添加生物活性多肽的抗衰老化妝品性能研究*

白耀輝，張優良，岑名迅，陳文杰，賴銳豪，丁 姣

(1 珠海安和生化科技有限公司，廣東 珠海 519040；2 仲愷農業工程學院化學化工學院，廣東 廣州 510225)

隨著科技的高速發展，人們的觀念發生了巨大的變化，抗衰老化妝品在中國有著悠久的歷史，早在唐朝就有武則天為了保持青春靚麗而用珍珠粉等敷面，以達到延緩皮膚衰老的目的[1]。如今，人口老齡化越來越嚴重，促使了抗衰老化妝品的飛速發展。抗衰老化妝品主要是在化妝品中添加抗衰老的功能性物質，以達到抗衰老的目的，目前，在化妝品中添加的主要是有生物活性的多肽類，如乙酰基六肽-8，棕櫚酰三肽-1，肌肽[2]等。

多肽是肽類中的一部分，是構成生命的重要物質[3]。科學研究表明．活性生物多肽的形成，實際上是由20余種天然氨基酸通過肽鏈以不同的排列方式和形態構成。由于一些多肽具有美白，美容，抗衰老，祛疤痕，祛痘[4]等功能，在化妝品方面上越來越受到重視，在化妝品中添加生物活性多肽，以達到美白，抗衰老[5]的目的，在化妝品中應用越來越廣泛，如抗衰老的面部原乳，抗衰老的面膜等[6-7]。

在抗衰老多肽的作用中，不同的多肽作用機理不同，有些多肽是神經遞質抑制類，有些是信號類，還有是抗氧化類的，它們的作用機理不同，如果將不同的多肽復配起來，如信號類的多肽與神經遞質抑制類的多肽復配，這樣多種機理同時進行，互補互助，以達到更好的效果[8]。

本研究選用乙酰基六肽-8、棕櫚酰三肽-1和肌肽作為添加劑，制備單多肽面部乳液和復配多肽面部乳液，探究不同多肽或復配多肽添加劑對面部乳液的理化性質、感官性質及抗衰老性質的影響。

1 實 驗

1.1 儀器與試劑

1.1.1 實驗儀器

電子天平；干燥箱/培養箱；電動離心機；旋轉式粘度計；霉菌培養箱；高速分散均質機；電熱恒溫水浴鍋；pH儀。

1.1.2 實驗試劑

1%卡波姆；山梨坦硬脂酸酯/蔗糖椰油酸脂；出芽短梗酶多糖；霍霍巴蠟 PEG-120 酯類；丙二醇；氨基酸保濕劑；月桂氮卓酮//PEG-40/氫化蓖麻油；三乙醇胺；β-葡聚糖；1%透明質酸鈉；1%聚谷氨酸鈉；聚季銨鹽-51；二肽二氨基丁酰芐基酰胺二乙酸鹽；丙烯酸鈉/丙烯酰二甲基牛磺酸鈉共聚物；杰馬BP；苯氧乙醇；乙酰基六肽-8；棕櫚酰三肽-1；肌肽。

1.2 實驗方法

1.2.1 面部乳液配方

表1 面部乳液的配方Table 1 The formula of facial lotion

1.2.2 面部乳液的制備

以200 g為乳液總量，按表1中稱量山梨坦硬脂酸酯(和)蔗糖椰油酸脂，出芽短梗酶多糖，丙二醇于250 mL的燒杯中，用玻璃棒攪拌均勻，再加入110.5 g的水，用玻璃棒攪拌均勻，用電熱恒溫水浴鍋加熱至90 ℃，后按表中加入A組的其他原料，用攪拌機以800 r/min轉速攪拌至固體全部溶解，待固體溶解后以400 r/min的轉速攪拌降溫至45 ℃待用。取另一250 mL燒杯準確稱量B組和C組的原料于燒杯中，用玻璃棒攪拌均勻。待A組原料溶液降溫到45 ℃，A、B、C三組溶液混合，用均質機以3500 r/min轉速均質三分鐘，均質完成后再用攪拌機以400 r/min轉速攪拌，并降溫至室溫。

