Ki-67在乳腺癌中的表達差異及其臨床意義

陸奉科，王 健*

（廣西醫科大學，廣西 南寧 530021）

乳腺癌目前已經成為首要威脅女性健康的惡性腫瘤，近年來乳腺癌的檢測診斷技術和治療方案愈加受到重視。該腫瘤在女性患者中死亡率較高，且發病年齡越來越呈現出年輕化趨勢[1]。免疫組化技術能較好促進病理診斷水平，研究對象Ki67是一種增殖細胞核抗原，是與細胞周期相關的蛋白質，其功能與有絲分裂有關，是多種惡性腫瘤疾病重要生物標志之一[2]，有研究表明，通過檢測Ki67抗原，能夠了解惡性腫瘤的細胞增殖活性，對疾病診斷治療及預后評價，均有較重要的參考價值。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集2018年6月～2019年6月間就診于柳州某三家醫院的患者共164例，均為女性，患者年齡（26-78歲）。對篩選樣本進行分組，分組如下，是否浸潤：非浸潤性癌31例，乳腺浸潤性癌133例；組織學分型：乳腺浸潤性導管癌Ⅰ級36例，乳腺浸潤性導管癌Ⅱ級～Ⅲ級88例；是否轉移：有轉移的38例；無轉移的126例。根據Ki67表達高低分為低表達組（Ki67＜14%）及高表達組（Ki67≥14%），其中低表達組38例，高表達組126例。

1.2 方法

所有操作步驟均嚴格遵守SOP文件，石蠟切片脫蠟、水化，自來水洗并浸泡于水中待用；取適量已稀釋成1:50的EDTA抗原修復液于高壓鍋進行修復2 min；將切片放入3%過氧化氫溶液中浸泡10 min，自來水沖洗干凈；離組織3 mm處用免疫組化油筆畫圈；組織上加一滴Ki67抗體，室溫下孵育120分鐘或4℃過夜，PBS沖洗5次；滴加二抗，室溫下孵育20 min，PBS沖洗5次；DAB顯色，鏡下觀看顯色效果并終止反應；蘇木素復染2 min；中性樹膠封固。

1.3 結果判定

所有標本均由兩位以上經驗豐富的病理科醫師進行診斷。每張切片取 10 個具有代表性的高倍視野，Ki67 蛋白陽性染色定位于細胞核，顆粒呈棕黃色。采用相對定量法：計算陽性細胞占腫瘤細胞的百分比。若＜14%的細胞表達Ki-67 為陰性（-）；若≥14% 的細胞表達 Ki67則為陽性（+）。

1.4 統計學處理

采用SPSS 25.0軟件對所有實驗數據進行統計學處理。計數資料以頻數或百分率表示，組間比較采用x2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

表1 Ki-67在各型乳腺癌中的陽性率比

（1）Ki67 蛋白異常表達與乳腺癌惡性程度是否浸潤比較，P＞0.05,差異無統計學意義。

（2）乳腺癌細胞核分級的增加、乳腺癌是否組織轉移與Ki67蛋白異常表達結果比較有統計學意義。

3 討 論

隨著臨床上免疫組織化學技術得到廣泛應用，病理醫生利用檢測技術可以提高診斷的準確性，并有助于疾病的鑒別診斷。與傳統的病理HE染色技術相比，免疫組織化學技術在形態學診斷中更加具有直觀性、簡便性，提高了診斷的特異性與準確性，從而提高了診斷的效能。Ki67是一種核蛋白，位于人類Ki67基因定位在第10號染色體上，其與核糖體RNA轉錄有關 ，Ki67的失活使核糖體RNA合成受限。Ki67在細胞增殖的各期（G1，S，G2和M）中均有表達，但在細胞靜止期G0期不表達，可以作為一個細胞增殖的相關標記物。因此，在病理診斷報告中的指數高低與許多腫瘤分化程度、浸潤、轉移及預后均有相關性。由于其主要表達在活躍的細胞周期階段，在細胞核內的定位具有一定的特異性，并且隨細胞周期而改變，能被Ki67單克隆抗體染色的細胞核只有處于細胞周期的G1后期及以后的各活躍增殖期細胞，而處于靜止期的細胞核不會被染色，因此，Ki67成為目前非常理想的細胞增殖標記物，更好的作為形態學結果的補充。

本研究結果顯示，Ki67高表達組中組織學分級Ⅱ、Ⅲ級的患者比例明顯高于低表達組，Ki67蛋白在乳腺癌組織轉移的樣本中表現為高表達水平，說明患者結果增殖指數與腫瘤過度增殖、腫瘤分化程度較低有關，增加Ki67等免疫組化指標檢測可以增加病理診斷的客觀性，提高結果報告的準確性和特異性。Ki67表達高水平，反映腫瘤細胞增殖快，預后較差。目前國內有相關報道 Ki67 高表達與浸潤性乳腺癌有相關性，Ki67 可以在浸潤性乳腺癌中作為判斷預后的指標[3]，并有助于治療決策的制定，臨床上對其進行化療后在對其預后評估過程中可將 Ki67 作為判斷的重要治療 , 進而對化療效果進行評估。但也有研究該指標高表達與浸潤性無明顯特異性相關性，本研究僅限于單中心的回顧性分析，仍需擴大研究范圍，增加研究數量，尚待更多臨床資料進行進一步的研究。