8876例不同性別患者尖銳濕疣組織HPV基因型對比研究

曾成龍 朱繼鋒 朱冠男 馮 婷 閆 丹 趙小東 王勝春

第四軍醫大學西京皮膚醫院，陜西西安，710032

人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是一種小分子雙鏈DNA病毒，對人皮膚和黏膜有高度親嗜性，根據編碼衣殼蛋白L1的基因序列不同確立HPV基因型別，目前已發現該病毒有200余種亞型[1]。不同型別的HPV感染可以導致不同的臨床病變[2]，其中42種基因型與生殖道疾病有關，HPV不僅是尖銳濕疣(condyloma acuminate，CA)的病原體，而且還與多種惡性腫瘤及癌前病變密切相關，研究顯示，女性HPV感染與宮頸癌的發生密切相關[3]，明確HPV16，18，31，33，35及58型等高危亞型的感染是女性宮頸癌的主要病因[4]，男性作為HPV傳播的重要“載體”[5]，但男性HPV感染的相關研究目前較少。掌握男女HPV感染狀況和基因亞型的分布特征，對CA的流行病學研究及其防治均有重要的臨床意義，本文對此進行回顧分析。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2010年9月至2019年9月就診于我院性病門診CA患者。入選標準：①參照中國疾病預防控制中心制定的《性傳播疾病臨床診療指南》 中CA的診斷標準；②HPV基因分型檢測陽性。排除標準：①臨床基本資料缺失；②其它HPV相關感染疾病；③系統免疫性疾病患者。

1.2 標本采集 充分暴露疣體部位，隨機選取一處，先用生理鹽水清洗，在皮損處消毒，用消毒活檢鉗夾取疣體組織置于標本保存液，-20℃冰箱保存。

1.3 試劑和儀器 HPV基因分型檢測試劑盒由深圳亞能生物技術有限公司提供，可檢測包括18種高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，82，83)及5種低危型(HPV6，11，42，43，81)共23種HPV基因型。TL988實時熒光定量PCR儀由西安天隆科技有限公司提供，FYY-3型分子雜交儀由江蘇興化市分析儀器廠提供。

1.4 實驗方法 本研究采用PCR反向分子雜交法進行HPV基因分型檢測，實驗步驟嚴格按照試劑盒說明書進行操作，實驗全程做好質量控制。

1.5 統計學方法 應用SPSS 19.0軟件包進行數據匯總與統計分析，計數資料以率表示，男性和女性患者間HPV多重感染率和高危型感染率的比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 年齡分布 共入選8876例，男5717例(64.41%)，女3159例(35.59%)，年齡8個月～84歲，平均(32.83±11.15)歲。男女患者年齡分布主要集中在20～49歲，以20～29歲最多，各占41.68%和43.40%，見表1。

2.2 HPV基因型別比較 8876例患者共檢測出23種基因型，以HPV6、11為主要感染的亞型，其比率分別為61.55%和32.92%。排名前十位的HPV基因型從高到低依次為：HPV6，11，16，43，42，52，59，58，51和18型(男性)；HPV6，11，16，52，43，51，58，56，53和59型(女性)。比較男女各種HPV基因型的檢出率，男性HPV11、45和73型這三種檢出率高于女性，其它二十種型別則相反，且除HPV6，42，43，45，73，82和83外均有統計學差異(P<0.05)， 見表2。

2.3 HPV基因型多重感染比較 CA患者感染以單一型別感染為主，共5282例(59.51%)，多重型別感染次之為3594例(40.49%)。其中，女性多重(二重及以上)型別的感染率顯著高于男性，具有統計學差異(P<0.0001)， 見表3。

表1 5717例男性和3159例女性CA患者年齡分布情況

表2 5717例男性和3159例女性CA患者HPV基因型檢出情況

表3 5717例男性和3159例女性CA患者HPV基因型多重感染比較

表4 5717例男性和3159例女性CA患者HPV基因型致癌性比較

2.4 HPV基因型的致癌性比較 CA患者感染以低危型感染為主，共感染5434例(61.22%)，高危型感染次之為3442例(38.78%)。其中，女性高危型的感染率顯著高于男性，具有統計學差異(P<0.0001)，見表4。

3 討論

CA患者感染的HPV亞型較多，且不同基因型可能會影響到CA的發病特點和預后轉歸[6]，目前大多數研究集中在女性HPV感染及其相關的宮頸病變問題上[7,8]，而對男性HPV感染的相關問題關注較少[9]，缺乏其大樣本的HPV感染研究資料，文獻顯示男性患病率高于女性患者[10]，臨床中男性CA患者多于女性，故有必要將男性和女性進行比較分析研究其HPV感染特點。

本研究結果顯示男性和女性HPV感染特點不完全相同，主要表現在：①男性和女性均檢測出23種HPV基因型，但感染的HPV基因型頻數不同，從兩者排名前十位頻數分布表可以看出，除前三名(均為6、11和16)順序一致外，從第四名至十名，型別種類、頻數和檢出率則不相同，男性HPV11、45和73型的檢出率要高于女性，這與Komlos等[11]報道一致，其它型別則女性高于男性，且23種型別當中除HPV6，42，43，45，73，82和83外均有統計學差異，此點提示HPV疫苗對男性和女性的覆蓋率可能不同[12]。②男性和女性感染的年齡段分布大致相同，均主要集中在20～49歲，以20～29歲最多。③男性和女性HPV基因型多重感染和致癌性不全相同，總體上兩者均以單一和低危型感染為主，以多重、低高混合型和高危型感染次之[13]，男女比較顯示男性單一和低危型的感染率高于女性，女性多重、高危型的感染率高于男性，這與其它研究的結果基本一致[14,15]。男性和女性HPV感染特點不完全相同的原因可能是由于男女性在HPV感染狀態、機體免疫系統等方面存在差異，這是否與女性生殖道特殊的生理結構及生理環境有關尚待進一步研究。

本研究女性多重、高危型的感染率高于男性，有文獻報道高危型HPV感染是尖銳濕疣患者復發重要原因[16]，臨床上要重視女性CA復發的問題和加強女性的隨訪管理，正常情況下所有CA患者治療后的最初3個月，至少每2周隨診1次，隨訪至末次治療后6個月[17]。鑒于本研究結果，筆者建議女性的隨訪期可延長至1～2年，必要時做HPV檢測和宮頸細胞學的檢查。