2633 例β 珠蛋白生成障礙性貧血的基因型檢測(cè)結(jié)果分析

（中國(guó)科學(xué)院大學(xué)深圳醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518107）

0 引言

據(jù)有關(guān)資料顯示，β 珠蛋白生成障礙性貧血具有較高的患病率，其是我國(guó)廣東及廣西地區(qū)常見(jiàn)的一種遺傳疾病，從不同程度上對(duì)綜合人口素質(zhì)及患者身體健康造成了影響[1]。現(xiàn)階段，針對(duì)這一疾病的治療尚無(wú)治愈方法，而基因檢測(cè)在重型β 地貧患者出生率降低中具有重要作用，所以，應(yīng)及早進(jìn)行基因診斷與β 地貧攜帶者篩查[2]。但是，因?yàn)樵摬』疾∪巳号c民族及地區(qū)分布存在緊密聯(lián)系，所以，本次關(guān)于β 地貧基因的研究具有重大意義。當(dāng)前，重型及中間型地貧篩查，可通過(guò)血紅蛋白電泳和血液常規(guī)等進(jìn)行地貧初篩，但對(duì)于輕型且無(wú)顯著癥狀的β 地貧攜帶患者而言，其篩查難度較大[3]。基于此，本研究針對(duì)深圳光明地區(qū)516 例無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者基因檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，詳情如下。

1 資料與方法

1.1 資料

隨機(jī)選取2018 年1 月至2019 年4 月本院接收的2633 例受檢人員，包括婚檢、孕檢和疑似患者。男、女例數(shù)比為963:1670，年齡分布8-70 歲，平均（36.3±1.3）歲，地區(qū)分布：農(nóng)村、城鎮(zhèn)分別有900 例和1733 例。其中，無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者516 例。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確診為無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血[4]；②由患者家屬簽署知情研究同意書(shū)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天系統(tǒng)性疾病；②伴有心、肝、腎器官功能不全；③臨床資料不完整。

1.2 方法

所有受檢者采用乙二胺四乙酸二鉀抗凝管采集靜脈血，進(jìn)行血常規(guī)和α、β 珠蛋白生成障礙性貧血基因型檢測(cè)。基因分型采用PCR 擴(kuò)增結(jié)合膜導(dǎo)流雜交技術(shù)。提取標(biāo)本中的DNA 進(jìn)行特異性擴(kuò)增，將擴(kuò)增產(chǎn)物與標(biāo)記探針的尼龍膜在導(dǎo)流雜交儀上進(jìn)行導(dǎo)流雜交，然后通過(guò)化學(xué)顯色進(jìn)行結(jié)果判讀。每次實(shí)驗(yàn)均設(shè)有陰陽(yáng)對(duì)照、質(zhì)控標(biāo)本，有復(fù)查規(guī)則，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確。

1.3 試劑與儀器

廣東潮州凱普公司提供的配套提取、擴(kuò)增和尼龍膜雜交試劑及擴(kuò)增儀、導(dǎo)流雜交儀。

1.4 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)受檢查人員基礎(chǔ)資料、基因型構(gòu)成分布情況及無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者基礎(chǔ)資料。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 26.0 整理本研究數(shù)據(jù)，計(jì)量資料采用（）表示（t檢驗(yàn)）；計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示（χ2檢驗(yàn)）；兩組比較經(jīng)P檢驗(yàn)，P＜0.05 代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 統(tǒng)計(jì)分析2633 例接受檢查人員一般資料

2633 例接受檢查人員一般資料統(tǒng)計(jì)可見(jiàn)，男性接受檢查者平均年齡為（36.3±1.2）歲，其中城鎮(zhèn)受檢者625 例，農(nóng)村地區(qū)受檢查者338 例；女性接受檢查者平均年齡為（36.9±1.4）歲，城鎮(zhèn)受檢者1108 例，農(nóng)村地區(qū)受檢查者562 例。無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血的檢出例數(shù)為516 例，陽(yáng)性檢出率為19.38%，詳見(jiàn)表1、圖1。

表1 2633 例接受檢查人員一般資料統(tǒng)計(jì)分析[n(%)]

圖1 2633 例接受檢查人員一般資料統(tǒng)計(jì)

2.2 統(tǒng)計(jì)516 例無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血的檢出患者基因型構(gòu)成分布情況

516 例受檢查人員基因型構(gòu)成分布統(tǒng)計(jì)可見(jiàn)，CD41-42/N 在β-珠蛋白生成障礙性貧血總數(shù)中的占比分別為37.98%，IVS-Ⅱ-654/N 在β-珠蛋白生成障礙性貧血總數(shù)中的占比分別為21.51%，CD17/N在β-珠蛋白生成障礙性貧血總數(shù)中的占比分別為17.44%，以上三種是占比較高的類(lèi)型，詳細(xì)統(tǒng)計(jì)如表2、圖2。

表2 516 例無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血的檢出患者基因型構(gòu)成分布情況統(tǒng)計(jì)[n(%）]

圖2 516 例無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血的檢出患者基因型構(gòu)成分布情況統(tǒng)計(jì)