1.2.3 單功能多肽乳液的制備

按照200 g面部乳液的6%添加功能性多肽。其中，分別選取乙酰基六肽-8、棕櫚酰三肽-1和肌肽等三種功能性多肽，制備A、B、C號多肽乳液。

表2 單功能性多肽乳液中多肽種類和添加量Table 2 The types and additions of peptides in monofunctional polypeptide emulsions

1.2.4 復配多肽乳液的制備

按照1:1或1:1:1復配功能性多肽，并按照200 g面部乳液的6%添加復配功能性多肽，制備復配多肽乳液。分別對樣品標志為樣品E、F、G、H，具體復配方式如表3所示。

表3 復配多肽乳液中多肽復配類型和添加量Table 3 The types and additions of polypeptides in polypeptides emulsion

1.2.5 表征與測試

(1)乳液理化性質測定

根據GB/T13531.1-2008中的稀釋法測量乳液的pH值；采用旋轉式粘度計測量乳液的粘度；采用電動離心機，在2000～5000 r/min下離心30 min，觀察離心后乳液是否發生油水分離現象，測量樣品乳液的離心穩定性；采用高低溫試驗箱對乳液樣品的熱寒循環穩定性進行測定，程序變溫方式為：先40 ℃下恒溫24 h，然后-15 ℃恒溫24 h，變溫速率為10 ℃/min，如此循環7次，觀察乳液油水分層現象變化。

根據化妝品安全技術規范(2015年版)國家微生物檢驗標準對乳液樣品進行微生物檢驗。稱取10 g乳液樣品，加入裝有玻璃珠和90 mL滅菌生理鹽水的三角瓶里，充分振蕩均勻，靜置15 min后，加入樣品上清液作為1:10的檢液。

(2)乳液的感官性質測定

試樣乳液基本的感官性質主要測試試樣的鋪展性，保濕性，光澤度，細膩性，黏滯感，清爽度，白皙度七個方面，具體感官測定方法如下：

①選取手臂干凈，皮膚健康，無化妝品過敏反應20～23歲的志愿者87名，男生45名，女生42名。

②以雙手前臂內側為實驗區，選取4 cm×4 cm的實驗區域，并進行標記，每個標記區域將之分成四份等面積區域，雙手總共有八份等面積區域。

③進行實驗前需將手臂清洗干凈，并用75%的乙醇溶液消毒清洗手臂內側，3 min過后將八個試樣固定份量分別涂抹在八個區域，輕輕涂抹15圈后進行評估打分。

④隨后志愿者將每天按照上面1到3的步驟重復一遍，實驗周期為一個月，在進行實驗時手臂不能涂抹其他的任何化妝品，并將每次的表格收齊，最后統計平均值。本次實驗采用的是十分制，8～10表示感覺很好，6～8分表示感覺良好，6分以下表示感覺一般或者不好。

(3)抗衰老效果評價

采用對比法對乳液樣品的抗衰老效果進行測定，選取40名年齡在20～30歲的女性志愿者，她們擁有眼角紋，并大致相同，皮膚性質，皺紋程度，相差不大。將這些志愿者隨機分成八組對應八個樣品，分別為A組、B組、C組、D組、E組、F組、G組、H組，使用對應編號的樣品。每組志愿者使用同一個樣品。這些志愿者皮膚對化妝品不過敏，在實驗期間禁止用其他化妝品。志愿者們每天早上八點與晚上九點，將眼角紋處擦洗干凈，在室內晾干十五分鐘，每次取固定的試樣，輕輕涂抹在眼角紋處，再用指腹輕輕的按摩15圈，使試樣更好的被皮膚吸。實驗周期為三個月，三個月后觀察志愿者的眼角紋減輕程度。

2 結果與討論

2.1 乳液理化性質測定

2.1.1 pH值

在乳液基本性質的測定中，按照GB/T29665-2013對護膚乳液理化性質的測定方法測定，看是否符合GB/T29665-2013對護膚乳液理化性質的標準要求。A試樣pH的測定結果如表4所示。由表4可以看出，實驗中制備的試樣pH的范圍在6.5～7.0之間，pH相對變化較小，符合GB/T29665-2013對護膚乳液的要求。

