安徽省兒童白血病的融合基因及染色體核型分析

朱麗娟， 蘇曉霽， 余 霞， 王 洋

安徽省兒童醫院檢驗科，合肥 230051

兒童白血病是兒童腫瘤中最常見的惡性疾病，是造血干細胞克隆性增生的血液病，我國兒童的發病率逐年上升。惡性細胞因調控發生錯誤，導致增殖分化凋亡失控使細胞停滯在代謝的不同階段。不同類型的血液病危險程度、治療方案以及預后都不同，所以對白血病進行正確的分型和精準的病情評估是非常重要的[1-3]。本研究分析安徽省87例兒童白血病的融合基因和染色體核型情況，探討白血病融合基因和染色體核型的分析對白血病具體分型的意義，為臨床制定個性化的治療方案提供指導。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年4月至2019年4月在安徽省兒童醫院明確診斷為白血病的患兒87例，其中男47例，女40例，年齡0～18歲。

1.2 方 法 回顧性分析白血病患兒的融合基因和染色體核型分析的結果。采用SPSS 19.0統計軟件分析數據，計量資料運用χ2檢驗，檢驗水準(α)為0.05。

2 結 果

2.1 白血病患兒年齡分析 白血病患兒年齡集中在1～10歲，此年齡段人數為75(86.2%)。根據骨髓細胞形態學和免疫分型結果將白血病分為淋系和髓系2組，其中淋系60例(69.0%)，髓系27例(31.0%)。免疫分型結果與骨髓細胞形態學分析結果完全一致，其中淋系60例有7例T淋巴母細胞白血病(2例檢出特有的融合基因SIL-TAL1)，其他53例為B淋巴母細胞白血病，髓系的27例免疫分型結果均支持骨髓細胞形態學的判斷。白血病患兒未見性別差異，詳見表1。

表1 87例兒童白血病的整體分布情況

2.2 融合基因分析 融合基因陽性患兒38例(43.7%)：淋系26例，占所有淋系白血病的43.3%； 髓系12例，占所有髓系白血病的44.4%。常見基因型主要有TEL-AML1(26.3%)，AML1-ETO(18.4%)，E2A-PBX1(15.8%)，BCR-ABL(13.2%)。融合基因類型檢測結果與骨髓細胞形態學診斷以及免疫分型結果相互支持，詳見表2。

2.3 染色體核型分析 染色體核型異常共55例(63.2%)；未檢出任何異常染色體的29例，占33.1%；有3例未做此項檢驗。與融合基因匹配的特異性典型核型18例，占32.7%，其中淋系6例(33.3%)，髓系11例(61.1%)，混合譜系1例(5.6%)；沒有特定指向的復雜核型37例，占67.3%。最常見的融合基因TEL-AML1共10例，值得注意的是該融合基因與染色體核型結果完全不匹配，見表2。

2.4 融合基因和染色體核型的整體分布情況 融合基因陽性率在淋系和髓系中無差異，但染色體特異性典型核型易出現在髓系中，與融合基因匹配度較高(100%)，淋系中易出現復雜核型(50%)，與融合基因匹配的只有7例(25.9%)，見表3。

表2 融合基因陽性患兒融合基因的分布以及與染色染核型的比較

表3 融合基因和染色體核型的整體分布情況

3 討 論

急性白血病在兒童腫瘤中所占比例約為25%，其中主要為急性淋巴細胞白血病[4]。在白血病的發生發展過程中，通常伴隨著染色體的斷裂和融合，從而導致融合基因的產生，而由這些融合基因表達出來的融合蛋白又進一步參與調控白血病的發展。隨著分子生物學技術的精進，人類對融合基因的了解也越來越全面。它是由2個基因的編碼區發生連接，然后被同一基因控制元件調控表達，這樣形成了嵌合體基因。融合基因作為分子遺傳學的標志物在白血病診斷治療過程中起到了不可或缺的作用，為判斷疾病的預后提供了新的依據[5-6]。在我國，常見的白血病融合基因有BCR-ABL、TEL-AML1、E2A-PBX1以及AML1-ETO等[7-8]。

