珙桐DiZF-CCCH1基因的克隆及表達分析

紀小敏，李 建，李 萌，曹福祥，董旭杰

（1.中南林業科技大學 生命科學與技術學院，湖南 長沙 410004； 2.湖南農業大學 園藝園林學院，湖南 長沙 410128）

珙桐Davidia involucrata是珙桐科珙桐屬高大喬木，我國特有的珍稀孑遺植物，國家一級保護植物[1]。珙桐種子休眠期長，敗育率高，嚴重限制了其自然更新能力。隨著分子生物學技術的快速發展，分子標記技術在分析珙桐遺傳變異中得到應用，Long 等[2]從珙桐葉片mRNA 轉錄本中開發基因的簡單重復序列（SSRs），共獲得了30 411個基因的SSR 位點，12 208 對引物，該研究建立和完善了珙桐表達序列標簽數據和新SSR 標記，為揭示珙桐物種的適應性進化、種群結構和解決遺傳多樣性等問題提供依據[3-4]。珙桐中的關鍵基因也不斷被克隆鑒定，例如季紅春等[5]從珙桐cDNA 文庫中克隆獲得了一個未知基因DiRCI，實驗結果表明該基因編碼低溫誘導膜蛋白。劉美等[6]成功得到了珙桐熱休克蛋白18（HSP18）的基因序列，對其進行生物信息學分析，推測該基因可能與珙桐種子對不良環境的適應性相關。戴鵬輝等[7]克隆了一個與花青素相關且編碼MYB 轉錄因子的DiMYB1基因，表達分析發現DiMYB1在敗育種子中的表達量均高于正常種子，推測該基因可能在珙桐種子敗育過程中發揮重要作用。熊亞麗等[8]克隆了珙桐纖維素合酶CesA基因，表達模式分析發現其在敗育種子中上調表達，推測該基因是調控纖維素合成的關鍵基因并且在珙桐敗育過程中起到調控作用。吳曉波等[9]克隆得到了珙桐內果皮發育過程中差異表達基因DiCCoAOMT1， 功能分析顯示該基因可能是珙桐內果皮木質素合成的關鍵基因。……