抗核抗體譜聯(lián)合抗核抗體在自身免疫性疾病診斷中的應(yīng)用效果

趙海平 李俊琦 趙文華

[摘要] 目的 觀察分析抗核抗體譜聯(lián)合抗核抗體在自身免疫性疾病診斷中的應(yīng)用效果。方法 方便選取該院在2016年1月—2019年3月收治的110例自身免疫性疾病患者作為實(shí)驗(yàn)組，再選取同期該院搜集的43名健康體檢者一般資料作為對(duì)照組，兩組研究對(duì)象均進(jìn)行核抗體譜（采用免疫印跡法）聯(lián)合抗核抗體（采用間接熒光免疫法）檢測。 結(jié)果 系統(tǒng)性紅斑狼瘡抗核抗體陽性檢出率為93.6%（44/47）、混合性結(jié)締組織病抗核抗體陽性檢出率為60.0%（6/10）、干燥綜合征者抗核抗體陽性檢出率為62.5%（5/8）、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎抗核抗體陽性檢出率為21.2%（7/33）、特發(fā)性血小板減少性紫癜抗核抗體陽性檢出率為37.5%（3/8）、系統(tǒng)性硬化病抗核抗體陽性檢出率為33.3%（1/3），系統(tǒng)性紅斑狼瘡陽性檢出率顯著高于其他疾病陽性檢出率，對(duì)照組抗核抗體檢出率為0.0%（0/43），數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.556，P<0.05）。結(jié)論 抗核抗體譜聯(lián)合抗核抗體在自身免疫性疾病診斷中的應(yīng)用效果顯著。

[關(guān)鍵詞] 抗核抗體譜;抗核抗體;自身免疫性疾病;診斷;應(yīng)用效果

[Abstract] Objective To observe and analyze the application effect of anti-nuclear antibody spectrum combined with anti-nuclear antibody in the diagnosis of autoimmune diseases. Methods 110 patients with autoimmune diseases admitted to the hospital from January 2016 to March 2019 were convenient selected as the experimental group， and 43 healthy persons collected in the hospital during the same period were selected as the control group. The nuclear antibody spectrum （using immunoblotting） and anti-nuclear antibody （using indirect fluorescence immunoassay） were tested in both groups. Results The positive rate of anti-nuclear antibody in systemic lupus erythematosus was 93.6% （44/47）， mixed connective tissue disease was 60.0% （6/10）， sjogren's syndrome was 62.5%（5/8）， rheumatoid arthritis was 21.2%（7/33）， idiopathic thrombocytopenic purpura was 37.5%（3/8） and 33.3%（1/3） of the patients with systemic sclerosis were positive for anti-nuclear antibodies. The positive rate of systemic lupus erythematosus was significantly higher than that of other diseases. The positive rate of anti-nuclear antibodies in the control group was 0.0% （0/43）， and the difference was statistically significant（χ2=1.556，P<0.05）. The application effect is remarkable. Conclusion The application of antinuclear antibody spectrum combined with antinuclear antibody in the diagnosis of autoimmune diseases is significant.

[Key words] Anti-nuclear antibody spectrum; Anti-nuclear antibodies; Autoimmune diseases; Diagnosis; Application effect

自身免疫性疾病的重要診斷標(biāo)志是：自身抗體[1]。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)的廣泛發(fā)展和進(jìn)步，自身免疫性疾病相關(guān)特異性抗體日益被發(fā)現(xiàn)，繼而使得自身免疫性疾病的正確診斷率日漸提高。相關(guān)資料顯示，間接熒光法是檢測抗核抗體的首選方法，目前被認(rèn)為是抗核抗體檢測的金標(biāo)準(zhǔn)[2-3]。從理論上來看，如果抗核抗體為陰性，那么抗核抗體譜也為陰性[4]。事實(shí)上，臨床工作發(fā)現(xiàn)部分檢測標(biāo)本出現(xiàn)間接熒光法檢測抗核抗體為陰性結(jié)果，而免疫印跡法檢測抗核抗體譜為陽性結(jié)果[5]。將抗核抗體譜聯(lián)合抗核抗體診斷自身免疫性疾病中具有更高價(jià)值，因此該文將對(duì)比分析自身免疫性疾病患者與健康體檢者的陽性檢出率。該文方便選取該院在2016年1月—2019年3月收治的110例自身免疫性疾病患者，現(xiàn)報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取該院收治的110例自身免疫性疾病患者（47例系統(tǒng)性紅斑狼瘡者、33例類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎者、8例特發(fā)性血小板減少性紫癜者、10例混合性結(jié)締組織病者、8例干燥綜合征者、3例系統(tǒng)性硬化病者、1例肌炎患者）作為實(shí)驗(yàn)組，再選取同期該院搜集的43名健康體檢者一般資料作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組中有女72名、男38名;平均年齡為（40.5±7.8）歲。對(duì)照組中有女30名、男13名;平均年齡為（41.8±7.2）歲。兩組基本資料對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2? 方法

