C242T基因多態性與老年急性心肌梗死患者的相關性

田水 巫廷春 田龍海 葉蕓

(1貴州省人民醫院心內科，貴州 貴陽 550002；2貴州省中醫藥大學附二院心內科)

急性心肌梗死(AMI)是在冠狀動脈急性、持續性缺血缺氧的基礎上發生，多表現為胸骨后疼痛，可并發心律失常、休克等，常危及生命〔1〕。AMI是多基因疾病，其發生發展與多種易感基因有關。相關研究表明，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性降低會導致血管的氧化功能、氧化應激功能及降低活性氧功能的喪失，這與NADPH中細胞色素p22phox亞基C242T基因多態性有關〔2〕。同時，C242T多態性也是血紅蛋白的潛在結合位點之一，對體內低密度脂蛋白表達水平有影響〔3〕。本文旨在探討C242T基因多態性與老年AMI患者的關系。

1 資料及方法

1.1一般資料 選取貴州省人民醫院2016年7月至2018年3月收治的126例老年AMI患者為病例組，同期選取132例健康體檢者為對照組。納入標準：符合《2016年中國成人血脂異常防治指南》〔4〕、《急性心肌梗死診斷和治療指南》〔5〕診斷標準；意識清晰，無精神病史；無嚴重瓣膜病、心房顫動等；無嚴重凝血功能障礙。排除標準：嚴重肝腎疾病者；腦梗死者；周圍動脈栓塞者；惡性腫瘤者；依從性差者。本研究已獲得醫院倫理委員會批準，患者及其家屬均知情并簽署相關同意書。

1.2提取外周血白細胞DNA方法 所有患者晨起空腹采肘靜脈血5 ml，并低溫儲存于乙二胺四乙酸抗凝管中，備用。采用酚-氯仿有機油提法提取患者外周血白細胞DNA，并低溫保存于TE緩沖液中，備用。

1.3指標檢測 采用細胞NADPH氧化酶活性光度法定量檢測酶活性；采用全自動生化分析儀檢測血糖、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、總膽固醇水平；采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)測定兩組血漿氧化高密度脂蛋白(ox-HDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)及丙二醛水平；采用ELISA試劑盒測定血漿氧化低密度脂蛋白 (ox-LDL)水平；采用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性(PCR-RFLP)技術檢測基因型和等位基因。操作步驟均嚴格按照說明書進行。

1.4統計學方法 采用SPSS22.0軟件進行t檢驗、χ2檢驗、Fisher確切概率法及Hardy-Weinberg平衡檢驗。

2 結 果

2.1兩組基線資料比較 兩組平均年齡、性別、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、高血壓史、平均收縮壓、總膽固醇水平差異無統計學意義(P>0.05)；病例組心率、三酰甘油、白細胞計數、平均舒張壓、空腹血糖、肌鈣蛋白、LDL-C、ox-HDL、ox-LDL、丙二醛水平和NADPH氧化酶活性明顯高于對照組，而HDL-C水平明顯低于對照組(P<0.05，P<0.01)。見表1。

表1 兩組基線資料比較

2.2C242T各位點基因型分布情況 經Hardy-Weinberg平衡檢驗，發現各基因型分布頻率均為遺傳平衡(P>0.05)，具有群體代表性。病例組CT+TT基因型攜帶者〔21例(16.67%)〕高于對照組〔8例(6.06%)〕，差異有統計學意義〔χ2=7.27,P<0.05,OR(95%CI):1.57(0.87～1.69)〕。

2.3兩組基因型和等位基因頻率比較 病例組TT、CT基因型頻率和T等位基因頻率明顯高于對照組，而CC基因型頻率和C等位基因頻率低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組基因型和等位基因頻率比較

2.4相關性分析 年齡、性別、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、高血壓史、三酰甘油、LDL-C、HDL-C及總膽固醇均不是混雜因素(χ2=2.62、0.08、0.04、1.05、2.20、2.93、1.82、3.13、1.62、1.95，P=0.11、0.77、0.84、0.31、0.14、0.09、0.18、0.08、0.20、0.16)，而丙二醛、ox-HDL、ox-LDL、NADPH氧化酶活性與C242T基因型相關(χ2=8.36、6.45、7.33、10.26，P<0.01、P=0.03、0.02、0.00)。

3 討 論

AMI是在冠狀動脈病變的基礎上發生的一種缺血性心肌壞死〔6〕。病因復雜，可能與高血壓、糖尿病、生活壓力、體力勞動等有關〔7〕。國外研究表明〔8〕，C242T基因多態性可減少埃及人AMI的發生，并發現 CT基因型者ox-LDL血漿濃度顯著低于 CC基因型者。相關研究表明，基因序列變異能改變其表達，并導致產生的蛋白質功能異常，從而影響疾病進展〔9〕。為此，推測C242T基因多態性可能與AMI的發生發展存在一定關系。

研究表明，LDL氧化能增強動脈粥樣硬化效應，而HDL氧化則會降低抗動脈粥樣硬化效應〔10〕。另外，其他研究〔3，11〕發現NADPH氧化酶p22phox亞單位CT+TT基因型攜帶者的ox-LDL水平顯著高于CC基因型，本研究結果與之相符。另有研究表明，NADPH氧化酶活性與AMI的進展存在一定相關性〔12〕。NADPH氧化酶是血管系統中活性氧的主要來源，活性氧是動脈粥樣硬化發病的重要危險因素，NADPH氧化酶活性越高，活性氧含量越高，越容易形成動脈粥樣硬化斑塊，同時NADPH氧化酶活性受C242T基因型的影響。丙二醛是血漿脂質過氧化產物，有研究表明C242T基因多態性與丙二醛水平相關〔13〕。本研究結果與之相似，表明C242T基因多態性與老年AMI的發生有關。另外，C242T多態性可能是冠狀動脈病變的危險因素，攜帶T等位基因很可能會增加冠狀動脈疾病的發生〔14〕。本研究結果表明，攜帶等位基因T患者發生AMI的風險較高。

綜上所述，NADPH氧化酶細胞色素p22phox亞基C242T基因多態性會影響NADPH氧化酶的活性，與老年AMI患者存在相關性。