D6-CRP型與XN-9000型血細胞分析儀比對的結果分析*

陳 娟 吳志成* 賴小婷 馮景虹

隨著醫學檢驗的發展，全自動血細胞分析儀得以廣泛應用，各種血細胞分析儀的檢測技術不斷升級，而同一實驗室采用不同廠家、不同檢測原理的血細胞分析儀是檢驗科發展的必然趨勢。由于不同血細胞分析儀的檢測原理、使用試劑、校準品、質控品以及所處的環境溫度和濕度不同，同一份標本檢測結果間存在差異，導致無法滿足實驗室室間質量評價的要求。因此，為確保檢測結果的準確性和一致性，滿足室間質量評價的要求，做好實驗室內不同儀器間檢測結果的比對顯得尤為重要[1-4]。本試驗結合臨床實驗室標準化協會(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)發布的《用患者樣本進行方法比對及偏差評估-批準指南》(EP9-A2)[5]文件和原國家衛生部發布的《臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求》(WS/T406-2012)，以北京大學深圳醫院檢驗科參加衛生部臨床中心室間質評的XN-9000型血細胞分析儀為對照儀器，對D6-CRP型血細胞分析儀進行結果比對分析，并判斷其結果間的臨床可接受性[6]。

1 材料與方法

1.1 檢測材料

使用乙二胺四乙酸二鉀(ethylenediaminetetraacetic acid-K2，EDTA-K2)抗凝真空采血管，采集北京大學深圳醫院2019年1-5月臨床患者新鮮全血標本2 ml，按照原國家衛生部發布的《臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求》(WS/T406-2012)實驗室結果可比性驗證對樣本濃度的要求，收集40份EDTA-K2抗凝新鮮全血樣本，剔除由于檢測原理限制導致結果不可靠的樣本，如溶血、乳糜、小紅細胞以及有核紅細胞等，所有標本從采集到檢測完成時間均在2 h內[7]。

1.2 儀器與試劑

使用D6-CRP型全自動血細胞分析儀(深圳市帝邁生物技術有限公司)、校準品(帝邁PLUS0319)、質控品(帝邁DH1901)及其配套試劑；XN-9000型血細胞分析儀(日本Sysmex公司)、校準品、質控品及其原裝配套試劑。

1.3 檢測方法

(1)比對項目。白細胞(white blood cell，WBC)計數、紅細胞(red blood cell，RBC)計數、血紅蛋白(haemoglobin，HGB)、血細胞比容(hematocrit，HCT)和血小板計數(platelet，PLT)。

(2)儀器與試劑。根據CLSI EP9-A2文件[8]選取XN-9000型血細胞分析儀為對照儀器及其配套試劑，定期用原裝配套校準物進行校準；每個工作日用配套低、中、高3個濃度的全血質控物進行室內質量控制；定期參加衛生部和本省臨檢中心的室間質量評價。

(3)試驗條件。根據原國家衛生部發布的《血細胞分析的校準指南》(WS/T347-2011)[9]要求，儀器在第一次使用前需對其進行校準，后期至少每半年進行一次校準，使用期間按使用說明書定期維護和保養[10-12]。比對期間對儀器開機后的空白允許值進行確認，并完成高、中、低3個水平濃度質控品的監控，確保結果均在控。

(4)試驗方法。在儀器狀態良好情況下，每日選取8份樣本，同時用各儀器按常規樣本檢測方法測定各項參數，每份樣本測2次，其測定順序為1～8和8～1。連續測定5 d，共40份樣本記錄測定結果，取2次測定的平均值做比對分析，其取值范圍為：WBC(1.18～55.97)×109/L，RBC(2.69～6.46)×1012/L，HGB(77～183)g/L，HCT(23.8～53.0)%，PLT(36～715)×109[13]。

1.4 判斷標準

(1)日間精密度應符合《臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求》(WS/T406-2012)[6]表5的要求。

(2)實驗室結果可比性每個檢測項目的相對偏差應符合《臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求》(WS/T406-2012)[6]表8要求的比例應≥80%。

(3)線性回歸計算斜率a、截距b及線性回歸方程Y=ax+b。

(4)方法間相對偏差根據實驗室使用要求，將各檢測項目給定的醫學決定水平(Xc)代入回歸方程，計算Y與X之間預期偏倚Bc，Bc=|Y-Xc|，相對偏差(Bc%)=(Bc/Xc)×100%。以美國臨床實驗室改進法案修正法案(CLIA'88)規定的允許總誤差(TEa)的1/2作為評價標準，兩臺儀器WBC、RBC、HGB、HCT和PLT比對的可以接受范圍依次為±7.5%、±3.0%、±3.5%、±3.0%和±12.5%。