融合基因是由于染色體的改變導致的，在白血病的診療過程中染色體核型分析也是非常重要的檢查項目。如BCR-ABL融合基因對應的染色體核型——費城染色體，是t(9; 22)(q13; q11)2條染色體易位造成的；AML1-ETO主要見于AML患者，是t(8;21)(q22; q22)染色體的易位；同樣，E2A-PBX1融合基因是由t(1;19)(q23;p13)易位產生；兒童ALL中最常見的融合基因類型為TEL-AML1，是t(12;21)(p13;q22)的染色體異常核型[9]。不同的融合基因對應著特異性的典型染色體核型，而有些復雜的染色體核型沒有對應的特異性融合基因，或許是還沒有被發現。這些分子遺傳學檢測方法的聯合應用，在白血病的診斷治療過程中已得到廣泛認可。

本研究發現，在安徽省87例兒童白血病患者中淋系占69.0%(60/87)，髓系占31.1%(27/87)。86.2%(75/87)集中在1～10歲，可見急性淋巴細胞白血病在兒童白血病中的主導地位，這與兒童白血病的整體情況是一致的[4]。融合基因陽性率為43.7%，主要為常見基因型，如TEL-AML1、AML1-ETO、E2A-PBX1以及BCR-ABL，融合基因的陽性率相對于國內其他報道有些偏高[7]，可能是由于本研究檢測儀器的機型為高端機型(ABI-DX)，檢測性能較好。融合基因檢出率最高的是TEL-AML1，在其他研究中也有相同報道[8]。同時，本研究還檢出SIL-TAL1和 NPM-ALK，這2種融合基因分別對應T淋巴細胞白血病和淋巴瘤[10-11]，這與骨髓細胞形態學診斷及免疫分型結果相互支持，但與染色體核型不符。在臨床中，不同的融合基因類型有相應的治療方案。如檢出率最高的融合基因TEL-AML1，此基因陽性的T急性淋巴細胞白血病患者治療效果基本良好[12]，本研究隨訪4例患者，均沒有復發傾向。而E2A-PBX1、BCR-ABL以及T急性淋巴細胞白血病中的SIL-TAL1融合基因陽性患者，病情較兇險，預后較差[13-14]。故分子生物學手段對白血病臨床診療方案的確立有非常大的幫助。

本研究結果顯示，染色體核型異常共55例(63.2%，有3例未做此項檢驗)，未檢出任何異常的29例占33.1%。與融合基因匹配的特異性典型核型18例(32.7%)，其中淋系7例(38.9%)，髓系11例(61.1%)；沒有特定指向的復雜核型37例(67.3%)。融合基因陽性率在淋系和髓系中無差異，但染色體特異性典型核型易出現在髓系中，與融合基因匹配度較高，淋系中易出現復雜核型，與融合基因匹配的特異性核型較少。染色體核型與融合基因匹配的只有18例，其中TEL-AML1完全不符合，這與其他報道相符[15]，是由于t(12;21)(p13;q22)產生的易位，在核型分析時易位片段G顯帶相似度較高，通常不引起染色體形態的明顯改變，所以常規的染色體核型分析對這種易位的檢出率很低，通常不足0.05%[16]，但這一缺陷可以被FISH技術彌補。本研究還檢出4例混合譜系的融合基因MLL(AF17….)、TEL-ABL和TLS-ERG。其中MLL(AF17….)基因與染色體核型一致，其他2種融合基因類型的白血病很少見[17-20]，本研究中這2種少見型融合基因與染色體核型不符。

綜上所述，融合基因結合骨髓細胞形態能及時判斷出白血病的具體分型，染色體核型特異性較融合基因略差，但在髓系白血病診斷中有很重要的意義。在白血病的診斷和治療過程中，分子遺傳學檢測手段的聯合應用有很大的價值。