取兩組研究對(duì)象空腹血，加入肝素抗凝劑，在室溫下防置0.5 h，離心后，制備血清。核抗體譜采用免疫印跡法（試劑盒購買于深圳亞輝龍公司）加以檢測，檢測過程中嚴(yán)格按照試劑盒說明書加以進(jìn)行。抗核抗體采用間接熒光免疫法（試劑盒購買于杭州醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司）加以檢測，檢測過程中嚴(yán)格按照試劑盒說明書加以進(jìn)行（測量4個(gè)滴度：1∶100/1∶320/1∶1000/1∶3200，抗體滴度≥1∶100為陽性）。

1.3? 觀察指標(biāo)

分析抗核抗體、抗核抗體譜（主要包括抗dsDNA、抗核小體、抗組蛋白、抗SmD1、抗U1-snRNP、抗核糖體P蛋白、抗PCNA、抗SS-A/Ro60kD、抗SS-A/Ro52kD、抗SS-B、抗CenpB、抗SCL-70、抗 JO-1、抗PM -Scl、抗AMA-M2、Mi-2和Ku）檢測結(jié)果。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 兩組研究對(duì)象的抗核抗體陽性檢出率比較

系統(tǒng)性紅斑狼瘡抗核抗體陽性檢出率為93.6%（44/47）、混合性結(jié)締組織病抗核抗體陽性檢出率為60.0%（6/10）、干燥綜合征者抗核抗體陽性檢出率為62.5%（5/8）、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎抗核抗體陽性檢出率為21.2%（7/33）、特發(fā)性血小板減少性紫癜抗核抗體陽性檢出率為37.5%（3/8）、系統(tǒng)性硬化病抗核抗體陽性檢出率為33.3%（1/3），系統(tǒng)性紅斑狼瘡陽性檢出率顯著高于其他疾病陽性檢出率，對(duì)照組抗核抗體檢出率為0.0%（0/43），數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.556，P<0.05），見表1。

2.2? 兩組研究對(duì)象的抗核抗體譜陽性檢出率比較

47例系統(tǒng)性紅斑狼瘡者抗nRNP、抗sm、抗SS-A、抗SS-B、抗SCL-70 、抗PM -Scl、抗 JO-1、抗CENPB、抗PCNA、抗dsDNA、抗核小體、抗組蛋白、抗糖體P蛋白、抗U1-snRNP、抗SS-A/Ro60kD、抗SS-A/Ro52kD以及抗AMA-M2、Mi-2和Ku檢出率分別為17.0%（8/47）、34.0%（16/47）、29.8%（14/47）、12.8%（6/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47）、2.1%（1/47）、2.1%（1/47）、63.8%（30/47）、70.2%（33/47）、48.9%（23/47）、12.8%（6/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47），33例類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎者抗核抗體譜分別為0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、12.1%（4/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、15.2%（5/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33），8例特發(fā)性血小板減少性紫癜者抗核抗體譜分別為75.0%（6/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、37.5%（31/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8），10例混合性結(jié)締組織病者抗核抗體譜分別為80.0%（8/10）、40.0%（4/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、30.0%（3/10）、40.0%（4/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、20.0%（2/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、10.0%（1/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、10.0%（1/10），8例干燥綜合征者抗核抗體譜分別為87.5%（7/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、50.0%（4/8）、37.5%（3/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、50.0%（4/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、50.0%（4/8）、0.0%（0/8），3例系統(tǒng)性硬化病者抗核抗體譜分別為33.3%（1/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、66.7%（2/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3），對(duì)照組抗核抗體譜均為0.0%（0/43），數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.366、15.365、1.226、9.366、19.115、 26.366，P<0.05），見表2。