(5)方法間絕對偏差按該文件所給的公式計算Bc的95%置信區間(confidence interval，95%CI)，即在Xc處的絕對偏差，Ea=1/2TEa，絕對允許誤差TEa=TEa%×Xc，以1/2CLIA’88絕對允許總誤差TEa作為判斷標準。

(6)臨床可接受性判斷Bc%≤1/2TEa%，表明待評方法的檢測結果與對照方法一致，相反則不具可比性[14]。1/2TEa在95%CI內，表明待評方法的偏差可接受，Ea＞Bc的95%CI上限，表明預期偏差很可能(＞97.5%)＜Ea，表明待評方法的性能等同于對照方法；Ea＜Bc的95%CI下限，表明預期偏差很可能(＞97.5%)＞Ea，表明待評方法的性能和對照方法不等同。

1.5 統計學方法

檢測所得數據均使用Microsoft Excel 2010軟件進行統計學分析，計算偏倚、制作散點圖以及線性回歸分析。

2 結果

2.1 日間精密度

檢測低、中、高3個水平濃度質控品，均符合WS/T 406-2012的要求[6]。D6-CRP型血細胞分析儀各檢測項目的日間精密度結果見表1。

2.2 實驗室結果可比性

根據WS/T406-2012表8要求，分別計算不同濃度的相對偏差，WBC、RBC、HGB、HCT及PLT的5個檢測項目的相對偏差符合要求比例均≥80.0%，且均符合WS/T 406-2012的要求，D6-CRP型血細胞分析儀各檢測項目的相對偏差符合率結果見表2。

表1 D6-CRP型血細胞分析儀各檢測項目的日間精密度(%)

表2 D6-CRP型血細胞分析儀各檢測項目的相對偏差符合率

2.3 相關性

以XN-9000型血細胞分析儀為對照儀器，D6-CRP型血細胞分析儀與其進行線性關系和回歸分析結果顯示，2臺儀器各檢測項目間的相關系數均＞0.975，符合EP9-A2的要求，其結果見表3。

表3 D6-CRP型血細胞分析儀各檢測項目相關系數及直線回歸方程

2.4 臨床可接受判斷

根據臨床可接受性判斷[14]標準，對其臨床可接受性能進行評價，對檢測項目相對偏差Bc%＞1/2TEa，分析預期偏倚Bc的95%CI。其結果見表4和表5。

表4 D6-CRP型血細胞分析儀各檢測項目臨床可接受性能評價

表5 D6-CRP型血細胞分析儀檢測項目臨床可接受性能評價

3 討論

血常規是臨床上常見的檢測項目，無論是健康體檢、急診檢測或生病入院均離不開血常規檢測。由于樣本量大、采血方式和科室區分等限制，導致僅靠1臺血細胞分析儀滿足不了臨床使用需求，目前較多實驗室均配有多臺相同或不同廠家的血細胞分析儀，不同的血細胞分析儀之間的檢測原理、試劑、質控品及校準品等的不同，可能導致儀器間的檢測結果存在較大的偏差。本實驗比對的2臺血液分析儀為不同公司的儀器，使用不同的室內質控品，因此選擇EP9-A2指南進行了儀器間WBC，RBC，HGB，HCT和PLT的5個檢測結果進行比對。研究結果表明，2臺儀器間結果有良好的相關性，相關系數均＞0.975；在各個醫學決定水平處，其中PLT為50×109/L的相對偏差Bc%＞1/2TEa，但其Ea均落在95%CI內，表明是由抽樣誤差所造成，其待評方法的偏差可接受，其余項目的相對偏差Bc%均≤1/2TEa。因此，XN-9000與D6-CRP儀器之間具有可比性，為臨床所接受。

4 結論

為保證實驗室內結果統一以及不同實驗室結果的統一，除完善室內、室間質量檢測體系，還需根據現有參考文件建立合理的比對程序制度，定期開展儀器間的比對工作，保證檢測結果準確性，也給室內、室間質量控制得到良好補充[15]。醫療機構臨床實驗室管理辦法明確規定同一檢驗項目在不同儀器或系統上測定時，每年至少要比對一次，既是重要的質量控制方法，也是同一份新鮮全血在同一實驗室不同儀器間傳遞的可溯源性，從而使各檢測系統之間具有一致性，才能給患者提供一份安全的保障和責任感，方可滿足臨床所需[16-17]。