瑞舒伐他汀聯合厄貝沙坦用于改善高血壓模型大鼠心肌重構作用的效果分析

李 陽 何永紅 黃宏超 魏文峰

（1.廣東醫科大學順德婦女兒童醫院內科，廣東佛山528300；2.廣東省開平市婦幼保健院，廣東江門529300）

心肌肥厚（Cardiac hypertrophy）是形成心力衰竭的病理生理基礎。心肌肥厚表現為心肌細胞蛋白合成增加、直徑增寬或長度增加、體積增大、纖維組織增生、心肌肌節數量增多以及胚胎基因再表達。目前臨床上一致認為心肌肥厚是心力衰竭、腦卒中、冠心病、猝死等的獨立危險因素[1-2]。在臨床上醫務人員會常規選擇血管緊張素轉化酶抑制劑（ACEI）、血管緊張素受體阻斷劑（ARB）、醛固酮拮抗劑等藥物治療心肌肥厚及心力衰竭[3]。大量的研究已經證明，病理性心肌肥厚是引起病人心力衰竭和猝死的主要原因，如何延緩或逆轉這種心肌重構、改善預后一直是心血管領域研究的熱點所在[4]。本研究旨在探明心肌重構的發生和防控機制，預期為心肌肥厚性疾病的治療提供新的思路、方法及實驗依據，對提高肥厚性心肌疾病病人的生活和生存質量、延緩惡性發展進程、改善預后有積極的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 實驗動物及分組：40 只成年雄性SD 大鼠購自暨南大學動物實驗中心，并在該中心完成制模。大鼠飼養在SPF 級動物實驗室，溫度為（22±2）℃，12 h循環晝夜光照。動物分組：40 只SD 雄性大鼠隨機分為5 組，即：空白組、模型組、4 mg/（kg·d）瑞舒伐他汀組、厄貝沙坦［15 mg/（kg·d）］組、瑞舒伐他汀組加厄貝沙坦組，每組8 只。空白組皮下注射生理鹽水1mL，其他各組異丙腎上腺素每天2mg/kg 腹部皮下注射，自由飲水及進食，連續14d 得到心肌肥厚模型。造模成功后第1 天，將瑞舒伐他汀和厄貝沙坦研磨成粉，溶于少量蒸餾水中制成懸液，采用灌胃法給藥；空白組和模型組大鼠均用等量生理鹽水灌胃。每日上午定時1 次，共8 周。

1.2 觀察指標：取各組大鼠8 周后腹主動脈血2mL，酶聯免疫檢測試劑盒檢測血漿血管緊張素II含量；游離大鼠心臟及左室并稱重，計算心臟質量指數、左室質量指數；HE 染色觀察5 組心肌組織病理切片左室橫截面細胞面積；采用逆轉錄試劑盒檢測ANF mRNA 及AT1mRNA 表達；Bio-Rad GelDoc EZ 凝膠成像系統采用Western 印跡法檢測心肌AT1 蛋白受體的表達。目的基因相對表達量=目的基因光密度值/GAPDH 光密度值。目的蛋白表達量=目的蛋白光密度值/β-actin 光密度值。

1.3 統計學處理：運用SPSS 17.0 進行統計分析，計量資料用均數±標準差表示，采用單因素方差分析，P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 5 組大鼠心臟質量指數、左室橫截面細胞面積、血管緊張素II 及左心室質量指數比較：結果詳見表1。

表1 心臟質量指數、左室橫截面細胞面積、血管緊張素II及左心室質量指數比較 （±s）

表1 心臟質量指數、左室橫截面細胞面積、血管緊張素II及左心室質量指數比較 （±s）

注：#表示與空白組比較，P＜0.05；與模型組比較，*P＜0.05；與聯合組比較，#P＜0.05

左心室質量指數（mg/g）空白組 8 3.62±0.21 214.8±18.4 69.8±13.6 2.77±0.11模型組 8 4.46±0.37# 553.7±40.9# 116.2±26.1＃ 3.45±0.21#瑞舒伐他汀組 8 4.12±0.29* 438.1±36.3* 89.5±19.5* 3.17±0.18*厄貝沙坦組 8 3.99±0.26* 441.6±37.1* 93.2±20.1* 3.31±0.20*聯合組 8 3.76±0.20* 352.4±26.7* 80.3±16.6* 3.06±0.16*組別 n 心臟質量指數（mg/g）左室橫截面細胞面積（μm2）血管緊張素II（pg）

