羅布麻葉對高血壓大鼠血壓及機體免疫的影響

錢雯麗 孫敏 劉若楠

摘 要 目的：觀察羅布麻葉對高血壓大鼠血壓及免疫的影響。方法：降血壓實驗，經口給予自發性高血壓（SHR）大鼠不同劑量的羅布麻葉，設三個劑量組、空白對照組和高劑量正常組，連續灌胃30天。檢測并比較各組大鼠血壓、心率。免疫實驗，灌胃給予KM小鼠不同劑量羅布麻葉，設三個劑量組和一個陰性對照組。連續灌胃30天后，處死小鼠進行細胞免疫、體液免疫、單核-巨噬細胞吞噬功能指標、NK細胞活性測定。結果 ?羅布麻葉具有增強動物免疫力、降低高血壓大鼠血壓的作用。

關鍵詞羅布麻葉;免疫;血壓;大鼠;小鼠

羅布麻（ Apocynum venetum L.） 是夾竹桃科多年生宿根性草本植物，自然分布在中國西北的新疆、青海、甘肅、內蒙、寧夏等部分地區，有很高的藥用價值[1]。羅布麻葉羅布麻葉中主要含有黃酮類、鞣質、低分子有機酸類、長鏈脂肪酸酯、醇類、甾體類等成分。本草綱目記載其有平心悸、止眩暈、消喘止咳、強心利尿之功能。中國藥典記載其清熱利水、平肝安神， 用于高血壓、頭暈、心悸、失眠。現代研究表明， 羅布麻葉具有降血壓、降血脂、增強免疫力、抗焦慮、保護肝臟等多種功效[2-4]。本實驗觀察羅布麻葉對高血壓大鼠的降壓作用及其對正常小鼠免疫功能的影響。

實驗材料

1.1 動物 SHR雄性大鼠48只，SPF級，體重180～220g;Wistar大鼠12只，清潔級，雄性，體重180～220g，用于降血壓功能實驗。SPF級ICR雄性小鼠，160只，體重18～22g，用于增強免疫力功能實驗。大鼠、小鼠均由上海斯萊克實驗動物有限公司提供。

1.2 受試物羅布麻葉產地新疆羅布。羅布麻葉用10倍85℃熱水浸泡40min，浸泡2次，收集濾液。于70℃濃縮成浸膏，浸膏以純化水稀釋至相對應濃度進行灌胃。降血壓實驗，濃縮浸膏加純水分別稀釋至含藥材100mg/ml、50mg/ml和25mg/ml進行大鼠灌胃。增強免疫實驗。濃縮浸膏加純水分別稀釋至含藥材50mg/ml、17mg/ml和8.5mg/ml的濃度進行小鼠灌胃。

1.3 儀器 BP-98A型血壓測量儀、酶標儀、分光光度儀、二氧化碳培養箱、電子分析天平、離心機、微量注射器等。

1.4 分組及劑量 降血壓實驗，以高血壓大鼠設低、中、高劑量組（100mg/ml、50mg/ml和25mg/ml）和高血壓空白組，同時設正常大鼠高劑量組（100mg/ml）。高血壓劑量組和正常大鼠高劑量組以相對應濃度羅布麻葉浸膏稀釋液灌胃，高劑量空白組灌胃等體積純化水，灌胃體積為10ml/kg。連續30天。每周測1次血壓。

增強免疫功能實驗，160只小鼠分為四個大組每組40只。A組用于小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗;B組用于NK細胞活性測定及淋巴細胞轉化實驗;C組用于抗體生成細胞實驗、血清溶血素測定和遲發性變態反應實驗; D組用于小鼠碳廓清實驗。大組再分成4個小組，每組10只。設高、中、低三個劑量組（50mg/ml、17mg/ml和8.5mg/ml）和陰性對照組。三個劑量組分別灌胃對應濃度的羅布麻葉浸膏稀釋液，陰性對照組灌胃純化水，灌胃體積20ml/kg。連續灌胃30天，處死小鼠進行相關指標測定。

方法

2.1實驗方法 按照《保健食品檢驗與評價技術規范》（ 2003 版）中“輔助降血壓功能檢測方法-動物實驗”及“增強免疫力功能實驗”有關方法進行。輔助降血壓功能進行動物的體重、血壓和心率測定;增強免疫力功能實驗內容實包括：細胞免疫功能、單核-巨噬細胞功能、體液免疫功能、NK細胞活性四個方面。