3? 討論

抗核抗體在自身免疫性疾病診斷中具有較高陽性檢出率，抗核抗體陽性結(jié)果意味著患者處于自身免疫性疾病高危群體[6-8]。聯(lián)合抗核抗體與抗核抗體譜診斷自身免疫性疾病患者能夠顯著提高診斷敏感度，與此同時(shí)避免漏檢[9-10]。該文研究結(jié)果顯示系統(tǒng)性紅斑狼瘡陽性檢出率顯著高于其他疾病陽性檢出率，對(duì)照組抗核抗體檢出率為0.0%（0/43），數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。該文研究結(jié)果顯示系統(tǒng)性紅斑狼瘡抗核抗體陽性檢出率為93.6%（44/47）、混合性結(jié)締組織病抗核抗體陽性檢出率為60.0%（6/10）、干燥綜合征者抗核抗體陽性檢出率為62.5%（5/8）、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎抗核抗體陽性檢出率為21.2%（7/33）、特發(fā)性血小板減少性紫癜抗核抗體陽性檢出率為37.5%（3/8）、系統(tǒng)性硬化病抗核抗體陽性檢出率為33.3%（1/3），系統(tǒng)性紅斑狼瘡陽性檢出率顯著高于其他疾病陽性檢出率，對(duì)照組抗核抗體檢出率為0.0%（0/43），數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.556，P<0.05）。據(jù)Rana等[11]學(xué)者在相關(guān)文獻(xiàn)研究顯示，使用抗核抗體譜聯(lián)合抗核抗體檢測方法檢測137例自身免疫性疾病患者中，系統(tǒng)性紅斑狼瘡陽性檢出率為94.5%（52/55）、干燥綜合征為58.3%（7/12）、混合性結(jié)締組織病為60.8%（14/23）、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎為22.5%（9/40）、特發(fā)性血小板減少性紫癜抗核抗體陽性檢出率為37.5%（3/8）、系統(tǒng)性硬化病抗核抗體陽性檢出率為33.3%（1/3）。上述結(jié)果與該文研究結(jié)果保持高度一致。有學(xué)者認(rèn)為，抗核抗體譜中的不同自身抗體在不同種類的自身免疫性疾病患者中表現(xiàn)出不同檢出率。該文研究結(jié)果顯示47例系統(tǒng)性紅斑狼瘡者抗nRNP、抗sm、抗SS-A、抗SS-B、抗SCL-70 、抗PM -Scl、抗 JO-1、抗CENPB、抗PCNA、抗dsDNA、抗核小體、抗組蛋白、抗糖體P蛋白、抗U1-snRNP、抗SS-A/Ro60kD、抗SS-A/Ro52kD以及抗AMA-M2、Mi-2和Ku檢出率與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。有關(guān)研究表明，抗核抗體與自身免疫性疾病有著密切關(guān)系，敏感性比較強(qiáng)，因此可提高臨床診斷價(jià)值。也有學(xué)者認(rèn)為，抗核抗體的特異性差，因此在臨床診斷中往往用于初篩試驗(yàn)，研究結(jié)果顯示，在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中抗核抗體表現(xiàn)出較高陽性檢出率，繼而對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的診斷具有一定參考價(jià)值。

綜上所述，抗核抗體譜聯(lián)合抗核抗體在自身免疫性疾病診斷中的應(yīng)用效果顯著。

[參考文獻(xiàn)]

[1]? 盧偉，劉斌劍，梁艷等.抗核抗體陰性病例的抗核抗體譜的檢測分析與疾病風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2016，20（4）：597-602.

[2]? 姜清明.ANA、抗ds-DNA 抗體及抗 ENA 抗體在自身免疫性疾病診斷中的應(yīng)用[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（14）：2011-2013.

[3]? 黃燕華，王偉佳，馬京京，等.不同檢測技術(shù)檢測抗核抗體對(duì)自身免疫性疾病診斷價(jià)值研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2018， 39（4）：461-464.

[4]? 陸媛，陸艷.抗核抗體聯(lián)合抗核抗體譜診斷自身免疫性疾病的臨床準(zhǔn)確率[J].臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐，2019，4（16）：91-92，95.

[5]? 陳向華，王建吉，耿學(xué)麗，等.抗核糖體P0蛋白抗體、抗dsDNA抗體等自身抗體在自身免疫性疾病診斷中的意義[J].河北醫(yī)藥，2017，39（17）：2617-2619，2622.

[6]? 廖桂周.抗核抗體和抗核抗體譜聯(lián)合檢測在自身免疫性疾病診斷和篩查中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2016，13（24）：63-66.

[7]? 張乃丹.ANA 抗 ds-DNA 抗體及抗 ENA 抗體聯(lián)合檢測在自身免疫性疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2017， 21（1）：8-9.

[8]? International consensus on antinuclear antibody patterns： definition of the AC-29 pattern associated with antibodies to DNA topoisomerase I[J].Clinical Chemistry and Laboratory Medicine （CCLM），2018，56（10）：1783-1788.

[9]? May Y Choi，Ann E Clarke，Yvan St Pierre， et al.Antinuclear Antibody–Negative Systemic Lupus Erythematosus in an International Inception Cohort[J].Arthritis Care & Research，2019，71（7）：893-902.

[10]? Chan Wang，XiaodongZheng，Peng Jiang， et al.Genome-wide Association Studies of Specific Antinuclear Autoant ibody Subphenotypes in Primary Biliary Cholangitis[J].Hepatology，2019，70（1）：294-307.

[11]? Rana Kadiru，Spandana Hegde，Manjunath Shenoy.An observ ational cross-sectional study of varied clinical manifes tations of connective tissue disorders and their association with antinuclear antibodies in a tertiary care center[J].Indian Dermatology Online Journal，2019，10（4）：413-417.

（收稿日期：2019-11-21）