2.2 5 組大鼠AT1R 蛋白、AT1RmRNA 及ANFmRNA表達比較：結果詳見表2。

3 討論

近年來，國內外文獻均報道他汀類藥物可以通過調控多條不同的信號轉導途徑（包括通過減少AT1 受體的表達和/或抑制心肌細胞的血管緊張素I 轉化酶的活性而實現）抑制心肌肥厚的發生、發展，減輕心室重構，改善心室的收縮及舒張功能，從而延長由心肌肥厚到心衰的過渡期，降低心臟疾病的死亡率，為防治心肌肥厚開創了新的途徑[5-6]。研究表明他汀類藥物除具降血脂作用，還具有抗炎、抗氧化、改善血管內皮功能、抗心肌重構、穩定動脈粥樣硬化斑塊、治療心衰等其他心血管保護作用[7]。國內外文獻均報道他汀可以通過對多條不同信號轉導通路的調控，發揮改善心室重構及抗心肌肥厚的作用。而ARB 類藥物抑制心肌細胞增生，延遲或逆轉心肌肥厚的作用目前已經得到廣泛認同，這2 種不同藥理作用機制的藥物聯合應用理論上應能產生累積或協同效應[8-9]。

表2 5 組大鼠AT1R 蛋白、AT1RmRNA 及ANFmRNA 表達比較 （±s）

表2 5 組大鼠AT1R 蛋白、AT1RmRNA 及ANFmRNA 表達比較 （±s）

注：#表示與空白組比較，P＜0.05；與模型組比較，*P＜0.05；與聯合組比較，#P＜0.05

組別 n AT1R 蛋白 ANFmRNA AT1RmRNA空白組 8 0.61±0.12 0.51±0.08 0.57±0.10模型組 8 1.09±0.22# 1.03±0.21# 0.95±0.20#瑞舒伐他汀組 8 0.87±0.15* 0.85±0.15* 0.79±0.16*厄貝沙坦組 8 0.82±0.14* 0.77±0.12* 0.81±0.17*聯合組 8 0.68±0.13* 0.63±0.14* 0.67±0.14*

瑞舒伐他汀及厄貝沙坦作為臨床常用的抗心肌肥厚藥物，但目前很少有研究關于二者聯合用藥能否有效發揮協同抗心肌肥厚作用[10]。本實驗通過注射異丙腎上腺素構建心肌肥厚大鼠模型，觀察瑞舒伐他汀、厄貝沙坦以及聯合用藥的抗心肌肥厚作用。結果發現模型組心臟質量指數、左室橫截面細胞面積、血管緊張素II 及左心室質量指數明顯高于空白組；而瑞舒伐他汀組、厄貝沙坦組及聯合組明顯低于模型組，且聯合組降低最顯著，差異均具有統計學意義。提示瑞舒伐他汀組和厄貝沙坦能夠有效逆轉模型大鼠心肌肥厚，且二者聯合效果更佳。其原因可能是由于瑞舒伐他汀作為HMG-CoA 還原酶抑制劑，可通過下調AT1 受體的基因表達來抑制心肌細胞肥大；而厄貝沙坦可通過阻斷Ang Ⅱ與AT1 受體結合及降低心肌Ang Ⅱ水平及AT1受體的親和力，從而逆轉左室肥厚，二者聯合作用可以更加顯著地逆轉模型大鼠心肌肥厚[11]。此外，我們的研究結果發現模型組AT1R 蛋白、AT1RmRNA及ANFmRNA 表達明顯高于空白組；而瑞舒伐他汀組、厄貝沙坦組及聯合組明顯低于模型組，且聯合組降低最顯著。提示瑞舒伐他汀聯合厄貝沙坦可以通過降低AT1R 蛋白、AT1RmRNA 及ANFmRNA途徑顯著改善高血壓模型大鼠心肌重構作用。其可能機制是瑞舒伐他汀、厄貝沙坦通過影響AT1 受體表達及阻斷血管緊張素II 與AT1 受體的結合發揮更強及有效抗心肌肥厚作用[12]。然而本研究目前只證明兩者聯合使用可通過下調AT1 受體的表達，達到改善高血壓模型大鼠心肌重構作用；對于何種信號通路下調AT1 受體的表達仍需要進一步深入研究。

綜上所述，瑞舒伐他汀聯合厄貝沙坦可改善高血壓模型大鼠心肌重構，本研究為二者在臨床上聯合用藥治療心衰、心肌肥厚提供新的思路及理論依據，為臨床改善肥厚性心肌患者的生存質量、延緩惡性發展進程、改善預后有積極的意義。