2.1.2 粘 度

由表4可以看出試樣乳液的粘度范圍大致是7000～8000，粘度范圍相對較小，各試樣的粘度相差不大。

表4 樣品乳液的pH值和粘度Table 4 The pH and viscosity of sample emulsion

2.1.3 微觀形態

圖1是各試樣在400倍下的顯微鏡圖像，由上面各圖中可以看出試樣乳液形狀均勻，大都成圓球狀或者橢圓狀，粒徑大小約為0.1～10 μm，故其結構細膩，使用膚感較好。

2.1.4 離心穩定性

圖1 樣品乳液的微觀形態Fig.1 Micromorphology of sample emulsion

在離心穩定性的測定中，試樣乳液都達到了GB/T29665-2013對護膚乳液的標準要求，由此可以知道試樣乳液的穩定性較好。添加功能肽并不影響乳液樣品的離心穩定性。

表5 樣品乳液的離心穩定性Table 5 The centrifugal stability of sample emulsion

2.1.5 寒熱循環穩定性

在耐寒耐熱的測定中，試樣乳液都達到了GB/T29665-2013對護膚乳液的標準要求，由此可以知道試樣乳液的穩定性較好。添加功能肽并不影響乳液樣品的寒熱循環穩定性。

表6 樣品乳液的寒熱穩定性Table 6 The cold and thermal stability of sample emulsion

2.1.6 微生物檢驗

圖2 樣品乳液的微生物檢測Fig.2 The microbial detection of sample emulsion

圖2是樣品微生物細菌及霉菌的檢驗，由圖中的照片可以看出樣品中幾乎沒有生長細菌與霉菌的菌落，由此可知樣品乳液的防腐性好，乳液的穩定性好。

2.2 乳液的感官性質測定

因為試樣乳液制作過程中未添加任何香料，所以不對香氣指標等進行測試。在人體皮膚評價中，取每次評價的分值最后計算出平均值，試樣乳液基本的感官性質評價的結果如表7所示。由表7可以看出，八個樣品的各個感官性質評分都達到了良好以上，可知試樣乳液的給人的感官好，其中八個樣品中細膩性評價分值最高，可知試樣乳液的細膩性較好。

表7 樣品乳液的感官性質Table 7 The sensory properties of sample emulsion

2.3 抗衰老效果評價

2.3.1 單功能多肽乳液

抗衰老功效評價過程中，通過對比志愿者眼角紋皺紋程度的減輕狀況和觀察皮膚改善狀況來得出結論，在連續三個月的觀察對比中，使用樣品A的志愿者眼角紋沒有得到明顯的改變，或者沒有變化，而使用B組、C組和D組志愿者的眼角紋皺紋程度稍微減輕，皮膚的衰老程度得到了一定的改善。因此可以得出下面的結論。(1)普通乳液不具有祛皺抗衰老的能力；(2)使用添加抗衰老功效性多肽的乳液，其減輕皮膚的皺紋與抗衰老的能力明顯比空白組的能力強，這也證明了抗衰老多肽在皮膚抗衰老過程中的具有的重大作用。

2.3.2 復配多肽乳液

經過連續三個月的使用，對比志愿者使用前后的眼角紋減輕程度，從連續觀察對比中可以看出使用試樣添加多肽乳液復配的志愿者的皺紋得到明顯的改善，眼角紋有很大的減輕效果。對比添加單方功效性多肽乳液的B、C、D組的效果，E、F、G、H組的復配多肽乳液的能有效減輕志愿者的皺紋。因此可以得出下面兩個結論。(1)使用添加功效性多肽復配的抗衰老效果比添加單方功效性多肽好；(2)不同作用機理的多肽，可以通過復配，協調各種機理同時進行，達到更理想的效果。

3 結 論

探究不同多肽在乳液中抗衰老的效果極其復配的效果。三種不同的功效性多肽，作用機理也不同，但是最后三種多肽復配的達到的效果最好，說明不同作用機理的多肽可以互補，共同作用。所制備的試樣的基本理化性質和感官性質，都達到了GB/T29665-2013對護膚乳液理化性質的標準要求。添加功效性多肽乳液具有更好的抗衰老能力，且復配多肽乳液的抗衰老效果明顯優于單多肽乳液。