苯磺貝他斯汀片中基因毒性雜質苯磺酸乙酯與苯磺酸異丙酯的含量測定

舒理建 樓賽麗 吳晨皓 盧鑫鑫 邵旭民（浙江普洛康裕制藥有限公司，浙江 東陽322118）

苯磺貝他斯汀是非鎮靜類高選擇性組胺受體拮抗劑，對肥大細胞具有穩定作用，能夠阻止嗜酸性粒細胞遷移至炎癥組織，并可抑制白細胞介素-5、白三烯B4（LTB4）和血小板活化因子（PAF），減輕過敏炎癥，是一種高效的抗過敏藥物，不良反應較輕微。[1-3]苯磺貝他斯汀的合成過程中采用了乙醇和異丙醇，易與苯磺酸反應生成苯磺酸乙酯和苯磺酸異丙酯。兩者為基因毒性雜質，人用藥物注冊技術要求國際協調會議（ICH）于2014年發布M7（基因毒性雜質指南）。指南中對基因毒性雜質限度計算做了指導，計算得出苯磺貝他斯汀中含苯磺酸乙酯和苯磺酸異丙酯的限度均為75 ppm。歐洲藥典采用液相質譜聯用法進行苯磺酸乙酯含量測定，但儀器昂貴，在藥企不能廣泛適用。所以，建立了該方法并做了方法學驗證。

1 儀器與材料

1260 高效液相色譜儀（紫外檢測器，美國Agilent 公司）；MILLIPOR超純水機（德國默克公司）；DK-360HTD超聲清洗儀（深圳市得康洗凈電器有限公司）；XS105十萬分之一電子分析天平（瑞士梅特勒公司）。乙腈（色譜純，德國merck公司）；磷酸（色譜純，德國CNW公司）。苯磺貝他斯汀片（日本田邊三菱制藥株式會社）；苯磺酸乙酯對照品（TCI 公司）；苯磺酸異丙酯對照品（自制）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

采用ACE 3 C8色譜柱(150*4.6 mm，3 um)；流動相為乙腈—0.1%磷酸水溶液=1：3，等度洗脫；檢測波長為220 nm；流速為0.9 ml×min-1；柱溫30 ℃；進樣量為20 ul。

2.2 溶液的配制

空白溶劑（稀釋劑）： 取乙腈和水，以95：5比例混合，即得。

苯磺酸乙酯對照品儲備液的配制：精密稱取苯磺酸乙酯約144 mg，置50 ml 量瓶中，用稀釋劑溶解，并稀釋至刻度，搖勻；……