高效液相色譜法測定蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸

鄒力 嚴燁 范芳芳 吳坤

摘 要：建立了外標法測定蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸的高效液相色譜檢測方法。10-羥基-2-癸烯酸經乙醇超聲提取后，以甲醇∶甲酸（0.1%）=55∶45為流動相，經C18色譜柱分離，紫外檢測器檢測。結果顯示，在50～500 μg/mL濃度范圍內，線性關系良好，r=0.999 9，RSD<3%，加標回收率97%～105%。

關鍵詞：蜂王漿；10-羥基-2-癸烯酸；高效液相色譜法

10-羥基-2-癸烯酸是蜂王漿及蜂王漿凍干粉的重要檢測指標，國家標準[1-2]要求蜂王漿優等品的10-羥基-2-癸烯酸含量≥1.8%，合格品≥1.4%，蜂王凍干粉優等品的10-羥基-2-癸烯酸含量≥1.8%，合格品≥1.4%，但國家標準檢測方法為內標法，極其繁瑣，且內標檢測成本昂貴，因此研究快速準確檢測蜂王漿及蜂王漿凍干粉中10-羥基-2-癸烯酸的外標法具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 儀器

安捷倫1260型高效液相色譜儀帶紫外檢測器，超聲波清洗儀。

1.2 試劑

10-羥基-2-癸烯酸標準品（廠家：alfresa，純度：100%），甲醇（色譜純），無水乙醇（色譜純），甲酸（分析純）。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為甲醇∶甲酸（0.1%）=55∶45；流速為1.0 mL/min；柱溫為35 ℃；檢測波長：210 nm；進樣量20 μL。

1.4 樣品前處理

稱量0.5 g樣品，加入無水乙醇定容至50 mL，超聲15 min混勻，經孔徑為0.45μm的有機濾膜過濾后上機檢測。

2 結果與討論

2.1 標準曲線繪制

分別取1 mg/mL的10-羥基-2-癸烯酸儲備液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL與5.0 mL于10 mL容量瓶中，用無水乙醇定容至10 mL，隨后按照1.3條件上機檢測，得到圖1所示的結果，根據結果繪制標準曲線，濃度范圍在50～500 μg/mL時，線性良好，r=0.999 9。

2.2 實際樣品分析

采用本方法對蜂王漿進行10-羥基-2-癸烯酸含量檢測（圖2）、加標回收試驗及重復性試驗，結果表明回收率可達97%～105%，樣品重復測定6次，RSD<3%。

3 結論

本實驗建立了測定蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸含量的方法，該方法使用高效液相色譜法外標法定量，操作便捷、前處理簡單、成本低、結果穩定，適用于蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸的測定。

參考文獻

[1]中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局.GB 9697-2008 蜂王漿[S].北京：中國標準出版社，2012.

[2]中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局.GB/T 21532-2008 蜂王漿凍干粉[S].北京：中國標準出版社，2008.