2.3 統(tǒng)計(jì)分析無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者一般資料

516 例無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者一般資料統(tǒng)計(jì)顯示，男120 例，占比為23.26%，年齡在8-64 歲，平均（36.0±1.1）歲；女396 例，占比為76.74%，年齡在10-62 歲，平均（36.2±1.2）歲；男與女年齡統(tǒng)計(jì)對(duì)比差異不顯著，經(jīng)計(jì)算t=1.629，P=0.104；無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），農(nóng)村地區(qū)無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者的檢出例數(shù)為162，占農(nóng)村地區(qū)受檢者的18.00%（162/900），城鎮(zhèn)地區(qū)無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者的檢出例數(shù)為245，占城鎮(zhèn)地區(qū)受檢者的14.14%（245/1733），城鎮(zhèn)患者與農(nóng)村患者例數(shù)統(tǒng)計(jì)對(duì)比差異顯著，經(jīng)計(jì)算χ2=6.763，P=0.009；有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），詳細(xì)統(tǒng)計(jì)如表3、圖3。

表3 516 例無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者一般資料統(tǒng)計(jì)[n(%)]

圖3 516 例無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者一般資料統(tǒng)計(jì)

3 討論

β 珠蛋白生成障礙性貧血在臨床領(lǐng)域也有地中海貧血和海洋性貧血之稱(chēng)，其屬于溶血性貧血病癥，具有遺傳性，遺傳基因缺陷會(huì)導(dǎo)致患者一種或者多種血紅蛋白中的珠蛋白鏈合成缺陷，引發(fā)病理性變化，出現(xiàn)貧血病癥[5]。基因缺陷具有一定的多樣性和復(fù)雜性，導(dǎo)致患者機(jī)體缺少的珠蛋白鏈的數(shù)量、種類(lèi)具有極大的不確定性[6]。所以在對(duì)該病癥進(jìn)行分類(lèi)和命名時(shí)，大多根據(jù)患者所缺乏的珠蛋白鏈種類(lèi)及缺乏珠蛋白鏈的程度進(jìn)行。無(wú)癥狀的β 珠蛋白生成障礙性貧血在世界范圍內(nèi)許多地區(qū)均有發(fā)生，東南亞的發(fā)病率極高，在我國(guó)廣東、四川等地也尤為多見(jiàn)。據(jù)分析，β 珠蛋白生成障礙性貧血發(fā)生的分子病理復(fù)雜性較高，當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域發(fā)現(xiàn)的β基因突變已經(jīng)達(dá)到100 種以上，大部分基因突變?yōu)榛螯c(diǎn)突變，也有少部分為基因缺失[7-8]。無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者大都為輕度貧血，只有在調(diào)查家族史時(shí)才能發(fā)現(xiàn)該病癥。而無(wú)癥狀的β珠蛋白生成障礙性貧血病癥發(fā)生原因大都是由于患者未自父母雙方各自繼承一個(gè)β 珠蛋白基因，所以無(wú)法合成足夠的β 珠蛋白鏈，導(dǎo)致珠蛋白基因缺失或者珠蛋白基因點(diǎn)突變，影響肽鏈的正常合成[9]。該病癥在兒童中發(fā)病較多，大部分兒童為無(wú)癥狀性貧血。由于β 珠蛋白生成障礙性貧血會(huì)對(duì)患者健康產(chǎn)生嚴(yán)重威脅，加大患者家庭壓力，對(duì)社會(huì)產(chǎn)生不良影響，加之無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血在進(jìn)行血液常規(guī)檢查時(shí)無(wú)明顯異常，生長(zhǎng)發(fā)育也不存在異常，而一旦發(fā)生基因突變，將會(huì)轉(zhuǎn)化為重型β 珠蛋白生成障礙性貧血，危及患者健康。雖然深圳光明區(qū)已經(jīng)建立了完整的珠蛋白生成障礙性貧血篩查體系，但是依舊有重型的β 珠蛋白生成障礙性貧血患兒出生的可能，所以為了更好的阻止此類(lèi)患者的出生，最好加強(qiáng)地貧基因攜帶者檢查，開(kāi)展β 珠蛋白生成障礙性貧血相關(guān)病癥的宣傳，以?xún)?yōu)化我國(guó)人口素養(yǎng)[10]。

以上研究表明，2633 例受檢人員共檢出516 例無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者，陽(yáng)性檢出率為19.38%。這只是本此研究實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性檢出率，并不能代表本地區(qū)的人群攜帶率，應(yīng)該與入選本實(shí)驗(yàn)的人群有關(guān)，因?yàn)樗麄兇蟛糠忠呀?jīng)有了地貧初篩的陽(yáng)性表型。三種較高的基因型構(gòu)成類(lèi)型分別為37.98% 的CD41-42/N、21.51% 的IVS-Ⅱ-654/N、和17.44%CD17/N。而無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者在年齡方面并不存在較大差異，P＜0.05，而18.00%的農(nóng)村地區(qū)受檢者與14.14%的城鎮(zhèn)地區(qū)受檢者數(shù)據(jù)間存在較大差異，P＞0.05，可見(jiàn)，無(wú)癥狀β珠蛋白生成障礙性貧血的基因型構(gòu)成分布情況各不相同，且農(nóng)村地區(qū)發(fā)生無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血的患者數(shù)量較多。

綜上所述，516 例無(wú)癥狀β 珠蛋白生成障礙性貧血患者的基因檢測(cè)結(jié)果表明，農(nóng)村地區(qū)的患者患有該病癥的幾率較高，其可能與農(nóng)村地區(qū)人口素質(zhì)相關(guān)，為了更好的擴(kuò)大β 珠蛋白生成障礙性貧血篩查范圍，必須加強(qiáng)人口普查工作，合理進(jìn)行婚前及孕前指導(dǎo)，合理進(jìn)行珠蛋白生成障礙性貧血基因內(nèi)容的介紹，提升人群文化素養(yǎng)。