2.2統計分析： 試驗數據采用SPSS 17.0軟件包進行分析。對照組與劑量組的比較用方差分析，如方差齊，則用SNK法進行兩兩比較;若方差不齊，則Dunnetts T3 法進行兩兩比較，顯著性水平P≤0.05。

結果

3.1降血壓實驗結果

3.1.1對大鼠體重的影響 試驗初始及實驗期間動物體重、體重正常增長，各組動物體重的差異無統計學意義（P>0.05）。

3.1.2對大鼠血壓的影響 由表1可見，前面三周各劑量大鼠血壓與高血壓空白組比較無明顯變化，第四周中、高劑量組大鼠血壓較高血壓空白組顯著下降，差異有統計學意義（P<0.05）。正常大鼠給予高劑量羅布麻葉，實驗過程中血壓無明顯變化。

3.1.3對大鼠心率的影響 由表2可見，整個實驗過程，各劑量大鼠、空白組和正常高劑量組大鼠心率均無明顯變化，各劑量組大鼠心率與高血壓空白組大鼠比較無明顯變化，無統計學意義（P>0.05）。

3.2增強免疫力實驗結果

3.2.1對小鼠體重的影響 試驗初期、中期、末期各劑量組小鼠體重，與陰性對照組比較無明顯變化，差異無統計學意義（P>0.05）。

3.2.2對小鼠脾臟/體重、胸腺/體重比值：連續灌胃30天后，各劑量組小鼠脾臟/體重比值、胸腺/體重比值與陰性對照組比較，無顯著性差異（P>0.05）。

3.2.3對小鼠細胞免疫的影響 連續灌胃30天后，中，高劑量組小鼠的耳殼增重顯著高于對照組（表3，P<0.05，P<0.01）;三個劑量組小鼠的淋巴細胞增殖能力與對照組相比，無顯著性差異（表3，P>0.05）。

3.2.3對小鼠體液免疫功能： 與陰性對照組比較，各劑量組小鼠溶血空斑數，無明顯變化，差異無統計學意義（表4，P>0.05）;中、高劑量組小鼠的血清溶血素值顯著高于與對照組;差異有統計學意義（表4，P<0.05）。

3.2.4.小鼠單核-巨噬細胞吞噬功能：三個劑量組小鼠的單核-巨噬細胞碳廓清吞噬指數與陰性對照組相比，無顯著性差異（表5，P>0.05）;中、高劑量組小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞指數較陰性對照組明顯升高，差異有統計學意義表5，P<0.05）。

3.2.5.小鼠NK細胞活性的影響：三個劑量組小鼠的NK細胞活性與對陰性照組相比，無顯著性差異（表6，P>0.05）。

討論

以上實驗顯示，羅布麻葉對高血壓大鼠具有降壓作用，對正常大鼠血壓、心率均無影響;羅布麻葉還可以增強小鼠遲發型變態反應、增加小鼠血清溶血數值、可提高巨噬細胞吞噬雞紅細胞的吞噬能力。對實驗數據進一步分析發現，降血壓實驗：第二周開始羅布麻葉對高血壓大鼠逐漸有影響，慢慢的下降，第四周時中劑量組、高劑量組大鼠的血壓較高血壓空白組明顯低，具有顯著性差異，且具有一定的劑量量效關系。說明羅布麻葉達到50mg/ml（折合藥材0.5g/kg）可以降低高血壓大鼠的血壓。增強免疫力實驗：低劑量組所有指標均體現與陰性對照無顯著性差異，中劑量、高劑量顯示在遲發型變態反應（耳殼增重）、血清溶血數值、巨噬細胞吞噬雞紅細胞的吞噬指數較陰性對照組，具有顯著增加。說明羅布麻葉達到17mg/ml（折合藥材0.33g/kg）可以增強小鼠免疫力。羅布麻葉具有增強動物免疫力、降低高血壓動物血壓的作用，降低血壓劑量要求較高。

引用文獻

1.趙曉娟，胡律江，郭慧玲，等.羅布麻藥理作用研究進展.江西中醫藥.2014年 10月，第10期總45卷第382期：76-78

2.李慶華，魏春雁，李建東，等.羅布麻葉藥理作用及臨床應用研究進展.中藥材.第 2008年5月，31卷第5期 ：784-787

3.周本宏，劉剛，胡先明，等.羅布麻對紅細胞膜脂質過氧化損傷的保護作用.廣東藥學院學報， 2004， 20（5）： 506-508

4.蘇冬梅，岳常青， 呂銳，等.羅布麻對耐藥性菌株R質粒的作用.青島大學醫學院學報，2005，41（4）：352