白含量及信使RNA 表達水平與PASI 評分關系密切，動態監測Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平有助于判斷銀屑病患者病情進展及嚴重程度。

表1 兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較（）

表1 兩組Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較（）

組別 例數 Cx26 蛋白含量 Cx26 信使RNA研究組 60 0.60±0.04 1.76±0.09對照組 32 0.38±0.03 1.48±0.06 t 值 - 29.752 17.824 P 值 - ＜0.001 ＜0.001

表2 研究組不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較（）

表2 研究組不同病情程度Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平比較（）

注：a 表示與中度比較，P ＜0.05；b 表示與重度比較，P ＜0.05

病情程度 例數 Cx26 蛋白含量（bp） Cx26 信使RNA（ng/mL）輕度 20 0.48±0.02a 1.56±0.08a中度 26 0.59±0.04b 1.78±0.09b重度 14 0.72±0.05 1.94±0.11 F 值 - 169.432 73.922 P 值 - ＜0.001 ＜0.001

綜上所述，PV 患者Cx26 蛋白含量及信使RNA 表達水平與PASI 評分密切相關，可作為評判疾病進展、預后的指標，為臨床治療提供指導依據。